液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定芝麻油中乙基麥芽酚

馬 斐，李 鑫，張佳慧，張艷紅，姜 銳

（德州市食品藥品檢驗檢測中心，山東德州 253000）

乙基麥芽酚是一種安全、可靠、用量少、效果顯著的食品添加劑。作為一種香味改良劑、增香劑，應(yīng)用越來越廣泛，是煙草、食品、飲料、香精、果酒、日用化妝品等良好的香味增效劑，對食品的香味改善和增強(qiáng)具有顯著效果，對甜食起著增甜作用，且能延長食品儲存期。然而，乙基麥芽酚過量食用對人肝臟有影響，骨骼和關(guān)節(jié)提前脆變癌變等疾病。嚴(yán)重的還可能導(dǎo)致頭痛、惡心、嘔吐、呼吸困難，甚至能夠損傷肝、腎，對人體有較大的危害。

歐洲理事會將乙基麥芽酚列入可用于食品中而對人體健康無害的人造食用香料表中，其最高用量為10 mg/kg，ADI值為2 mg/kg[1]。中國根據(jù)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》（GB 2760—2014）食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，批準(zhǔn)為允許使用的食品香料。但不允許加入植物油中作為摻假或增香的手段使用[2]。

1 材料與方法

1.1 儀器、試劑與材料

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀SCIEX 5500 Qtrap，SCIEX公司；精密電子天平XSE105，瑞士Mettler-Toledo公司；試管渦旋振蕩器，德國海道爾夫（Heidolph）公司；H1850R臺式高速冷凍離心機(jī)，長沙高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)湘儀離心機(jī)儀器有限公司；13 mm×0.22 μm有機(jī)濾膜，上海安譜實驗室科技股份有限公司。

乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)品（100 mg，純度99.90%，批號：71032），北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司；甲醇（色譜純），德國默克。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)品及樣品溶液制備

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液

準(zhǔn)確稱取乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)品106.3mg，用甲醇溶解并定容至100 mL，此溶液濃度為1.063 mg/mL。吸取濃度為1.063 mg/mL的溶液1.00 mL至100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，溶液濃度為10.63 μg/mL[3]。

分別吸取濃度為10.63 μg/mL的溶液1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、5.00 mL至10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，溶液濃度分別為1.063 μg/mL、2.126 μg/mL、3.189 μg/mL和5.315 μg/mL。

準(zhǔn)確稱取與試樣基質(zhì)相應(yīng)的陰性試樣10 g，分別加入上 述5個 濃 度1.063 μg/mL、2.126 μg/mL、3.189 μg/mL、5.315 μg/mL和10.63 μg/mL溶液0.20 mL，與試樣同時進(jìn)行處理，制備成質(zhì)量濃度為10.63 ng/mL、21.26 ng/mL、31.89 ng/mL、53.15 ng/mL和106.3 ng/mL的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.2.2 樣品處理

準(zhǔn)確稱取10 g試樣置于50 mL聚丙烯離心管中，用移液器準(zhǔn)確加入10 mL甲醇，渦旋振搖2 min，4 ℃條件下離心10 min，將上清液移入20 mL具塞刻度試管中，下層油液再用10 mL甲醇重復(fù)提取一次，合并上清液，用甲醇定容至20 mL，經(jīng)微孔濾膜（0.22 μm，有機(jī)相）過濾，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析。

1.3 色譜條件

色譜柱：Agilent Poroshell 120 EC-C18（100 mm×3.0 mm，2.7 μm）；柱溫：40℃；流動相：A-0.1%甲酸水溶液，B-甲醇；梯度洗脫程序：0～1.5 min、50%B，1.5～3 min、50%～90%B，3～5 min、90%B，5～6 min、50% B；流速：0.3 mL/min；進(jìn)樣體積：2μL。

1.4 質(zhì)譜條件

采用ESI正離子模式，多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）+EPI監(jiān)測方式；離子噴霧電壓：5 500 V；離子源溫度：500 ℃；霧化器壓力：50 psi；輔助氣壓力：50 psi；氣簾氣壓力：35 psi；EPI參數(shù)：掃描范圍50～150 Da；阱集時間5.00 msec；碰撞能量30 eV（±15）。定性離子對、定量離子對、去簇電壓和碰撞能見表1。

表1 多反應(yīng)監(jiān)測檢測模式參數(shù)

2 結(jié)果與分析

2.1 樣品測定

采用該方法對30余批芝麻油進(jìn)行檢測，樣品均有本底值，見圖1，并用Q-trap進(jìn)行了全掃描圖譜的確認(rèn)，樣品與標(biāo)準(zhǔn)品中乙基麥芽酚峰的二級質(zhì)譜圖對比結(jié)果基本一致，匹配得分在95.0，見圖2和圖3。根據(jù)國家補(bǔ)充檢驗方法BJS 201708中規(guī)定檢出限為25.0 μg/kg，測得不合格樣品1批，含量為64.3 μg/kg。其余含量均低于方法檢出限。

圖1 樣品中乙基麥芽酚提取離子色譜圖

圖2 樣品中乙基麥芽酚二級全掃描色譜圖

圖3 乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)品二級全掃描色譜圖

2.2 芝麻油中含有乙基麥芽酚的結(jié)果分析

采用該方法同時對大豆油進(jìn)行檢測，樣品完全不含有乙基麥芽酚[4]，無本底干擾。說明芝麻油的原料本身會有或者加工工藝中可能產(chǎn)生乙基麥芽酚，但是正常值都會小于國家規(guī)定的方法檢出限。本實驗同時考察了不同原料的本底含量值，發(fā)現(xiàn)以進(jìn)口芝麻和國產(chǎn)芝麻為原料的芝麻油中乙基麥芽酚含量值并無差別。此次試驗的樣品均為小磨芝麻香油，均采用的是水代法工藝，對其他工藝沒有考察。與其他研究者討論，可能和工藝過程中的炒制時間、加熱溫度等有關(guān)系，會導(dǎo)致乙基麥芽酚本底含量的不同，有待進(jìn)一步實驗[5]。

3 結(jié)論

本實驗采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定芝麻油中乙基麥芽酚并用Q-trap進(jìn)行全掃描確認(rèn)。對30余批純芝麻油進(jìn)行了檢測，并證實芝麻油中確實含有乙基麥芽酚本底值，并非其他干擾物質(zhì)。本底含量值與原料關(guān)系不大，可能和工藝過程有關(guān)，有待進(jìn)一步實驗確證。