希森美康HISCL-5000檢測梅毒抗體臨界值指數為0.1-1的結果分析

唐蝶，李儉，張秀明

（深圳市羅湖醫院集團羅湖區人民醫院 醫學檢驗中心，廣東 深圳 518001）

0 引言

梅毒是由梅毒螺旋體引起的人類獨有的疾病，主要由性接觸傳播，也可以通過血液傳播和母嬰傳播[1,2]。近年來，我國梅毒發病率明顯上升，防治工作面臨著嚴峻挑戰[3-5]。梅毒螺旋體感染后如果沒有早期診治，可能會有嚴重并發癥, 且梅毒隱性感染者也具有傳染性，因此對梅毒患者進行早期診療是非常重要的[6]。目前，梅毒的診斷主要依據臨床表現和實驗室檢查，后者包括病原體檢查、血清學檢測和核酸檢測等。由于梅毒病原學檢查和核酸檢測受實驗條件、病程影響，檢出率不高，所以血清學檢查是梅毒檢測的主要方法。目前本實驗室梅毒血清特異性抗體檢測項目包括化學發光免疫分析法（CLEIA）和梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPPA）兩種。TPPA法具有高度的敏感性和特異性，是目前國內外廣泛應用的梅毒確認試驗[7,8]。本文使用TPPA法對HISCL 5000 化學發光法檢測臨界值指數（COI）為0.1-1的標本進行復檢確證，分析其結果假陰性率并探討其檢測最佳COI。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集深圳市羅湖醫院集團2019年7月1日至2020年7月30日患者血清標本17733例，使用HISCL 5000進行梅毒抗體檢測，篩查COI為0.1-1的標本進行TPPA法確證。

1.2 儀器與試劑

HISCL 5000 全自動化學發光免疫分析儀及其原裝配套試劑(日本希森美康醫用電子有限公司)；梅毒螺旋體抗體檢測試劑盒（日本富士必歐株式會社）。

1.3 方法

1.3.1 17733 份標本用HISCL 5000化學發光免疫分析儀進行檢測，嚴格按照儀器操作說明及試劑操作說明進行。儀器自動完成標本的檢測和結果的判讀，當COI≤1時判定為陰性，COI＞1.0 的樣本判定為陽性。

1.3.2 用TPPA法對COI介于0.1-1 的標本進行驗證。TPPA檢測時均進行陰、陽對照及質控，嚴格按照試劑操作說明進行。

1.4 統計學處理

采用SPSS 22.0軟件進行統計分析并繪制ROC曲線，對檢測結果進行假陰性率分析和確定最佳COI值。

2 結果

對HISCL 5000篩查出的133例COI介于0.1-1的標本用TPPA法進行確證，結果得出真陰性標本92例，假陰性率30.83%。見表1。

表1 133例COI位于0.1-1的篩查標本TPPA法結果

對133例篩查標本做ROC曲線分析如圖1。

圖1 133例標本ROC曲線分析

3 討論

梅毒的感染初期多無明顯的癥狀和體征，易造成漏診，延遲治療。血清學檢測是臨床診斷梅毒的重要依據[9]。因為方法學和診斷性能的局限性，任何一種梅毒血清學檢測方法均不能完全達到梅毒診斷所需的全部性能要求[10]，故選擇靈敏度高、特異度好的方法便顯得尤為重要。梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）檢測特異性梅毒螺旋體抗體具有較高的敏感性和特異性，但其操作過程復雜，檢測時間長，且結果判定易受人員因素影響及難以自動化等原因，不適于作為梅毒的篩查試驗。近年來隨著梅毒螺旋體基因工程抗原而研制成功的化學發光法在梅毒特異性抗體檢測方面優勢明顯，其操作簡單、靈敏度高、易于自動化，化學發光法的靈敏度可達98%-100%[11]。化學發光免疫分析法相比TPPA檢測速度快，可隨機檢測，具有很強的實用性，可作為梅毒螺旋體的初篩實驗。

希森美康HISCL-5000 檢測梅毒螺旋體抗體采用的是兩步夾心法的化學發光免疫分析法，是一種新的血清實驗方法，檢測低限突破了一個數量級，可低至10-21mol[12-13]。通過公式計算反應測定的發光強度和臨界值的比值來確定標本是否存在梅毒特異性抗體。

本研究采用特異度較高的TPPA方法對靈敏度較高的化學發光方法檢測梅毒特異性抗體COI為0.1-1的結果進行復檢確證，得出HISCL-5000篩查出的COI為0.1-1的133例標本中假陰性標本41例，假陰性率達30.83%，其中當COI=0.1時假陰性率為0。通過 ROC曲線分析，COI取95%置信區間上限得出最佳COI為0.15，此時靈敏度為100%，特異度為54.3%。此研究提示本實驗室需重新建立HISCL儀器檢測梅毒的復檢規則，當儀器檢測出0.15＜COI≤1時，須做TPPA復查，TPPA復查陰性結果即按COI原值發送，TPPA復查陽性就將原COI改為1.1后發送結果，并建議患者2-4周后再復查，從而進一步完善本實驗室梅毒血清學檢測流程和降低結果的假陰性率。

綜上所述，對于梅毒的篩查，除了注意假陽性外[14-15]，假陰性也不可以忽視，這樣不僅能及時發現潛伏期梅毒，采取及時正確的方法對梅毒患者進行干預，在一定程度上也減少了梅毒的傳播。