波生坦片在健康人體內的生物等效性研究

何秀玲，譚金華，宋天云，夏小容，唐 霞

(江門市五邑中醫院，廣東 江門 529000)

波生坦片在體內部分向活性產物羥基波生坦代謝，一方面具有對內皮素A受體的親和作用，另一方面還具有對內皮素B受體的親和作用，屬于一種雙重內皮素受體拮抗劑，能夠促進肺及全身血管阻力的降低，在不將心率提升的情況下將心臟輸出量增加[1]。在Ⅲ期、Ⅳ期動脈性肺動脈高壓患者的治療中應用[2]。本文研究了健康體檢人員體內波生坦片的生物等效性。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取2019年3月至2020年10月本院健康體檢人員80例，其中男性42例(52.5%)，女性38例(47.5%)，年齡18～35歲，平均(26.3±4.5)歲；體質量55～76kg，平均(65.3±10.4)kg；身高164～180cm，平均(172.5±10.3)cm；體質量指數19～24kg/m2，平均(21.3±3.4)kg/m2。

1.2 納入和排除標準

納入標準：(1)均經生命體征檢查、體格檢查、12導聯心電圖檢查、實驗室檢查確定為健康人員；(2)體質量均在50kg及以上；(3)均具有良好的依從性。排除標準：(1)有器官疾病史；(2)有藥物濫用史；(3)近2周內應用過中成藥、處方藥及非處方藥。

1.3 方法

1.3.1藥品、試劑和儀器

購買國內醫藥企業生產的波生坦片(規格：125mg/片，生產批號：201560302)作為受試試劑(T)，購買美國Genentetch Inc與瑞典Actelion公司聯合開發生產的波生坦片(全可利，規格：125mg/片，生產批號：IPO59A0201)作為參比制劑(R)，購買國內醫藥企業生產的波生坦對照品(純度96.7%，生產批號D0)、Toronto Research Chemicals生產的羥基波生坦對照品(純度98.0%，生產批號1-YHH-52-2)、內標波生坦-d4(純度95.0%，生產批號6-XAL-5-1)、羥基波生坦-d4(純度95.0%，生產批號14-MVI-183-3)。購買美國Applied Biosystems/SCIEX公司圣翰的QTRAP 5500質譜，日本島津公司生產的LC-30AD液相色譜。

1.3.2測定方法

1.3.2.1 色譜條件

色譜柱：1.9μm Hypersil Gold C18，規格為2.1mm×100mm。流動相A相、B相分別為5mmol醋酸銨水溶液、甲醇，流速、柱溫分別為0.3mL/min、40℃。自動進樣器溫度、進樣量分別為4℃、5μl。洗脫梯度(A相：B相)：90：10、90：10～10：90、10：90、90：10分別0.00～0.30min、0.30～0.60min、0.60～2.50min、2.51～4.00min。

1.3.2.2 質譜條件

采用正離子電噴霧離子源(ESI)，應用多反應監測模式。離子化電壓、氣簾氣、溫度、霧化氣(Gas1)、輔助氣(Gas2)分別為5500V、40L/min、550℃、30L/min、60L/min。波生坦的檢測離子對為m/z552.0→m/z508.0，羥基波生坦的檢測離子對為m/z568.0→m/z202.0，內標波生坦-d4的檢測離子對為m/z556.0→m/z508.0，羥基波生坦-d4的檢測離子對為m/z572.0→m/z202.0。

1.3.2.3 血漿樣品處理

混旋50μl血漿樣品+400μl內標工作液(波生坦d-4/羥基波生坦-d4：10/6ng/mL)混勻2min，在4℃的溫度下離心10min，速率為3000r/min，將100μl上清液取出來進樣分析。

1.4 觀察指標

(1)健康人血漿中波生坦片、羥基波生坦的精密度和回收率；(2)健康人供試品和參比制劑波生坦片空腹、餐后主要藥動學參數。

1.5 統計學分析

2 結果

2.1 健康人血漿中波生坦片的精密度和回收率分析

健康人50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、3200ng/mL血漿中波生坦的日內、跨日精密度均逐漸升高(P<0.05)。見表1。

表1 健康人血漿中波生坦片的精密度和回收率分析

2.2 健康人血漿中羥基波生坦的精密度和回收率分析

健康人50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、3200ng/mL血漿中羥基波生坦的日內、跨日精密度均逐漸升高(P<0.05)。見表2。

表2 健康人血漿中羥基波生坦的精密度和回收率分析

2.3 健康人供試品和參比制劑波生坦片空腹主要藥動學參數比較

健康人波生坦片空腹試驗、參考Cmax、AUC0-t、AUC0-∞均顯著高于羥基波生坦(P<0.05)，tmax、t1/2均顯著低于羥基波生坦(P<0.05)。見表3。

表3 健康人供試品和參比制劑波生坦片空腹主要藥動學參數比較

2.4 健康人供試品和參比制劑波生坦片餐后主要藥動學參數

健康人波生坦片餐后試驗、參考Cmax、AUC0-t、AUC0-∞均顯著高于羥基波生坦(P<0.05)，tmax、t1/2均顯著低于羥基波生坦(P<0.05)。見表4。

表4 健康人供試品和參比制劑波生坦片餐后主要藥動學參數比較

3 討論

相關醫學研究表明[3-4]，在空腹條件下、餐后條件下，波生坦片受試制劑、參比制劑均具有生物等效性。本研究結果表明，健康人50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、3200ng/mL血漿中波生坦的日內、跨日精密度均逐漸升高。健康人50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、3200ng/mL血漿中羥基波生坦的日內、跨日精密度均逐漸升高。健康人波生坦片空腹試驗、參考Cmax、AUC0-t、AUC0-∞均顯著高于羥基波生坦，tmax、t1/2均顯著低于羥基波生坦。健康人波生坦片餐后試驗、參考Cmax、AUC0-t、AUC0-∞均顯著高于羥基波生坦，tmax、t1/2均顯著低于羥基波生坦，和上述研究結果一致。

綜上所述，健康體檢人員體內波生坦片在空腹、餐后條件下均具有生物等效性。