虹彩病毒疫苗在鱖魚脾腎壞死病防疫中的試驗

孫 青，丁文玲，方麗君，馮桃健

(1.揚州市江都區水產技術服務站，江蘇 揚州 225200；2.揚州市江都區淥洋湖水產養殖場，江蘇揚州 225262)

揚州市江都區鱖魚養殖起步于20世紀90年代末，經過20年多年的發展，鱖魚已成為江都區水產養殖主要品種之一，也是江都區漁業鄉村振興的支柱產業。長期以來，江都區鱖魚養殖的苗種主要依賴于南方，由于其親本退化，苗種質量得不到保證，造成近幾年來池塘養殖鱖魚抗病力下降、成活率低、養殖效益嚴重下滑狀況。據調查，2020年江都區邵伯鎮鱖魚養殖傳染性脾腎壞死病(病原為細胞腫大虹彩病毒)，6－9月發病率70%以上，發病塘死亡率48%以上，直接經濟損失達1 200萬元，已成為該地區鱖魚養殖的“頭號殺手”。目前，該病生產上尚缺乏有效的防范機制。為探索鱖魚傳染性脾腎壞死病有效預防方法，2019－2020年筆者在中山大學生命科學學院指導下，在江都區淥洋湖水產養殖場鱖魚養殖池塘，采用虹彩病毒滅活疫苗對鱖魚大規格魚種進行接種注射免疫，取得了較好的效果。現將疫苗接種方法及試驗情況報告如下。

一、材料與方法

1.池塘選擇

試驗池塘選澤江都區淥洋湖水產養殖場鱖魚養殖池塘。2019年試驗池塘為5排6號、6排4號，對照塘為3排2號；2020年為4排3號、4排1號，對照塘為5排8號。池塘交通方便，有獨立進排水系，水質無污染，水深1.6～1.8米，淤泥厚度小于30厘米。池塘池底平坦，水源充足，排灌方便，每3畝水面配1臺3千瓦葉輪式增氧機。

2.池塘清整

冬季進行清淤、池埂修復、進排水系疏通等池塘改造工作，苗種下塘前30～45天用生石灰帶水清塘，用生石灰120千克/畝化漿后全池潑灑，清除黃鱔、烏鱧、小龍蝦等鱖魚苗敵害。

3.苗種來源

4月25日－5月10日，鱖魚苗種培育戶從我國南方購進規格為1厘米左右的鱖魚烏仔，先進行20～35天苗種培育，5月中下旬－6月上旬鱖魚苗培育成大規格魚種(5厘米左右)，開始向鱖魚成魚養殖戶供應。試驗組購進鱖魚大規格魚種后，先放養在靠近成魚養殖池的鱖魚餌料魚池進行10～15天標粗，當鱖魚規格達到8～12厘米時準備疫苗接種免疫。

4.流行病學調查

調查近幾年發病史，主要調查上年度鱖魚傳染性脾腎壞死病發病狀況、病原來源、發病魚日齡及規格，發病池塘水溫、水質、飼料情況，發病時間與病程、發病率與病死率，根據當年天氣、水溫、鱖魚苗培育規格及池塘準備情況，預測當年鱖魚傳染性脾腎壞死病首次發病時間，確定疫苗接種時間。

5.殺蟲消毒、抗應激

拉網注射前5天檢查魚體，如有寄生蟲，應先用殺蟲藥殺蟲，兩天后用消毒藥對魚體消毒；無蟲則直接用消毒藥進行消毒。注射拉網前全池潑灑VC，提高鱖魚苗對拉網、捕撈、注射等的抗應激能力。

6.疫苗接種

(1)疫苗的選擇。①選擇鱖魚傳染性脾腎壞死病病原細胞腫大虹彩病毒滅活疫苗；②應選擇有資質廠家生產，明確標識疫苗名稱、批準文號、生產批號、出廠日期、保存期、使用方法、保管容器、運輸方法等；③應逐瓶檢查疫苗瓶有無破損、瓶蓋是否松動、疫苗瓶內容物的顏色、性狀是否有異常，否則禁用；④選用乳劑疫苗為好。

(2)疫苗接種器具及工具的準備與處理。注射器、針頭選用0～0.5毫升獸用連續注射器，注射針頭根據免疫苗種規格選用6#、7#針頭。免疫注射前，將連續注射器和針頭反復清洗，開水煮沸15分鐘備用。拉網需經曝曬3天以上，抄網、魚桶、網箱、盛魚器具使用前用3%～5%食鹽溶液消毒。

(3)疫苗的保存和使用。疫苗購進后應及時放入冰箱保存，保存溫度為4℃左右，保存期限越短越好，最長不超過6個月，保存過程中應經常翻動玻璃瓶裝的疫苗。注射使用前，將疫苗從冷藏箱中取出，待疫苗溫度升至接近當日溫度時才可使用，同時充分搖勻。

(4)鱖魚疫苗接種條件及準備。5月中下旬，水溫15～25℃，選擇無風、晴好天氣，將鱖魚苗拉網至背風遮陽的近岸處，暫養在靠近增氧機的網箱中并開動增氧機。待接種免疫的鱖魚種應體質健壯、無病，已發病的鱖魚不能注射疫苗。調整注射器注射刻度，疫苗瓶安裝排氣針，將疫苗瓶、注射器、連接導管內空氣排空。

(5)疫苗注射方法。一人將暫養在網箱中的魚(300～500尾)分批趕向網箱一端，魚體僅背鰭露出水面。疫苗瓶懸掛于待免疫的魚網箱上方，另一空網箱靠近并固定于暫養魚網箱一側。注射時一只手拿注射器，另一只手抓魚，針頭朝魚頭方向，并與魚體成30～45°刺入魚體胸鰭基部或背鰭基部，以胸鰭基部為佳。注射疫苗的部位應明顯見到疫苗進入肌肉的“白線”痕跡。注射劑量為10厘米以下的苗種0.08毫升/尾、10厘米以上苗種0.1毫升/尾。注射時應做到“穩、準、快”，負責折網人員應注意魚的活動情況，一旦發現小部分魚浮頭要及時潑水或提高水位。連續注射兩小時后，將已注射的魚及時移到附近已清塘消毒的成魚養殖池。

7.養殖管理

(1)疫苗接種注射前后鱖魚池四周要攔網，阻擋鳥類覓食，調節水質，潑灑VC、果酸等抗應激制劑。鱖魚接種后放入成魚池中第1天即用聚維酮碘清毒，連用2天，2周后加注新水。

(2)合理投喂餌料魚，餌料魚以鱖魚2～3天吃完為好，前期用鯽魚苗作餌料魚，7月后改用廣東鯪魚，發病季節適當減少投喂，以減少鱖魚發病。

(3)定期交替使用EM菌、芽孢桿菌、糞鏈球菌等生物制劑及底質改良劑，常開增氧機，保持溶氧充足；養殖后期水質老化，氨氮、亞硝酸鹽偏高，應減少鱖魚餌料投喂量，及時降解池水中的有害物質，適當加注新水、換水。

(4)鱖魚養殖期間斜管蟲病危害比較重，水溫在20～25℃時應勤采魚樣，用顯微鏡檢查斜管蟲，鏡檢一旦發現斜管蟲，立即用藥；梅雨季節鱖魚出血病也會經常發生，應及時預防、治療。

8.注意事項

虹彩病毒疫苗只能預防傳染性脾腎壞死病，不能用作治療。當發現池塘中有疑似傳染性脾腎壞死病魚時就不能接種疫苗。接種前應停食24小時以上。疫苗一旦開瓶應一次用完，用過的疫苗瓶、器具和未使用完的疫苗應進行無害化處理。如意外將疫苗污染到人的眼、鼻、嘴中，應及時對患部采取清洗、消毒等措施。

9.苗種放養

鱖魚試驗塘、對照塘苗種放養情況見表1。

表1 試驗塘、對照塘苗種放養情況

二、試驗結果

試驗塘鱖魚上市時間在9月30日－10月7日，上市規格0.55～0.6千克/尾，基本達到“標魚”標準。2019年試驗塘平均售價50元/千克、單產800千克/畝、利潤7 406元/畝、成活率92.5%，對照塘平均售價46元/千克、單產351千克/畝、利潤-2 711元/畝、成活率52%；2020年平均售價60元/千克，試驗塘單產644千克/畝、利潤1.17萬元/畝，對照塘單產337千克/畝、利潤1 100元/畝、成活率45%。試驗塘、對照塘投入與產出情況見表2。

表2 試驗塘、對照塘投入與產出情況

三、討論與分析

每年5－6月的水溫升幅不同，病害發生時間可能提前或推遲，應注意調查池塘往年發病史，根據當年天氣、水溫實際情況，準確把握鱖魚苗種接種時間，一旦時機適宜，立即準備接種注射，如發現塘魚有疑似傳染性脾腎壞死病，應取消該塘鱖魚疫苗接種計劃。

試驗塘鱖魚苗種經虹彩病毒疫苗接種注射，15天后產生免疫抗體，成活率達92%以上，而未接種注射的鱖魚苗種感染虹彩病毒平均發病率70%以上，對照塘發病死亡率49%以上，未經接種免疫的鱖魚苗種養成商品魚平均死亡率34.3%以上。

鱖魚苗種適宜接種規格在8～12厘米，接種苗種規格小，注射操作難度大、應激死亡量增加；接種苗種規格大，時間相對推遲，接近發病狀態，鱖魚未來得及產生抗體就開始發病，易造成免疫保護失敗，風險較大。同一個池塘鱖魚應全部免疫，應采取將接種免疫后的鱖魚換塘放養的方式。如果鱖魚接種免疫后仍放養在“標粗”塘中，原塘中鱖魚拉網捕撈不能全部捕盡，未接種免疫的鱖魚還會發病造成病死魚損失，特別在8月下旬后傳染性脾腎壞病第二波發病時，魚的規格大、死亡數量多，發病塘難以堅持到中秋、國慶節捕撈上市，一般發病7～14天即被迫干塘出售，部分鱖魚未達上市規格，售價不高，經濟損失較大。