注射用嗎利福肽臨床試驗研究及產(chǎn)業(yè)化

唐世錠 韋飛雪 文藝 陳珊 鄧鵬

【關鍵詞】注射用嗎利福肽;腦卒中;缺血性;臨床試驗

【中圖分類號】R927 【文獻標識碼】A 【文章編號】1674-0688（2021）08-0045-03

1 概述

腦卒中（俗稱腦中風）是僅次于惡性腫瘤的死亡原因，全球每年大約有2 200萬人發(fā)生腦卒中，主要包括三大類，即缺血性（87%）、出血性（10%）、蛛網(wǎng)膜下腔出血（3%）[1]。當前，指南推薦臨床對于缺血性腦血管疾病的臨床治療主要是采用動/靜脈溶栓、抗凝、擴容、擴血管及血管內(nèi)干預等方面的治療途徑，然而目前尚未發(fā)現(xiàn)一種有效治療急性缺血性腦卒中的神經(jīng)保護類藥物[2]。

臨床研究證實，腦組織缺血后可引起急性和慢性的炎癥反應，局部腦缺血后，許多致炎介質(zhì)釋放或激活，如炎性細胞因子（特別是TNF-α、IL-1）、趨化因子及內(nèi)皮細胞-白細胞黏附分子水平上調(diào)，使白細胞浸潤到腦實質(zhì)，并激活腦小膠質(zhì)細胞和星形膠質(zhì)細胞，腦缺血再灌注引起的炎癥反應能夠引起腦微循環(huán)障礙和鄰近腦組織的損傷。炎癥反應的程度、腦組織損傷的程度跟腦卒中病人的長期預后有較大關聯(lián)，抗炎治療已成為腦缺血防治的一個重要研究方向，炎癥誘導的損傷機制在防治缺血性腦卒中疾病時對挽救缺血性半暗帶、保護血腦屏障起重要作用，可擴大治療時間窗，有著巨大的臨床價值。

嗎利福肽（Monocyte Locomotion Inhibitory Factor，MLIF）作為一種治療缺血性腦卒中的新藥，是八加一藥業(yè)股份有限公司研究團隊歷經(jīng)十數(shù)載的基礎研究和臨床前研究的重大研究成果。注射用嗎利福肽的研究先后獲得國家科技重大專項“防治缺血性腦卒中活性肽候選新藥研究”（合同號2009ZX0913-120，已結題）、“防治缺血性腦卒中活性肽臨床前研究”（合同號2013ZX09102011，已結題）和廣東省科技重大專項“防治缺血性腦卒中活性肽臨床前研究”（合同號2013A022100006，已結題）的支持。獲得了包括“多肽小分子在制備防治缺血性腦血管病藥物中的應用”[3]在內(nèi)的6件授權發(fā)明專利及“Method for Treating Myocardial Ischemia”（US8343921B2）等2件PCT授權專利。研究論文在國際著名雜志“STROKE”發(fā)表。

臨床前研究表明：注射用嗎利福肽是人工合成的小分子多肽，與熱穩(wěn)定的具有抗炎活性寡肽[從溶組織阿米巴（Entamoeba Histolytica）培養(yǎng)的上清液中分離得到]具有同樣的氨基酸序列，有較強的抗炎活性，能明顯逆轉慢性腦缺血所致的神經(jīng)細胞的損傷，對急性腦缺血有較好的保護作用，機制較新，靶點明確，為生物內(nèi)源性物質(zhì)，安全性好，有望成為治療缺血性腦卒中的新藥。此外，注射用嗎利福肽可以通過血腦屏障，對腦血管病具有良好的預防與治療作用[4]。

2 臨床試驗擬解決的關鍵問題

2015年2月由八加一藥業(yè)股份有限公司主導，下屬全資子公司廣東八加一醫(yī)藥有限公司研發(fā)的原料藥嗎利福肽和注射用嗎利福肽獲得1.1類新藥藥物臨床試驗批件（批件號分別為2015L00348、2015L00349），重點開展3期臨床試驗。目前，注射用嗎利福肽的臨床試驗工作已全面啟動，其中Ⅰ期臨床試驗已在北京協(xié)和醫(yī)院和江蘇省人民醫(yī)院完成，試驗結果表明：注射用嗎利福肽作用于人體安全，耐受性好。

2.1 特異性生物標志物判定方法

缺血性腦卒中神經(jīng)功能保護類新藥（嗎利福肽屬于其一）的臨床終點是困擾此類藥物臨床試驗療效判斷的共性難題，目前尚無明確的客觀的療效指標和檢測手段對其進行判斷，找到臨床終點判斷的代表物質(zhì)和檢測方法事關臨床試驗的成敗。

本課題組經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，注射用嗎利福肽治療缺血性腦卒中特異性生物標志物（BIO-MARK），特征性炎癥因子水平的變化與臨床預后密切相關，Ⅱ、Ⅲ期臨床試驗將通過檢測受試者體內(nèi)的特異性生物標志物水平評價注射用嗎利福肽的療效，該方法專屬性強，檢測靈敏度高，可為抗炎機理的缺血性腦卒中神經(jīng)功能保護類新藥臨床研究提供一個全新的檢測方法。

將研究發(fā)現(xiàn)的特異性生物標志物判定作為注射用嗎利福肽應用于缺血性腦卒中患者的臨床終點判斷。

2.2 客觀、有效的評價方法

根據(jù)CFDA（國家食品藥品監(jiān)督管理總局）最新頒布的《急性缺血性腦卒中治療藥物臨床試驗技術指導原則》，缺血性腦卒中嚴重程度通常采用NIHSS（美國國立衛(wèi)生研究院腦卒中量表）評分界定，NIHSS評分過程完全依靠醫(yī)務人員主觀判斷，數(shù)據(jù)準確性差，對腦卒中受試藥物的評價結果人為因素干擾較大。

注射用嗎利福肽Ⅱ、Ⅲ期臨床試驗采用步態(tài)分析系統(tǒng)對受試者進行評價，在整個評價過程通過計算機采集一系列數(shù)據(jù)完成，數(shù)據(jù)準確可靠，將試驗過程人為因素導致結果偏差降到最低。

注射用嗎利福肽Ⅱ、Ⅲ期臨床試驗采用磁共振成像等醫(yī)學影像學手段，全程監(jiān)測臨床試驗受試者入組、治療、出組等階段腦組織炎癥浸潤和水腫變化情況，檢測方法直觀、嚴謹，為臨床試驗藥物的療效判斷提供科學依據(jù)。

注射用嗎利福肽Ⅱ、Ⅲ期臨床試驗采用神經(jīng)內(nèi)科與急診科聯(lián)動的工作機制，將受試者篩查前移至急診科，實現(xiàn)受試者快速診斷、快速入組、盡快給藥，確保受試者在有效的治療時間窗用上試驗藥物，對注射用嗎利福肽的臨床試驗結果評價更加客觀、準確。

3 項目技術路線

3.1 技術路線

3.1.1 Ⅱ期臨床試驗

在Ⅰ期臨床試驗結果的基礎上分兩個階段進行，第一階段為Ⅱa期臨床試驗，以小樣本多次給藥、劑量遞增的方式開展試驗，研究給藥方式、劑量及時間對治療效果的影響，其間開展多次給藥藥代動力學研究及藥物相互作用研究;第二階段為Ⅱb期臨床試驗，以Ⅱa期臨床試驗研究結果為基礎，選擇2或3個給藥方案進行中樣本的臨床試驗研究，初步確定給藥方案。

3.1.2 動物生殖毒性試驗

完成注射用嗎利福肽的大鼠Ⅲ段和家兔Ⅱ段生殖毒性試驗，評價其對哺乳動物生殖功能和發(fā)育過程的影響。

3.1.3 Ⅲ期臨床試驗

在Ⅱ期臨床試驗結果的基礎上，根據(jù)初步確定的給藥方案進行驗證性試驗研究，評價藥物的總體療效和安全性。

3.1.4 新藥申請

匯總各期臨床試驗結果，形成本項目的臨床試驗報告，申請新藥注冊。

3.1.5 項目產(chǎn)業(yè)化

按GMP要求建設原料藥合成生產(chǎn)線及凍干粉針制劑生產(chǎn)線，開展中試放大試驗，完成工藝優(yōu)化、質(zhì)量標準驗證、生產(chǎn)現(xiàn)場核查和藥品生產(chǎn)GMP符合性檢查，獲得新藥證書及藥品生產(chǎn)批文，實現(xiàn)產(chǎn)品上市銷售。

3.2 項目技術路線圖

項目技術路線圖如圖1所示。

4 項目關鍵技術

4.1 采用特異性生物標志物判斷注射用嗎利福肽臨床終點的檢測技術

通過檢測腦卒中受試者體內(nèi)的特異性生物標志物水平評價注射用嗎利福肽的臨床試驗終點。

4.2 對注射用嗎利福肽受試者療效采用客觀、有效的觀察手段和評價方法

采用步態(tài)分析系統(tǒng)對受試者進行評價;采用磁共振成像等醫(yī)學影像學手段，全程監(jiān)測臨床試驗受試者;采用神經(jīng)內(nèi)科與急診科聯(lián)動的工作機制，實現(xiàn)受試者快速診斷、快速入組、盡快給藥，確保受試者在有效的治療時間窗用上試驗藥物;通過上述一系列措施，使注射用嗎利福肽對缺血性腦卒中的療效結果真實可靠，減少人為因素導致結果偏差。

采用特異性生物標志物判斷注射用嗎利福肽臨床終點的檢測技術及對注射用嗎利福肽受試者療效采用客觀、有效的觀察手段和評價方法，進一步評價注射用嗎利福肽對治療缺血性腦卒中的有效性和安全性，為注射用嗎利福肽申請新藥證書提供充分的依據(jù)。

4.3 項目產(chǎn)業(yè)化

對原料藥的固相合成法的反應條件（包括溫度、純化試劑與中間產(chǎn)品的比例等）進行優(yōu)化，形成一套既適合工業(yè)化生產(chǎn)又高效節(jié)能的生產(chǎn)工藝，在新建生產(chǎn)線連續(xù)進行3批生產(chǎn)，驗證工藝的可行性。通過對原料藥工藝優(yōu)化，實現(xiàn)原料藥生產(chǎn)成本降低20%、成品收率提高10%、溶媒用量減少30%以上的目標。

5 項目技術創(chuàng)新點

本項目的技術創(chuàng)新點如下。

5.1 檢測方法

通過檢測注射用嗎利福肽在體內(nèi)的代謝產(chǎn)物，發(fā)現(xiàn)腦卒中抗炎機理藥物的特異性生物標志物（BIO-MARK），通過檢測其特異性生物標志物判斷臨床終點，為抗炎機理的缺血性腦卒中神經(jīng)功能保護類新藥的臨床研究提供最新檢測標準。該檢驗方法專屬性強，可解決缺血性腦卒中神經(jīng)功能保護類新藥的臨床終點判斷難題。

5.2 評價方法

注射用嗎利福肽的Ⅱ、Ⅲ期臨床試驗引入步態(tài)評分系統(tǒng)，可客觀評價受試者用藥后的臨床癥狀和行為學評分的改善情況，與傳統(tǒng)的NIHSS（美國國立衛(wèi)生研究院腦卒中量表）評分系統(tǒng)相比，能有效地減少評分偏差，提高試驗藥物療效評價的準確性;采用磁共振成像等醫(yī)學影像學手段，監(jiān)測臨床試驗受試者入組、治療、出組等階段腦組織炎癥浸潤和水腫變化情況，檢測方法直觀、嚴謹，為試驗藥物的療效判斷提供科學依據(jù);試驗方案確立神經(jīng)內(nèi)科與急診科聯(lián)合實施的工作機制，實現(xiàn)快速診斷、快速入組、盡快給藥，確保受試者在有效的治療時間窗用上試驗藥物。

6 結語

本項目完成后將作為國家1.1類化藥新藥上市，獲得國家新藥證書及2項國家藥品注冊標準，建成廣西第一條肽類原料藥合成生產(chǎn)線。

臨床試驗過程中通過檢測特異性生物標志物判斷藥物的臨床終點，將為國內(nèi)治療腦卒中的神經(jīng)保護類新藥臨床試驗提供一種全新的檢測方法。

我國缺血性腦卒中發(fā)病率呈上升趨勢，據(jù)統(tǒng)計我國每年有750萬的腦卒中病例（其中缺血性腦卒中患者約占80%）。注射用嗎利福肽作為治療缺血性腦卒中新藥，將給國內(nèi)廣大腦卒中患者提供一種全新的安全有效的治療藥物，解決臨床急需。根據(jù)國家有關規(guī)定，原創(chuàng)新藥納入國家醫(yī)保目錄，減輕患者的經(jīng)濟負擔，同時將為世界治療缺血性腦卒中藥物樹立典范，社會意義重大。

參 考 文 獻

[1]申青仙，張賽，涂悅.急性缺血性腦卒中的臨床治療研究進展[J].中國醫(yī)藥，2020，15（4）：633-636.

[2]賈喆.小劑量阿替普酶在靜脈溶栓治療急性缺血性腦卒中的神經(jīng)保護作用[J].蚌埠醫(yī)學院學報，2019，44（7）：920-922，926.

[3]楊鵬遠，芮耀誠，章越凡.多肽小分子在制備防治缺血性腦血管病藥物中的應用[P].中國專利：2008102006

10.0，2009-02-11.

[4]程浩，芮耀誠，章越凡，等.生物活性肽-單核細胞遷移抑制因子研究進展[J].藥學實踐雜志，2015，33（1）：17-19，27.