病原微生物檢驗中分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用準(zhǔn)確率探討

龐瑞昌 賈賽 徐秀芬

【摘要】目的：探討將分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用于至病原微生物檢驗中的準(zhǔn)確性。方法：選取2020年1月至12月期價在我院行病原微生物檢測患者120例，所有受檢者均行實時熒光RT-PCR（實施組）以及常規(guī)RT-PCR（常規(guī)組）檢測，分別比較其檢測陽性率。結(jié)果：實施組受檢者病原微生物檢驗陽性率高達(dá)84.17%遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于常規(guī)組57.50%，兩組陽性結(jié)果互比差異顯著（P<0.05）。結(jié)論：將分子生物學(xué)技術(shù)（RT-PCR）應(yīng)用至病原微生物檢驗工作中，不僅具有較高的陽性率，且具有檢測迅速的優(yōu)勢，為此可將該檢驗技術(shù)作為常見微生物病原菌的檢驗當(dāng)中，并值得臨床借鑒和推廣。

【關(guān)鍵詞】病原微生物;檢驗;分子生物學(xué)技術(shù);陽性率

當(dāng)前，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷進步，生物科學(xué)技術(shù)也逐漸讓人們所了解，人體的康健與微生物間的關(guān)系密切，而臨床對生物學(xué)檢驗技術(shù)越來越重視，該技術(shù)已然在臨床上應(yīng)用越來越成熟，被廣泛地應(yīng)用至于病原微生物有關(guān)的檢驗工作中。以往，臨床微生物檢驗流程包括：病原菌分離培養(yǎng)→染色鏡檢→血清學(xué)試驗等，由于檢驗流程復(fù)雜、周期長，其結(jié)果往往受到環(huán)境等各種因素的影響對產(chǎn)生差異，故時效性和應(yīng)用性存在局限性。當(dāng)前，以PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）、生物傳感器、基因芯片（DNA）等，分子生物學(xué)代表在臨床檢驗工作中的優(yōu)勢越加凸顯，對提升微生物檢驗質(zhì)量有著非常重要的意義?；诖?，本次研究將著重分析病原微生物檢驗中應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)的準(zhǔn)確性，旨在積累更加豐富的病原微生物檢驗工作經(jīng)驗，相關(guān)材料如下。

1材料與方法

1.1一般資料

選取2020年1月至12月期價在我院行病原微生物檢測患者120例，女性47例，男性為73例，年齡跨度為23歲至60歲之間，平均（40.2±3.9）歲。所有受檢者均知曉本次研究內(nèi)容，并表示愿意積極配合完成各項檢查，已簽署知情同意書。此外，本次研究內(nèi)容已經(jīng)得到我院倫理委員的支持和認(rèn)可。

1.2方法

所有受檢者120例均采集2份病原微生物標(biāo)本，共計240份，其中120份行常規(guī)RT-PCR病原微生物檢驗（常規(guī)組），剩余120份行熒光定量RT-PCR病原微生物檢驗（實施組）。詳細(xì)記錄其檢驗結(jié)果。

1.3觀察指標(biāo)

所有受檢者的病原微生物檢驗結(jié)果行陽性率計算。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

SPSS22.0展開詳細(xì)分析，數(shù)據(jù)采用（%）體現(xiàn)，x2互比檢驗，如P值<0.05，則表示為具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

實施組受檢者病原微生物檢驗陽性率高達(dá)84.17%遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于常規(guī)組57.50%，兩組陽性結(jié)果互比差異顯著（P<0.05），詳細(xì)數(shù)據(jù)見表1。

3討論

近些年以來，伴隨著大眾對人類健康與微生物之間關(guān)系的認(rèn)知度越來越高，進而微生物檢驗工作的關(guān)注度亦得到大眾的重視。目前，食品、飲用水以及臨床診療等各個領(lǐng)域，都有病原微生物檢驗的身影，而分子生物學(xué)技術(shù)中分子生物學(xué)、聚合酶鏈反應(yīng)、免疫學(xué)、基因芯片、蛋白質(zhì)指紋圖譜技術(shù)以及生物傳感等得到了長足發(fā)展，并進入了一個全新的階段，當(dāng)前以分子生物學(xué)技術(shù)為技術(shù)手段，已經(jīng)打開了科學(xué)進步的大門。伴隨在該項技術(shù)的不斷發(fā)展，使其由傳統(tǒng)的細(xì)胞學(xué)漸漸向分子技術(shù)、基因技術(shù)發(fā)展，為此形成了一項新技術(shù)——分子微生物學(xué)。通過對其不斷研究和認(rèn)識，從其外部結(jié)構(gòu)的相關(guān)研究緩慢向其內(nèi)部結(jié)構(gòu)進行深入研究，促使微生物檢驗自生化免疫不斷向基因水平發(fā)展。當(dāng)前各種分子生物學(xué)技術(shù)被臨床廣泛的應(yīng)用于病原微生物檢驗工作中，不僅及時改善了原有微生物檢驗不足的問題，同時實現(xiàn)了快速、有效以及準(zhǔn)確的最終檢驗?zāi)繕?biāo)[5]。目前，臨床在病原菌檢測方面已經(jīng)逐漸向簡單、自動化方面發(fā)展，而分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展是在全自動化儀器技術(shù)上，將鑒定、診斷，甚至是耐藥基因檢驗都被一一應(yīng)用至生物芯片技術(shù)當(dāng)中，在一定程度上優(yōu)化了傳統(tǒng)病原菌臨床應(yīng)用的現(xiàn)狀。

生命科學(xué)領(lǐng)域中最為常見的分子生物學(xué)技術(shù)即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR），在傳統(tǒng)聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)的基礎(chǔ)上，被慢慢改進，并得到不斷地發(fā)展。PCR的技術(shù)原理為，在相同聚合酶反應(yīng)體系基礎(chǔ)上，將特異性引物融入，由體外酶促合成DNA的手段，將其變性→退火→延伸等多個步驟反應(yīng)而成，不斷循環(huán)、重復(fù)實施，使其DNA指數(shù)最終達(dá)到迅速擴增的目的[6-7]。而實時熒光定量（RT-PCR），是在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)中放入熒光，通過熒光信號不斷積累，再開展檢驗工作，采用標(biāo)準(zhǔn)曲線定量，詳細(xì)分析未知模板，該種分子生物學(xué)技術(shù)被廣泛應(yīng)用在臨床常見病原菌生物檢驗、分型中。分子生物學(xué)技術(shù)的優(yōu)勢主要總結(jié)以下幾點：首先靈敏性更高;其次為特異性高，在檢驗中可以準(zhǔn)確鑒別出不同類型的病原微生物;最后是檢驗流程不僅具有便捷性，同時整個檢驗過程可在2h內(nèi)完成，在一定程度上縮短了微生物檢驗用時[8]。為此，該種檢驗技術(shù)非常適用于常見病原微生臨床檢驗中。

通過本次研究結(jié)果顯示：實施組受檢者病原微生物檢驗陽性率高達(dá)84.17%遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于常規(guī)組57.50%，兩組陽性結(jié)果互比差異顯著（P<0.05），該數(shù)據(jù)充分證明：分子生物技術(shù)應(yīng)用在病原微生檢驗中具有迅速檢測、準(zhǔn)確性高的優(yōu)勢，具有較高的可行性和有效性。此外，經(jīng)本次研究深有體會，筆者認(rèn)為：臨床病原微生物的檢驗技術(shù)正在不斷日新月異，而分子生物學(xué)技術(shù)在檢驗病原菌微生物中具有獨特的優(yōu)勢，在臨床檢驗中發(fā)揮的作用越來越關(guān)鍵，其技術(shù)不斷完善，其優(yōu)勢（快速、準(zhǔn)確性高、經(jīng)濟等），不僅檢驗范圍更加廣泛，且在預(yù)防和控制疾病中的前景更加廣闊，具有一定的臨床應(yīng)用價值，可以為患者的健康提供相應(yīng)的保障，基于此，應(yīng)在日后工作中不斷的進行深入研究，方能適應(yīng)當(dāng)代技術(shù)發(fā)展的步伐。

綜上所述，將分子生物學(xué)技術(shù)（RT-PCR）應(yīng)用至病原微生物檢驗工作中，不僅具有較高的陽性率，且具有檢測迅速的優(yōu)勢，為此可將該檢驗技術(shù)作為常見微生物病原菌的檢驗當(dāng)中，并值得臨床借鑒和推廣。

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