珠海某醫院腹瀉患者糞便沙門菌血清學分型及藥敏情況分析

馮文南 黃麗慶 吳浪波

【摘要】目的：探討珠海某區腹瀉患者糞便沙門菌血清學分型及藥敏情況。方法：回顧性分析本院2019年1月至2020年1月住院和門診腹瀉患者617例的糞便培養，對培養陽性的實施血清分型，對菌株實施檢測，對常用抗生素的耐藥性實施分析。結果：2019年全年617例腹瀉者糞便中分離出沙門菌共39株，血清型12種，以Ⅰ4，5，12：i：-和腸炎沙門菌為主。菌株對舒巴坦/氨芐西林和氨芐西林耐藥率最高，磺胺甲惡唑/甲氧胺嘧啶耐藥性其次，頭孢吡肟、頭孢曲松、環丙沙星耐藥性較低，6株雙重或以上耐藥。結論：沙門菌中Ⅰ4，5，12：i：-和腸炎沙門菌為優勢血清型，具有嚴重耐藥性，特別是對三代和四代頭孢菌素和環丙沙星。

【關鍵詞】腹瀉；沙門菌；血清學分型

【中圖分類號】R378.2.【文獻標識碼】A.【文章編號】2096-5249（2021）14-0230-02

沙門菌是引起食源性腹瀉的重要病原菌，沙門菌屬于細菌，常見于受污染的蛋類、肉類及水產品中，感染后會引發傷寒、胃腸炎等疾病，嚴重影響人類健康[1-2]。沙門菌的血清型復雜多變，不同血清的致病性和對抗生素的敏感性具有差異。近年來，畜牧業、養殖業非治療性使用抗生素以及不合理的使用抗生素，使沙門菌的耐藥性不斷升高，給患者的藥物選擇造成困難[3]。為了解本地區沙門菌血清學分型及藥敏情況，本研究選取珠海某區腹瀉患者糞便沙門菌進行血清學分型及藥敏情況分析。

1？對象與方法

1.1.研究對象

分析對象選擇于2019年1月至2020年1月腹瀉患者617例，所有患者年齡均在3個月～79歲，包括27例男性患者12例女性患者，年齡（21.03±10.30）歲，其中9例患者年齡<1歲，所占比例為23.08%，19例患者年齡1～10歲，所占比例為48.72%，9例年齡20～79歲，所占比例23.08%，4～8月為集中發病時間段，發病最多的月份為7月份，11例發生于7月份，所占比例為28.21%，6月份和9月份各5例，所占比例為12.82%，其他患者發病分散在其他月份。不明確可疑食物。

納入標準：符合腹瀉診斷標準；臨床資料完整。

排除標準：依從性；標本污染。

1.2.方法

1.2.1 主要儀器與試劑。沙門菌顯色培養基（科馬嘉）、營養瓊脂（廣東環凱）、GN鑒定卡（生物梅里埃）、沙門菌診斷血清（丹麥SSI）、MH平板（廣東環凱）、藥敏紙片（OXOID）、藥敏分配器（OXOID）、去離子水系統（Milipore）及藥敏分析系統。1.2.2 標本采集。糞便標本經沙門志賀菌增菌肉湯增菌后，接種培養基培養18 h，挑取XLD培養基上可疑的黑色菌落，經全自動微生物分析儀鑒定菌種，若鑒定結果為沙門菌，則從科馬嘉顯色平板上挑取可疑菌落到腦心浸液平板上，37 ℃培養16 h，生理鹽水制備菌懸液，用GN鑒定卡生化鑒定，診斷血清進行O抗原分型，再用0.6%營養軟瓊脂H抗原分型，血清誘導后進行H抗原第2相鑒定，生理鹽水做自凝對照。根據K～W血清分型表確定血清型。

1.2.3 藥敏試驗方法。采用紙片擴散法和自動化儀器對已分型的沙門菌株進行藥物敏感試驗。利用全自動藥敏分析和細菌鑒定儀對細菌藥敏測試卡片（AST-GN）實施藥敏試驗。對菌落應用無菌脫脂棉簽挑選，涂于哥倫比亞血平板，15 min內37 ℃培養，在無菌鹽水（0.45%）中進行研磨，在試管中插入藥敏測試卡片導管。選擇15種抗菌藥物，包括亞胺培南、厄他培南、頭孢吡肟、頭孢曲松、氨芐西林、左氧氟沙星等。以沙門菌和腸桿菌的藥敏標準（MIC）為判斷藥敏結果，大腸桿菌ATCC25922為質控菌株。

1.3.觀察指標

血清型分析包括39株沙門菌。腸炎沙門菌和其他血清型沙門菌耐藥情況。

1.4.統計學方法

錄入SPSS 22.0軟件分析。用率（%）表示計數資料，行Fisher χ2檢驗，P<0.05差異有統計學意義。

2？結果

2.1.血清型分析.

本研究中共檢測出沙門菌39株，分別屬于4個群，12種血清型，B群、D群、其他群占比較多，分別為14株、9株、15株，其他群的Ⅰ4，5，12：i：-菌株占比最高，其次是D群的腸炎沙門菌，B群的鼠傷寒沙門菌，其中Ⅰ4，5，12：i：-血清型和4，5，12：-：-血清型為上送珠海市疾控中心復核血清型結果，所有血清型均與珠海疾控對比確認。見表1。

2.2.腸炎沙門菌和其他血清型沙門菌耐藥情況.

取15種抗生素進行藥敏試驗，厄他培南、亞胺培南、替加環素敏感率最高為100.00%；阿莫西林/棒酸中介率最高為23.08%；頭孢西丁、頭孢呋辛、頭孢呋辛酯耐藥率最高為100.00%，見表2。

3？討論

感染性腹瀉在發展中國家屬于常見傳染病，其中沙門菌是重要的病原菌。沙門菌若破壞腸黏膜，會通過淋巴系統進入血流，引起全身感染，容易出現并發癥甚至死亡[4]。年齡最小者為3個月，平均（21.03±10.30）歲，其中9例患者年齡<1歲，所占比例為23.08%，19例患者年齡1～10歲，所占比例為48.72%，說明兒童面臨的沙門菌感染的情況依舊嚴峻，應進一步調查明確，并對沙門菌的生物特征及危險因素進行研究[5]。

沙門菌引起的感染性腹瀉一般使用的藥物主要是頭孢類、喹諾酮類以及氨芐西林等，沙門菌耐藥性主要通過染色體基因突變、主動外排系統和可轉移遺傳元件介導，而多重耐藥表型的產生被認為可能是一種機制或多種機制的共同作用的結果[6]。本次藥敏試驗選擇的15中抗生素藥物進行藥敏試驗，耐藥率最高的為頭孢西丁、頭孢呋辛、頭孢呋辛酯，耐藥率為100.00%，可作為預防與治療的首選藥物，對頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦部分耐藥，整體耐藥情勢較為樂觀，與我國其他省份耐藥情況大體一致。本研究中共檢測出沙門菌39株，分別屬于4個群，12種血清型，B群、D群、其他群占比較多，分別為14株、9株、15株，其他群的Ⅰ4，5，12：i：-菌株占比最高；其次是D群的腸炎沙門菌，B群的鼠傷寒沙門菌。近年來食源性疾病呈現散發的特征，沙門菌Ⅰ4，5，12：i：-菌株高致病性可能因其fljAB區基因變異或耐藥質粒的整合而具有更復雜更多樣的毒力和抗藥能力，使它更易在動物性食物中生存。分型鑒定致病菌，建立本底數據庫，可快速準確找到疾病爆發的傳染源，明確菌株間的遺傳相關性，掌握本地區的沙門菌流行動態[7-8]。針對本研究中的沙門菌耐藥情況建議，超過50%的鼠傷寒沙門菌對氨芐西林、鏈毒素耐藥，可能會出現治療失敗的風險；對于沙門菌、氨基糖苷類可能在體外實驗顯示活性，應謹慎選擇。

綜上，沙門菌中Ⅰ4，5，12：i：-和腸炎沙門菌為優勢血清型，具有嚴重耐藥性，特別是對三代和四代頭孢菌素和環丙沙星，需提升重視度。因此需重視珠海地區沙門菌耐藥和血清型監測。

參考文獻

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