lncRNA SNHG3 靶向調控miR-514a-5p對骨肉瘤細胞增殖、凋亡、遷移和侵襲的影響

譚曉謙 梅海波 伍江雁 嚴 安

湖南省兒童醫院骨科，湖南長沙 410007

骨肉瘤是骨腫瘤中常見的一種惡性腫瘤，具有侵襲性極高、惡性程度高、預后不良等特點，超過15%的患者在確診時已經發現有遠處轉移[1-3]。骨肉瘤的治療主要以手術切除和手術期化療為主，其中未發生遠處轉移的骨肉瘤患者的5 年生存率高達70%，但是轉移性和復發性骨肉瘤患者的5 年生存率低于20%[4-5]。近年研究結果顯示，長鏈非編碼RNA 在骨肉瘤中通過參與細胞分化、細胞增殖、細胞凋亡和轉移等生物學過程，發揮著重要的作用[6-8]。核仁小分子RNA 宿主基因3（small nucleolar RNA host gene 3，SNHG3）位于人染色體1p35.3 位置上，在多種腫瘤中異常表達。研究發現SNHG3 在骨肉瘤組織中高表達，與不良預后顯著相關；SNHG3 靶向作用miRNA-151a-3p 上調AB22A 表達促進骨肉瘤細胞的侵襲和遷移[9]。微小RNA（microRNA，miRNA）在多種腫瘤中起到抑癌或促癌的作用，miR-514a-5p 在多種癌細胞中表達下調，但miR-514a-5p 在骨肉瘤的作用機制尚不明確。因此，本研究探討SNHG3 通過靶向調控miR-514a-5p對骨肉瘤細胞增殖、侵襲、遷移的作用，為骨肉瘤疾病的診斷、治療提供參考。

1 材料與方法

1.1 細胞與主要試劑

成骨細胞hFOB1.19 和骨肉瘤細胞SW-1353、HOS、U-2OS、Saos-2 購于中國科學院上海細胞庫；胎牛血清（9735212）、DMEM 培養基（91249142）購于美國Gibco 公司；si-NC、si-SNHG3、miR-NC、miR-514a-5p、anti-miR-NC 和anti-miR-514a-5p 購于廣州瑞博生物公司；引物由上海吉瑪公司設計合成；LipofectamineTM2000 轉染試劑盒（10652-011）、Trizol 試劑盒（10153-023）購于美國Invitrogen 公司；熒光定量試劑盒（RR246B）、反轉錄試劑盒（452237152）購于大連Takara 公司；CCK-8 試劑盒（32021）購于日本同仁公司；凋亡試劑盒（C0948）購于碧云天生物研究所；c-Myc 抗體（3097T）、Bax 抗體（0265T）、MMP-2 抗體（4026T）購于美國CST 公司；Transwell 小室（3564314 13324）購于美國Corning 公司；……