微波消解-ICP-MS和高壓封閉消解-ICP-MS測定農產品中16種元素的方法研究

劉紅 鄭希帆 王紅麗 李智慧

摘 要：本實驗采用液相色譜-串聯質譜法測定芝麻油中乙基麥芽酚并用Q-trap進行全掃描確認。樣品以甲醇為提取溶劑，經渦旋混勻、低溫高速離心、微孔濾膜過濾后進行HPLC-MS/MS分析。采用Agilent Poroshell 120 EC-C18（100 mm×3.0 mm，2.7 μm）柱進行分離，梯度洗脫，流速0.3 mL/min，進樣量2μL。質譜分析采用電噴霧離子源，多反應監測（MRM）+EPI模式，外標法定量。結果表明，芝麻油中的乙基麥芽酚有本底干擾，含量低于國家標準要求檢出限。

關鍵詞：乙基麥芽酚;Q-trap;液相色譜-串聯質譜法;芝麻油;香料

乙基麥芽酚是一種安全、可靠、用量少、效果顯著的食品添加劑。作為一種香味改良劑、增香劑，應用越來越廣泛，是煙草、食品、飲料、香精、果酒、日用化妝品等良好的香味增效劑，對食品的香味改善和增強具有顯著效果，對甜食起著增甜作用，且能延長食品儲存期。然而，乙基麥芽酚過量食用對人肝臟有影響，骨骼和關節提前脆變癌變等疾病。嚴重的還可能導致頭痛、惡心、嘔吐、呼吸困難，甚至能夠損傷肝、腎，對人體有較大的危害。

歐洲理事會將乙基麥芽酚列入可用于食品中而對人體健康無害的人造食用香料表中，其最高用量為10 mg/kg，ADI值為2 mg/kg[1]。中國根據《食品安全國家標準 食品添加劑使用標準》（GB 2760—2014）食品添加劑使用衛生標準，批準為允許使用的食品香料。但不允許加入植物油中作為摻假或增香的手段使用[2]。

1 材料與方法

1.1 儀器、試劑與材料

液相色譜-串聯質譜聯用儀SCIEX 5500 Qtrap，SCIEX公司;精密電子天平XSE105，瑞士Mettler-Toledo公司;試管渦旋振蕩器，德國海道爾夫（Heidolph）公司;H1850R臺式高速冷凍離心機，長沙高新技術產業開發區湘儀離心機儀器有限公司;13 mm×0.22 μm有機濾膜，上海安譜實驗室科技股份有限公司。

乙基麥芽酚標準品（100 mg，純度99.90%，批號：71032），北京壇墨質檢科技有限公司;甲醇（色譜純），德國默克。

1.2 標準品及樣品溶液制備

1.2.1 標準品溶液

準確稱取乙基麥芽酚標準品106.3mg，用甲醇溶解并定容至100 mL，此溶液濃度為1.063 mg/mL。吸取濃度為1.063 mg/mL的溶液1.00 mL至100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，溶液濃度為10.63 μg/mL[3]。

分別吸取濃度為10.63 μg/mL的溶液1.00 mL、2.00 mL、

3.00 mL、5.00 mL至10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，溶液濃度分別為1.063 μg/mL、2.126 μg/mL、3.189 μg/mL和5.315 μg/mL。

準確稱取與試樣基質相應的陰性試樣10 g，分別加入上述5個濃度1.063 μg/mL、2.126 μg/mL、3.189 μg/mL、5.315 μg/mL和10.63 μg/mL溶液0.20 mL，與試樣同時進行處理，制備成質量濃度為10.63 ng/mL、21.26 ng/mL、31.89 ng/mL、53.15 ng/mL和106.3 ng/mL的基質標準工作溶液。

1.2.2 樣品處理

準確稱取10 g試樣置于50 mL聚丙烯離心管中，用移液器準確加入10 mL甲醇，渦旋振搖2 min，4 ℃條件下離心10 min，將上清液移入20 mL具塞刻度試管中，下層油液再用10 mL甲醇重復提取一次，合并上清液，用甲醇定容至20 mL，經微孔濾膜（0.22 ?m，有機相）過濾，供液相色譜-串聯質譜分析。

1.3 色譜條件

色譜柱：Agilent Poroshell 120 EC-C18（100 mm×3.0 mm，2.7 μm）;柱溫：40℃;流動相：A-0.1%甲酸水溶液，B-甲醇;梯度洗脫程序：0～1.5 min、50%B，1.5～3 min、50%～90%B，3～5 min、90%B，5～6 min、50% B;流速：0.3 mL/min;進樣體積：2?L。

1.4 質譜條件

采用ESI正離子模式，多反應監測（MRM）+EPI監測方式;離子噴霧電壓：5 500 V;離子源溫度：500 ℃;霧化器壓力：50 psi;輔助氣壓力：50 psi;氣簾氣壓力：35 psi;EPI參數：掃描范圍50～150 Da;阱集時間5.00 msec;碰撞能量30 eV（±15）。定性離子對、定量離子對、去簇電壓和碰撞能見表1。

2 結果與分析

2.1 樣品測定

采用該方法對30余批芝麻油進行檢測，樣品均有本底值，見圖1，并用Q-trap進行了全掃描圖譜的確認，樣品與標準品中乙基麥芽酚峰的二級質譜圖對比結果基本一致，匹配得分在95.0，見圖2和圖3。根據國家補充檢驗方法BJS 201708中規定檢出限為25.0 μg/kg，測得不合格樣品1批，含量為64.3 μg/kg。其余含量均低于方法檢出限。

2.2 芝麻油中含有乙基麥芽酚的結果分析

采用該方法同時對大豆油進行檢測，樣品完全不含有乙基麥芽酚[4]，無本底干擾。說明芝麻油的原料本身會有或者加工工藝中可能產生乙基麥芽酚，但是正常值都會小于國家規定的方法檢出限。本實驗同時考察了不同原料的本底含量值，發現以進口芝麻和國產芝麻為原料的芝麻油中乙基麥芽酚含量值并無差別。此次試驗的樣品均為小磨芝麻香油，均采用的是水代法工藝，對其他工藝沒有考察。與其他研究者討論，可能和工藝過程中的炒制時間、加熱溫度等有關系，會導致乙基麥芽酚本底含量的不同，有待進一步實驗[5]。

3 結論

本實驗采用液相色譜-串聯質譜法測定芝麻油中乙基麥芽酚并用Q-trap進行全掃描確認。對30余批純芝麻油進行了檢測，并證實芝麻油中確實含有乙基麥芽酚本底值，并非其他干擾物質。本底含量值與原料關系不大，可能和工藝過程有關，有待進一步實驗確證。

參考文獻

[1]周惠健，劉佩，劉嘉瓊，等.食品中乙基麥芽酚檢測方法的研究進展[J].食品安全質量檢測學報，2021，12（8）：3266-3272.

[2]胡啟立，劉國強，程江闖，等.食用植物油中乙基麥芽酚測定干擾未知物分析[J].食品工業，2021，42（2）：291-294.

[3]國家市場監督管理總局.總局關于發布《食用植物油中乙基麥芽酚的測定》食品補充檢驗方法的公告（2017年第97號）[EB/OL].（2017-08-17）[2021-06-06].http：//news.foodmate.net/2017/08/440795.html.

[4]羅小寶，孫藝，周芳梅，等.LC-MS/MS法測定食用植物油中乙基麥芽酚的不確定度評定[J].現代食品，2021（9）：188-194.

[5]林正鋒，李實飛，黃杰英，等.液相色譜-串聯質譜法測定乳制品中四種常用香料[J/OL].食品工業科技：1-11[2021-06-06].https：//doi.org/10.13386/j.issn1002-0306.2021010170.