特殊醫(yī)學用途配方食品中維生素C含量的測定

郭文韜 梁喜玲

摘 要：本文建立了一種特殊醫(yī)學用途配方食品中維生素C含量測定的方法。經(jīng)實驗測定，質(zhì)控樣的維生素C含量理論值與測定值在允許誤差范圍內(nèi)，分別為96.05 mg/100 g與99.31 mg/100 g，質(zhì)控樣和樣本的加標回收率均較好，該實驗方法準確度較高，且精密度良好，6個批次的特殊醫(yī)學用途配方食品中維生素C的含量均滿足相關(guān)的要求，本方法適用于檢測該類產(chǎn)品中維生素C的含量。

關(guān)鍵詞：維生素C;熒光法;特殊醫(yī)學用途配方食品

維生素C是一種水溶性維生素，是人體必需的營養(yǎng)素之一，在維持正常的人體機能方面有著重要的作用。它參與了神經(jīng)介質(zhì)、激素的生物合成，促進膠原蛋白的合成，具有抗癌的功效。在促進膽固醇排泄防止其在動脈內(nèi)壁沉積方面也有重要的作用。維生素C廣泛存在于植物組織中，新鮮的水果和蔬菜中含量較為豐富，尤其是花菜、青辣椒、橙子、獼猴桃等果蔬。人體缺乏維生素C會引起相關(guān)疾病，但其攝入量只需滿足機體正常需求即可，無需過量攝入。人體自身無法合成維生素C，只能從食物或腸外營養(yǎng)供給，但其容易氧化，且在體內(nèi)儲存時間短。一些特殊的人群，如孕產(chǎn)婦，除正常的飲食攝取以外，可適當補充一些添加維生素C的特殊營養(yǎng)物質(zhì)。

研究建立快速準確測定特殊配方食品中維生素C含量的方法具有重要意義，可為保障生命體健康和安全提供有力的技術(shù)支撐。對于維生素C的檢測方法研究較多，有高效液相色譜法[1-2]、紫外分光光度法[3]、熒光比色法[4-5]及光學快速檢測卡法[6]等。《食品安全國家標準 嬰幼兒食品和乳品中維生素C的測定》（GB 5413.18—2010）[4]中的熒光法，是目前檢驗機構(gòu)和乳粉企業(yè)普遍采用的方法，該方法具有操作簡便高效、重復性好、靈敏度高、檢出限低和線性關(guān)系好等優(yōu)點。本研究擬采用質(zhì)控樣品、精密度實驗、加標實驗和實際樣本測試等方法研究熒光法用于檢測特殊醫(yī)學用途配方食品中（孕產(chǎn)婦營養(yǎng)補充劑）維生素C含量的適用性。

1 材料與方法

1.1 樣本與試劑

不同批次的孕產(chǎn)婦營養(yǎng)配方谷粉（2個不同廠家各3批次），總計6個樣本，均由企業(yè)提供。本實驗方法中所涉及到的常規(guī)試劑除活性炭（化學純）外均為分析純，質(zhì)控樣購買于中國檢驗檢疫科學研究院測試評價中心。

1.2 儀器與設(shè)備

溫度可調(diào)節(jié)的烘箱;培養(yǎng)箱;ATL-224電子天平;RF-6000熒光分光光度計。

1.3 樣本的前處理與標準溶液的配制

樣本的前處理過程和維生素C標準溶液（濃度0.1 mg/mL）

的配制方法參照國家標準《食品安全國家標準 嬰幼兒食品和乳品中維生素C的測定》（GB 5413.18—2010）中的方法進行。

1.4 方法

1.4.1 樣本的測定

樣本的測定中，用樣本溶液熒光值減去樣本空白溶液熒光值后，可在標準曲線上查找對應(yīng)的維生素C的質(zhì)量濃度。

1.4.2 待測液的制備

按照GB 5413.18—2010中的方法繪制標準曲線，試劑添加量按表1進行，分別移取不同體積的標準溶液于10 mL試管中，1到4編號備用，用蒸餾水補充至2 mL，同時吸取2 mL空白溶液于另一個10 mL試管中，標記為5號。定容到2 mL后繼續(xù)添加鄰苯二胺溶液，搖勻，在避光條件下靜置1 h后待測。

1.4.3 加標回收率實驗

在相同的實驗操作下，將質(zhì)控樣與6個樣本進行測定，得到其維生素C的含量。質(zhì)控樣的維生素C含量測定后，與該理論值進行比較，對實驗結(jié)果的可靠性進行驗證。加標回收實驗：對已測得維生素C含量的樣本，加入一定量的維生素C標準溶液（其質(zhì)量濃度為0.1 mg/mL）。測定樣本、加標樣本、質(zhì)控樣和加標質(zhì)控樣，對實驗測定結(jié)果進行比對，考察回收率的情況。

1.4.4 精密度實驗

3號孕婦配方谷粉為精密度測試實驗的研究對象。分別稱取3號樣本6份，在相同的實驗條件下，平行測定6份產(chǎn)品中的維生素C含量，研究本實驗方法的精密度情況。

1.4.5 數(shù)據(jù)處理

采用常用軟件Excel軟件進行數(shù)據(jù)分析處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 樣本測定結(jié)果

取質(zhì)控樣品和6個不同批次的樣本2.5 g，同一種樣品均取平行樣，分別測定維生素C含量，結(jié)果見表2（該方法的檢出限為0.1 mg/100 g）。

2.2 標準曲線的繪制

參照國家標準GB 5413.18—2010中維生素C的測定方法，將熒光分光光度計激發(fā)波長設(shè)定為350 nm，發(fā)射波長為430 nm，測定標準系列溶液的熒光值，標準曲線的橫坐標為維生素C標準溶液的質(zhì)量濃度（μg/mL），標準曲線的縱坐標為相應(yīng)的凈熒光值（標準系列熒光值減去標準空白熒光值），繪制標準曲線圖（圖1），所擬合的標準曲線線性方程為y=10.921 3x+0.630 3（R2=0.999 2），線性良好。

2.3 加標回收驗證實驗結(jié)果

在表3中，前4組數(shù)據(jù)是3號樣本的加標回收實驗，最后一組是質(zhì)控樣本（樣品質(zhì)量為2.500 6 g）的加標回收實驗。由表3可知，特殊醫(yī)學用途配方食品樣本和質(zhì)控樣的加標回收率均較高，樣本的回收率結(jié)果為90.0%～93.5%，質(zhì)控樣為92.5%，相對標準偏差為1.25%，值相對較小。熒光法適合檢測特殊醫(yī)學用途配方食品中的維生素C含量，且本方法可靠性高，具有較好的準確度。

2.4 精密度實驗結(jié)果

由表4可知，對3號樣本測定6次平行實驗，維生素C含量平均值為155.1 mg/100 g，相對標準偏差為4.64%，在國標規(guī)定的范圍內(nèi)，表明該方法的精密度較好，可以滿足檢測要求。

3 結(jié)論

本研究中質(zhì)控樣維生素C含量理論值與測定值在允許誤差范圍內(nèi)，證明測定結(jié)果是可靠的。質(zhì)控樣和3號樣本的加標回收率為90.0%～93.5%，相對標準偏差為4.64%，表明熒光法準確度較高，精密度較好，測定結(jié)果準確、可信。6批次市售的特殊醫(yī)學用途配方食品中維生素C含量均符合國家標準中對維生素C含量添加量的要求，表明熒光法適合檢測特殊醫(yī)學用途配方食品中的維生素C含量，具有實際參考

價值。

參考文獻

[1]林桂榮，郭泳，付亞文，等.新鮮果蔬維生素C測定方法研究[J].北方園藝，1995（2）：7-9.

[2]閆龍寶，劉艷琴，王浩，等.HPLC法測定嬰幼兒配方奶粉中維生素C[J].食品科技，2008，32（6）：184-185.

[3]張英.食品理化檢測與微生物實驗[M].北京：中國輕工業(yè)出版社，2004.

[4]中華人民共和國衛(wèi)生部.食品安全國家標準 嬰幼兒食品和乳品中維生素C的測定：GB 5413.18—2010[S].北京：中國標準出版社，2010.

[5]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局，中國國家標準化管理委員會.肉制品 維生素C含量測定：GB/T 9695.29—2008[S].北京：中國標準出版社，2008.

[6]左春艷，何保山，王丹等.維生素C光學快速檢測卡研究[J].食品科技，2012，37（4）：281-282.