高效液相色譜法測定飲料中的阿力甜含量

李 銳

（山西省檢驗檢測中心食品與糧食檢驗技術研究所，山西太原 030012）

阿力甜是一種人工合成的甜度高、口感好、熱量低的甜味劑，具有良好的貯存與加工穩定性，作為代糖物質被廣泛用于飲料、糖果等食品加工領域[1]。然而，人工合成甜味劑都有著嚴格的適用范圍與添加限量，超范圍使用或過量添加會引起食用者出現不同程度的毒性表現，對人們的身體健康與食品行業發展不利，所以加強對飲料等銷量較高、深受廣大消費者追捧的日常食品中甜味劑的監管與檢測非常必要[2-3]。GB 5009.263—2016[4]中規定了用高效液相色譜法檢測食品中阿斯巴甜與阿力甜含量的方法，推薦使用DAD檢測器和VWD檢測器，本研究參照該標準，結合實驗室現有設備，建立了HPLC-VWD法測定飲料中阿力甜含量的方法。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

雪碧、優酸乳（購自某超市）；阿力甜標準品（編號：99016-42-9，批號：B0002377）；甲醇、乙腈均為色譜純；乙醇為優級純；試驗用水為一級超純水。

Agilent 1260高效液相色譜儀（配紫外檢測器）；AL104電子天平（精度0.0001g）；恒溫水浴鍋；高速離心機；渦旋混合器；Synergy超純水機等。

1.2 試驗方法

1.2.1 試樣處理方法

（1）以碳酸飲料雪碧作為基質，準確稱取5 g試樣于50.0 mL燒杯中，在50 ℃恒溫水浴鍋中水浴除去CO2后轉入25.0 mL容量瓶中，用超純水定容，搖勻，經0.45 μm水系濾膜過濾，上機檢測。

（2）以含乳飲料優酸乳作為基質，準確稱取5 g試樣于50.0 mL離心管中，加入10 mL乙醇，輕輕振搖5次，靜置1 min，于4 000 r/min離心機中離心5 min，將上清液轉入25.0 mL容量瓶中，用8 mL乙醇+水（2+1）洗滌沉淀，離心后將上清液合并至同一容量瓶，用乙醇+水（2+1）定容，搖勻，經0.45 μm水系濾膜過濾，上機檢測。

1.2.2 標準溶液配制

準確稱取0.025 0 g阿力甜標準品，用超純水溶解并定容至50.0 mL，配制得濃度為0.5 mg/mL的阿力甜標準儲備液。

準確移取0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL和2.0 mL阿力甜標準儲備液至5支10.0 mL容量瓶中，用超純水定容至刻度，搖勻，配制成質量濃度為5.0 μg/mL、10.0 μg/mL、25.0 μg/mL、50.0 μg/mL和100.0 μg/mL的標準工作系列。

1.2.3 液相色譜條件

色譜柱：C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱溫30 ℃；流動相：甲醇+水（40+60），流速0.8 mL/min，等度洗脫；進樣量：20 μL；檢測器為VWD（200 nm）。

2 結果與分析

2.1 阿力甜標準溶液的色譜分離分析

采用上述儀器條件，在25 min內能完成色譜分析，阿力甜標準溶液的峰型尖銳對稱，且與雜質峰較好分離，阿力甜標準溶液的色譜圖如圖1所示。

圖1 阿力甜標準溶液色譜圖

2.2 線性范圍及檢出限

將配制的標準工作系列在上述色譜條件下進行測定，以標準系列點濃度為橫坐標，對應的色譜峰面積為縱坐標繪制標準曲線。標準曲線方程為f(x)=57.946 29x+15.991 24，相關系數r=0.999 96，由此可見，阿力甜在5.0～100.0 μg/mL范圍內線性關系良好。根據3倍信噪比對應的目標物含量計算方法檢出限，得該方法的檢出限為0.006 g/kg。

2.3 方法回收率與精密度

向某雪碧試樣、優酸乳試樣中添加低、中、高3種濃度水平的阿力甜標準溶液，按照上述試樣處理方法、色譜分析條件將每個濃度水平平行測定6次，計算加標回收率與相對標準偏差RSD，結果見表1。

表1 加標回收率與精密度試驗結果

該方法的回收率為99.7%～106.1%，相對標準偏差RSD為0.43～1.34%。

3 結論

本研究建立的HPLC-VWD法測定飲料中甜味劑阿力甜含量的方法，線性關系良好，檢出限、回收率、精密度符合GB 5009.263-2016及GB/T 27404-2008[5]的相關要求，能夠滿足實驗室對飲料中阿力甜含量準確、快速、高通量的檢測需求。