廣東茂名地區 112 例異常血紅蛋白病例分析

陳美霞，陳紅玲，楊越紅，楊艷芳，羅勝和

（茂名市人民醫院，廣東 茂名 525000）

0 引言

異常血紅蛋白是珠蛋白鏈結構異常的血紅蛋白病，在我國已發現多種類型的異常血紅蛋白，其中南方地區以HbCS、HbE、HbNew York、HbQ-Thailand等為多見。秦良誼[1]研究表明，我國異常血紅蛋白病的平均發生率為0.337%，且南方地區(0.367%) 高于北方地區(0.290%)，呈高度分布不均一性和遺傳多態性。隨著生活水平的提高，廣大群眾對優生優育方面要求更高，國家在出生缺陷防控上越來越重視，重型地中海貧血嚴重威脅人類的健康，給重癥地貧家庭帶來巨大的經濟負擔。異常血紅蛋白合并地貧時，不同基因型的組合可出現不同的表型變化，需結合是否合并地貧來進行異常血紅蛋白病的遺傳咨詢。茂名地區為地中海貧血的高發區，異常血紅蛋白發生率為0.79%，明顯高于南方地區的發生率，而某些異常血紅蛋白復合地中海貧血會導致中重度貧血[2]。因此對育齡夫婦血紅蛋白疾病的篩查和遺傳咨詢具有重要意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年1月1日至2019年12月31日本院送檢的，在我院產前診斷中心進行外周血全自動毛細管電泳的14516例成人為研究對象，對檢測出的異常血紅蛋白病例112例進行回顧性血液學指標分析及地中海貧血基因診斷，并對并對未知異常血紅蛋白進行基因測序。

1.2 方法

1.2.1 血細胞參數分析

采用XE50000全自動血液分析儀進行紅細胞參數分析，紅細胞參數包括血紅蛋白（Hb）、平均紅細胞容積（MCV）、平均紅細胞血紅蛋白量（MCH）。

1.2.2 血紅蛋白分析

采用法國Sebia公司 Capillarys 2 全自動毛細管電泳儀及其配套的試劑進行血紅蛋白電泳分析，電泳圖譜分成 15個區分區(Z1-Z15區)，鑒別Hb條帶類型，并分析各條帶所占相對比例含量。

1.2.3 地中海貧血基因分析

篩選出異常血紅蛋白病例，進行地中海貧血基因檢測，采用gap-PCR技術檢測α-地貧的3種常見缺失（——SEA、-α3.7 及 -α4.2），采用反向斑點雜交技術（RDB）檢測α- 地貧的 3種常見點突變（αCSα、αWSα 和 αQSα）和 β- 地貧的17種常見點突變。診斷試劑由亞能生物技術（深圳）有限公司提供。

1.2.4 α、β珠蛋白基因測序

挑出一些常規地中海貧血基因檢測無法診斷的病例送深圳亞能生物技術有限公司進行α、β珠蛋白基因測序。

1.3 統計分析

采用 Excel 2019 及 SPSS 19.0 進行統計學分析。

2 結果

2.1 茂名地區異常血紅蛋白發生率

14516 例外周血電泳結果中，檢出含異常血紅蛋白條帶者 127 例，異常血紅蛋白的陽性率為0.79%（112/14516）。其中 HbCS 25例，CS型HbH病6例，HbE27例，HbE復合β0-地中海貧血3例，Hb New York 26例，Hb New York復合IVS-Ⅱ-806雙重雜合突變1例，Hb Q-Thailand 9例，Hb J-Bangkok4 例，Hb G-Honolulu4 例，Gγ+(Aγδβ)05 例，Hb G-Coushatta 1例；SEA-HPFH 1例。

2.2 CS型HbH病血液學特征

將31例Hb CS病例進行地中海貧血基因檢測及血液學分析，地中海貧血基因結果均顯示ααCS突變，包括 Hb CS 雜合子、HbCS復合α+-地貧及 Hb CS 復合α0-地貧（HbH-CS）。Hb CS雜合子和HbCS復合α+-地貧血液學表型接近臨界，HbH-CS表現為中度貧血。地貧基因結果及血液學特征見表1。

2.3 HbE復合β0地中海貧血的血液學特征

將30 例HbE病例進行地中海貧血基因檢測及血液學分析，地中海貧血基因結果均顯示βE 突變，包括 Hb E 雜合子及 HbE復合β0-地中海貧血。HbE雜合子表現為輕度小細胞低色素貧血，HbE復合β0-地中海貧血表現為重度貧血。地貧基因結果及血液學特征見表1。

2.4 Hb New York的血液學特征

將27例Z11異常區帶病例進行地中海貧血基因檢測及血液學分析，地中海貧血基因結果均顯示未見異常，送深圳亞能生物有限公司進行α、β珠蛋白基因測序，測序結果顯示26例 Hb New York（GTG → GAG at codon113）in beta 雜合突變，1例Hb New York復合IVS-Ⅱ-806雙重雜合突變，IVS-Ⅱ-806(G→C) in beta突變類型在人類異常血紅蛋白地中海貧血庫上未見報道，基因測序結果見圖一、圖二。Hb New York血液學表型正常，Hb New York復合IVS-Ⅱ-806雙重雜合突變血液學表型表現為中度貧血。地貧基因結果及血液學特征見表1。

2.5 Hb Q-Thailand 與 -α4.2 缺失的關聯性及血液學特征

將9例同時出現Z7和Z1異常區帶的病例進行地中海貧血基因檢測及血液學分析，地中海貧血基因結果顯示7例 -α4.2/αα，2 例 -α4.2/-α4.2。送深圳亞能生物有限公司進行α、β珠蛋白基因測序，測序結果異常血紅蛋白均為Hb Q-Thailand。地貧基因結果及血液學特征見表1。

2.6 Hb J-Bangkok的血液學特征

將4例Z12異常血紅蛋白病例進行地中海貧血基因檢測及血液學分析，地中海貧血基因結果均顯示未見異常，送深圳亞能生物有限公司進行α、β珠蛋白基因測序，測序結果均顯示為Hb J-Bangkok （GGC→GAC at codon56）in beta 雜合突變。地貧基因結果及血液學特征見表1。

2.7 Hb G-Honolulu的血液學特征

將4例同時出現Z6和Z1異常區帶的病例進行地中海貧血基因檢測及血液學分析，地中海貧血基因結果均顯示未見異常，送深圳亞能生物有限公司進行α、β珠蛋白基因測序，測序結果均顯示為Hb G-Honolulu （GAG→CAG at codon30）in alpha2 雜合突變。地貧基因結果及血液學特征見表1。

2.8 Hb G-Coushatta 的血液學特征

將1例Z6異常血紅蛋白病例進行地中海貧血基因檢測及血液學分析，地中海貧血基因結果均顯示未見異常，送深圳亞能生物有限公司進行α、β珠蛋白基因測序，測序結果均顯示為Hb G-Coushatta（GAA→GCA at codon22）in beta 雜合突變。地貧基因結果及血液學特征見表1。

2.9 HbF異常增高（ HbF＞15%）的血液學特征

將19例HbF異常增高的病例進行地中海貧血基因檢測及血液學分析，地中海貧血基因結果顯示未見異常。送深圳亞能生物有限公司進行α、β珠蛋白基因測序，測序結果5例為Gγ+(Aγδβ)0，1 例為 SEA-HPFH，13 例未見異常。1 例 Z1 異常血紅蛋白和1例Z8異常血紅蛋白未做α、β珠蛋白基因測序。地貧基因結果及血液學特征見表1。

表1 異常血紅蛋白的分子特征及血液學表型(±s)

表1 異常血紅蛋白的分子特征及血液學表型(±s)

異常 Hb 突變類型 例數 異常Hb電泳分區 地貧基因 Hb （g/L） MCV（fL） MCH（pg）Hb CS雜合子 20 Z2 ααCS/αα 124.5±19.1 82.3±3.5 27.4±1.2 HbCS 復合 α+- 地貧 5 Z2 -α3.7/αα 或-α4.2/αα 108.5±18.1 78.8±3.8 25.4±1.3 Hb CS復合 α0- 地貧 6 Z2、Z12、Z15 ααCS/——SEA 71.0±9.5 73.4±7.2 19.1±1.2 Hb E 雜合子 27 Z4 ββE/βN 115.8±23.9 74.4±6.5 24.4±2.8 Hb E復合 β0- 地貧 3 Z4、Z7 βCD17/ββE 45.5±14.1 61.8±2.4 17.0±0.9 Hb New York 26 Z11 未見異常 118.9±19.7 82.5±8.1 27.1±3.5 Hb New York復合IVS-Ⅱ-806 1 Z11 未見異常 68 61.2 17.6 Hb Q-Thailand 9 Z7 -α4.2/αα 或-α4.2/-α4.2 115.0±17.9 71.0±6.8 23.1±3.8 Hb J-Bangkok 4 Z12 未見異常 129.3±24.0 90.7±0.5 30.1±1.0 Hb G-Honolulu 4 Z1、Z6 未見異常 121.3±21.0 91.6±0.8 30.8±1.2 Hb G-Coushatta 1 Z6 未見異常 115 85 29.8 Gγ+(Aγδβ)0 5 Z7 未見異常 121.7±8.1 72.1±4.6 23.2±2.6 SEA-HPFH 1 Z7 未見異常 58 70 22未知異常 1 1 Z1 Z8——SEA/αα αWSα/αα 52 129 51.1 86.2 14.8 27.2

圖1 Hb New York （GTG→GAG at codon113）in beta 雜合突變

圖2 IVS-Ⅱ-806(G→C) in beta 雜合突變

3 討論

本研究對茂名地區14516例研究對象調查顯示，異常血紅蛋白病的發生率為0.79%，高于廣東省和全國的平均發生率[1]。異常血紅蛋白病是由于珠蛋白基因缺陷導致血紅蛋白分子結構發生改變的一組遺傳性血紅蛋白病，多數研究[2-7]表明，我國人群中，部分異常血紅蛋白病僅有輕微的小細胞低色素性貧血，大多數沒有明顯的臨床表現，但一些異常血紅蛋白病的純合子或者雜合子復合地中海貧血時會加重地中海貧血的臨床表型，表現為中間型或重型地中海貧血，目前異常血紅蛋白病缺少有效治療手段，該類患者對家庭和社會造成一定負擔。

本研究14516例研究對象中，檢出 HbCS 31例，血常規及地貧基因檢測發現6例為HbCS復合α0-地貧(HbH-CS)患者，臨床表現為中-重度貧血，其中2例表現為重度貧血，需依賴長期輸血治療，其余4例表現為中度度貧血；檢出HbE30例，血常規及地貧基因檢測發現3例HbE復合β0-地中海貧血，血紅蛋白分析提示血紅蛋白成分以HbE和HbF為主，臨床表現為重度貧血，需長期輸血治療。長期輸血給家庭和社會帶來了沉重的經濟負擔。血紅蛋白毛細管電泳能有效篩出HbCS和HbE攜帶者，當夫妻雙方中一方為HbCS或者HbE攜帶者時，另一方要特別注意地中海貧血基因檢測，預防CS型HbH或者重型β地中海貧血患兒的出生。因此，血細胞參數分析和血紅蛋白毛細管電泳聯合篩查在預防出生缺陷中起到重要作用，應在育齡夫婦的婚檢產檢中大力推廣。

Hb Q-Thailand是由于HbA1：C.223G＞C位點的突變導致的，且常與4.2缺失型α地貧連鎖存在[8]。本研究檢出Hb Q-Thailand 9例，基因型均為 -α4.2/αα 或 -α4.2/-α4.2，臨床表現為輕微小細胞低色素貧血，當夫婦雙方攜帶這類異常血紅蛋白時，胎兒不需進一步產前診斷。

本研究檢出27例Hb New York，臨床表型正常，其中1例Hb New York復合IVS-Ⅱ-806雙重雜合突變，IVS-Ⅱ-806(G→C) in beta突變類型在人類異常血紅蛋白地中海貧血庫上未見報道。臨床表現為中度貧血（Hb68g/dl，MCV61.2fl，MCH 17.6pg）, 為研究其臨床表型與該突變是否關聯，日后將為該患者進行回訪，有條件將進行家系分析。此發現豐富了中國人群 β- 珠蛋白基因突變譜。

本研究檢出一例SEA-HPFH，臨床表現為重度貧血，與杜麗等[9]報道不相符，本案例患者臨床診斷為腎病綜合征，重度貧血原因可能與腎病綜合征有關；Z1區變異體案例臨床表現為重度貧血，地貧基因結果為——SEA/αα，未做稀有地貧檢測，該區變異體可能是δ地貧，貧血原因可能為δ地貧復合α0- 地貧所致。