淺談模擬尿糖的檢測(cè)方案

徐青

摘要： 糖尿病是一種常見(jiàn)的具有遺傳傾向的葡萄糖代謝和內(nèi)分泌障礙，是由于絕對(duì)性或相對(duì)性胰島素分泌不足引起的，近半個(gè)世紀(jì)來(lái)，糖尿病患病率和死亡率有明顯上升趨勢(shì)，在我國(guó)已成為繼心血管疾病、腫瘤之后列第三位的常見(jiàn)病、多發(fā)病和慢性非傳染性疾病。本文僅就實(shí)驗(yàn)的教學(xué)實(shí)踐，談一下實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的大體思路，著重講述單一變量原則、對(duì)照性原則等實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本原則，以及常用的實(shí)驗(yàn)原理及實(shí)驗(yàn)方法。

關(guān)鍵詞： 糖尿病;實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

一、實(shí)驗(yàn)教學(xué)的整體思路

明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康模治鰧?shí)驗(yàn)原理，進(jìn)而確定實(shí)驗(yàn)的自變量、因變量，選擇合適的實(shí)驗(yàn)對(duì)象，控制無(wú)關(guān)變量，整體設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行結(jié)果預(yù)測(cè)和分析。

二、實(shí)驗(yàn)原理

1.葡糖糖試紙是一種酶試紙，由葡糖糖氧化酶和H2O2酶和某種無(wú)色的化合物固定于濾紙上制成的。

2.當(dāng)尿液滴加到酶試紙上時(shí)，尿液中葡糖糖在葡糖糖氧化酶的催化作用下生成葡糖糖酸和過(guò)氧化氫，過(guò)氧化氫在H2O2酶的催化作用下形成水和氧，氧可以將濾紙上無(wú)色的化合物氧化成有色的化合物，使試紙呈現(xiàn)特定的顏色，再與標(biāo)準(zhǔn)比色卡相對(duì)比，即可知道尿液中葡糖糖含量。

三、單一變量原則

單一變量原則即控制其它因素不便而改變其中一個(gè)因素，觀察其對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。如探索溫度對(duì)酶活性的影響時(shí)，只要改變反映的溫度，其它如pH、酶的濃度等條件就要完全一樣。

1.自變量。亦稱實(shí)驗(yàn)變量，指實(shí)驗(yàn)中由實(shí)驗(yàn)者所操縱、給定的因素或條件，也即實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹幸芯炕蝌?yàn)證的影響實(shí)驗(yàn)對(duì)象的某種因素。

2.因變量。亦稱反應(yīng)變量或應(yīng)變量，指實(shí)驗(yàn)中由于實(shí)驗(yàn)變量而引起的變化或結(jié)果。

3.無(wú)關(guān)變量與額外變量。無(wú)關(guān)變量，亦稱控制變量，指實(shí)驗(yàn)中除實(shí)驗(yàn)變量以外其它的影響實(shí)驗(yàn)變化和結(jié)果（即反應(yīng)變量）的因素或條件。

4.自變量、無(wú)關(guān)變量的確定原則：依據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?shí)驗(yàn)原理確定。

四、對(duì)照性原則——設(shè)立對(duì)照組

在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中，通常設(shè)置對(duì)照組，對(duì)照性原則是設(shè)計(jì)具體的實(shí)驗(yàn)方法時(shí)必須遵循的原則，其目的仍是消除無(wú)關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。

1.生物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中常用的對(duì)照類(lèi)型及實(shí)例如下：

（1）空白對(duì)照，即不給對(duì)照組任何實(shí)驗(yàn)處理。

（2）條件對(duì)照：即雖給對(duì)照組施以部分因素，但不是所研究的實(shí)驗(yàn)處理因素。例如在實(shí)驗(yàn)唾液淀粉酶發(fā)揮作用的最適溫度的實(shí)驗(yàn)中的0℃和80℃下的對(duì)照。

（3）自身對(duì)照，指對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組都在同一研究對(duì)象上進(jìn)行，即不另設(shè)對(duì)照組。

（4）相互對(duì)照，指不單獨(dú)設(shè)立對(duì)照組，而是利用幾個(gè)實(shí)驗(yàn)組相互對(duì)照。這種對(duì)照實(shí)驗(yàn)是自變量不同程度地作用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

2.對(duì)照實(shí)驗(yàn)設(shè)置的正確與否，關(guān)鍵在于如何盡量去保證“其它條件的完全對(duì)等”。具體來(lái)說(shuō)如下四個(gè)方面：

①所用生物材料要相同。即所用生物材料的數(shù)量、質(zhì)量、長(zhǎng)度、體積、來(lái)源和生理狀況等各方面特點(diǎn)要盡量相同或至少大致相同。②所用實(shí)驗(yàn)器具要相同。即試管、燒杯、水槽、廣口瓶子等器具的大小型號(hào)要完全一樣。③所用實(shí)驗(yàn)試劑要相同。即試劑的成分、濃度、體積要相同。尤其要注意體積上等量的問(wèn)題。④所用處理方法要相同。如：保溫或冷卻;光照或黑暗;攪拌或振蕩都要一致。有時(shí)盡管某種處理對(duì)對(duì)照實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，看起來(lái)似乎毫無(wú)意義的，但最好還是要作同樣的處理。

五、實(shí)驗(yàn)步驟

1.準(zhǔn)備：將5個(gè)分別裝有清水、葡糖糖溶液、三份模擬“尿液”的滴瓶和5條葡糖糖試紙分別對(duì)應(yīng)做好標(biāo)記，并在記錄本上設(shè)計(jì)好記錄表格。

2.檢測(cè)：分別用滴管從5個(gè)滴瓶中吸取溶液，在對(duì)應(yīng)的葡糖糖試紙上各滴加兩滴。

3.觀察：觀察試紙的顏色變化并與標(biāo)準(zhǔn)比色卡對(duì)比，判斷出“尿糖”的含量。

4.記錄：將實(shí)驗(yàn)結(jié)果記在記錄表中。

5.分析：分析結(jié)果、得出結(jié)論。

六、實(shí)驗(yàn)分析

試紙由淺藍(lán)到棕紅色變化來(lái)表示檢測(cè)結(jié)果，淺藍(lán)色表示沒(méi)有糖尿病，棕紅色表示有糖尿病。

七、實(shí)驗(yàn)延伸

1.用斐林試劑檢驗(yàn)?zāi)蛱堑牟襟E

（1）取樣：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液。

（2）檢測(cè)方法：加斐林試劑水浴加熱。

（3）結(jié)果：用斐林試劑檢測(cè)，試管內(nèi)出現(xiàn)磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出現(xiàn)磚紅色沉淀的是正常人的尿液。

（4）分析：因?yàn)樘悄虿』颊叩哪蛞褐泻羞€原性糖，與斐林試劑發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀，而正常人的尿液中無(wú)還原性糖，所以沒(méi)有發(fā)生反應(yīng)。

2.實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

（1）取液過(guò)程中滴管不能混用

（2）在現(xiàn)實(shí)中，醫(yī)生不能僅憑一份尿液樣本就斷定某人是否患糖尿病，因?yàn)樵谝淮涡源罅渴秤锰堑臅r(shí)候，也會(huì)使尿液中含有少量的糖。在判斷是否患糖尿病時(shí)，要根據(jù)尿糖檢測(cè)結(jié)果并結(jié)合病人的飲食來(lái)綜合判斷。

參考文獻(xiàn)：

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