茶多酚對奶山羊生產性能、血液指標和抗氧化功能的影響

肖紅艷 屈金濤,2 凌 浩 張紫陽 何幼寬 劉懿慧 張佩華*

(1.湖南農業大學動物科學技術學院，長沙 410128；2.城步羴牧牧業有限公司，邵陽 422500)

隨著抗生素長期使用帶來的細菌耐藥性和藥物殘留等問題，國家農業農村部發出公告，自2020年1月1日起，退出除中草藥外的所有促生長類藥物飼料添加劑品種[1]。因此，尋找更為安全的綠色飼料添加劑已成為目前的研究熱點。茶多酚是從茶葉及茶葉副產品中提取的多酚類物質，是一種天然的抗氧化劑，主要成分包括兒茶素、黃酮類和酚酸類等有機化合物[2]。茶多酚具有抗菌、抗氧化、改善肉品質、提高動物的生產性能及機體免疫力等功能[3-6]。Wang等[5]研究表明，飼糧中添加200 mg/kg的茶多酚可提高蛋雞產蛋性能，改善料蛋比、蛋品質以及內臟形態。Zou等[7]研究發現，飼糧中添加0.06 g/kg BW的茶多酚可以改善黃羽肉雞的肉品質，促進腸道有益菌的生長，對生產性能沒有影響。Ahmed等[8]研究發現，飼糧中添加綠茶提取物能夠提高山羊的日增重，改善其肉品質和營養成分，改變羊肉脂肪酸的組成，提高肉的氧化穩定性。目前國內外關于茶多酚在畜禽上的研究主要集中在豬、家禽等方面，而在反芻動物特別是奶山羊方面研究鮮見報道。因此，本試驗旨在研究茶多酚對奶山羊生產性能、血液指標和抗氧化能力的影響，探討其在奶山羊上的應用效果，為茶多酚在奶山羊養殖中的應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗地址和試驗材料

試驗于2020年6—7月在湖南省邵陽市城步苗族自治縣某牧場進行，試驗動物為西農薩能奶山羊。茶多酚為湖南某公司生產，提取原料為綠茶葉，主要成分及含量為：茶多酚50%，水分5%，咖啡堿6.84%，茶多糖3.5%。

1.2 試驗設計

選擇24只體重[(55.04±8.22)kg]、泌乳天數[(180±4)d]、產奶量[(1.50±0.16)kg]、胎次(2～3胎)相近的健康西農薩能奶山羊作為試驗動物，隨機分成2組，每組4個重復，每個重復3只羊。對照組飼喂全混合日糧(TMR)，試驗組在TMR中添加5.71 g/kg茶多酚(參考張培軍[9]、洪興華等[10]、陳明等[11]、Ma等[12]的研究結果確定茶多酚添加量)。試驗期52 d，其中預試期10 d，正試期42 d。

1.3 基礎飼糧與飼養管理

基礎飼糧參照NRC(2007)奶山羊的營養需要配制，其組成及營養水平見表1。奶山羊采用小欄飼養，每天08:00和16:00各飼喂1次TMR，保證每欄有5%的剩料。自由采食、自由飲水。每天07:00和18:00進行擠奶。其他飼養管理按照羊場的原有規定進行。

表1 基礎飼糧組成及營養水平(干物質基礎)

1.4 樣品采集與指標測定

1.4.1 生產性能的測定

正試期每天記錄每只羊的產奶量；每天準確記錄飼喂量和剩料量，測定飼糧中的干物質含量，以欄為單位計算每只羊的干物質采食量。

1.4.2 奶樣的采集與測定

在正試期第21天和第42天每頭羊按早、晚產奶量=6∶4(體積比)的比例采集奶樣100 mL，添加防腐劑，混勻后分裝至50 mL離心管，用于乳成分測定。乳糖率、乳脂率、乳蛋白率以及乳中非乳脂固體和尿素氮含量使用FOSS乳成分分析儀(Milko canTMFT6000)測定，乳中體細胞數使用利拉伐DCC體細胞計數儀測定。

1.4.3 血樣的采集與測定

在正試期第21天和第42天晨飼前從頸部靜脈采集血液，使用不含抗凝劑的5 mL真空采血管收集血液，633×g離心15 min后，吸取血清分裝于1.5 mL離心管中，-80 ℃保存備用。使用科華卓越450全自動生化分析儀檢測血清中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量和谷草轉氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)活性。使用試劑盒測定血清抗氧化指標，包括總抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和丙二醛(MDA)含量，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.4.4 血細胞指標的測定

在正試期第21天和第42天晨飼前使用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管從頸部靜脈采集血液5 mL，于采血后2 h內采用全自動五分類血細胞分析儀(光電MEK-7222K)測定血細胞指標。包括白細胞(white blood cell，WBC)、中性粒細胞(neutrophils，NEUT)、淋巴細胞(lymphocyte，LYM)、單核細胞(monocyte，MONO)、嗜酸性粒細胞(eosinophils，EO)、嗜堿性粒細胞(basophils，BASO)、紅細胞(red blood cell，RBC)數量。

1.4.5 飼糧營養水平的測定

正試期每周采用四分法收集飼糧樣500 g，稱重后在65 ℃烘箱中烘48 h，計算初水分含量后粉碎，過40目篩用于飼糧營養水平的測定。飼糧中的干物質含量根據GB/T 6435—2006測定，粗蛋白質含量根據GB/T 6432—2018測定，粗脂肪含量根據GB/T 6433—2006測定，粗灰分含量根據GB/T 6438—2007測定，鈣含量根據GB/T 6436—2018測定，磷含量根據GB/T 6437—2018測定，中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量根據GB/T 6434—2006測定。

1.5 數據統計分析

試驗數據先用Excel 2010進行初步統計整理，然后用SPSS 24.0軟件進行數據分析，先對數據進行正態性檢驗，然后采用獨立樣本t檢驗方法進行數據分析，結果以平均值±標準差表示。P<0.05為差異顯著，0.05≤P<0.10為有差異趨勢。

2 結 果

2.1 茶多酚對奶山羊生產性能的影響

由表2可知，對照組和茶多酚組之間奶山羊的干物質采食量和產奶量無顯著差異(P>0.05)。

表2 茶多酚對奶山羊生產性能的影響

2.2 茶多酚對奶山羊乳成分的影響

由表3可知，第21天，茶多酚組的乳中尿素氮含量顯著高于對照組(P<0.05)，乳中體細胞數顯著低于對照組(P<0.05)；第42天，茶多酚組的乳中體細胞數顯著低于對照組(P<0.05)，乳中尿素氮含量與對照組相比無顯著差異(P>0.05)。對照組和茶多酚組之間乳脂率、乳蛋白率、乳糖率和乳中非乳脂固體含量在第21天和第42天均差異不顯著(P>0.05)。

表3 茶多酚對奶山羊乳成分的影響

2.3 茶多酚對奶山羊血清抗氧化指標的影響

由表4可知，第21天，茶多酚組的血清MDA含量顯著低于對照組(P<0.05)，茶多酚組的血清T-SOD和GSH-Px活性顯著高于對照組(P<0.05)，對照組和茶多酚組之間血清T-AOC無顯著差異(P>0.05)。第42天，與對照組相比，茶多酚組的血清GSH-Px活性有提高的趨勢(P=0.065)，對照組和茶多酚組之間血清T-SOD、T-AOC活性和MDA含量無顯著差異(P>0.05)。

表4 茶多酚對奶山羊血清抗氧化指標的影響

2.4 茶多酚對奶山羊血清生化指標的影響

由表5可知，第21天，對照組和茶多酚組之間血清TP、ALB含量及AST、ALP活性無顯著差異(P>0.05)。第42天，與對照組相比，茶多酚組的血清AST活性有提高的趨勢(P=0.067)，對照組和茶多酚組之間血清TP、ALB含量及ALP活性無顯著差異(P>0.05)。

表5 茶多酚對奶山羊血清生化指標的影響

2.5 茶多酚對奶山羊血細胞指標的影響

由表6可知，對照組和茶多酚組之間血液白細胞、中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜堿性粒細胞和紅細胞數量在第21天和第42天均無顯著差異(P>0.05)。第42天，茶多酚組的血液中嗜酸性粒細胞數量顯著低于對照組(P<0.05)。

表6 茶多酚對奶山羊血細胞指標的影響

3 討 論

3.1 茶多酚對奶山羊生產性能的影響

茶多酚作為一種綠色飼料添加劑，在畜禽飼糧中適量添加可改善動物的生產性能，提高產品品質[13]。Wang等[5]研究報道，飼糧中添加茶多酚對蛋雞的平均日采食量無顯著影響。Gessner等[14]在奶牛上的研究發現，飼糧中添加綠茶提取物不會影響奶牛的干物質采食量。本試驗中，飼糧中添加茶多酚對奶山羊干物質采食量無顯著影響，造成這種結果的原因可能是由于茶多酚具有苦澀味，并且含有單寧、咖啡堿、鞣酸等物質，影響了飼糧的適口性[13,15]，進而影響了奶山羊的采食量。產奶量是反映奶山羊生產性能的重要指標。Winkler等[16]研究結果顯示，飼糧中添加綠茶和姜黃素提取物有提高奶牛產奶量的趨勢，并能顯著提高奶牛的能量校正乳。Ma等[12]研究報道，飼糧中添加茶多酚可以改善高酮血癥奶牛的產奶量和健康狀況。本試驗中，飼糧中添加茶多酚對奶山羊產奶量無顯著影響，可能原因是試驗動物不同，具體原因還有待進一步研究。

3.2 茶多酚對奶山羊乳成分的影響

乳中體細胞數可以反映奶山羊乳房的健康狀況和生鮮乳的質量。本試驗中，飼糧中添加茶多酚顯著降低了乳中體細胞數，說明茶多酚對奶山羊乳房健康有積極作用。Ma等[17]研究表明，茶多酚能夠抑制活性氧(ROS)和MDA產生，提高抗氧化酶的活性，保護牛乳腺上皮細胞免受氧化損傷。同時，茶多酚具有較強的抗炎、抗菌和免疫調節作用[13]。因此，推測茶多酚可能是通過提高機體的抗氧化能力和免疫力，降低乳中體細胞數。乳中尿素氮含量可以反映出動物對蛋白質的利用效率。本試驗中，飼糧中添加茶多酚提高了乳中尿素氮含量，推測茶多酚可能促進了瘤胃微生物對飼糧粗蛋白質的降解。

3.3 茶多酚對奶山羊血清抗氧化指標的影響

體內ROS的生成與抗氧化酶的產生是一種動態平衡關系，當平衡被打破時，就會產生大量的自由基，造成氧化應激，從而引起多種疾病的發生[13]。T-AOC是評定機體抗氧化能力的綜合指標，超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)和GSH-Px等抗氧化酶在保護機體免受氧化損傷方面起著重要作用，在一定范圍內活性越高表明機體的抗氧化能力越強[18]。MDA是脂質氧化的終產物，血清中MDA含量越低，機體受到的氧化損傷就越小。張培軍[9]研究表明，飼糧中添加茶多酚能顯著提高奶牛血清T-AOC和GSH-Px活性，顯著降低血清MDA含量。Shah等[6]研究報道，飼喂4%茶樹的枝葉(BLTT)能顯著提高南江黃山羊血清SOD和GSH-Px活性，降低血清MDA含量。本試驗中，飼糧中添加茶多酚可顯著提高血清中GSH-Px和T-SOD活性，降低血清MDA含量，與前人的研究結果基本一致。其原因可能是飼糧中添加茶多酚后，提高了血清中抗氧化酶的活性，降低機體的脂質過氧化水平，進而提高了奶山羊的抗氧化功能[2]。

3.4 茶多酚對奶山羊血清生化指標的影響

血清生化指標的變化能夠評估機體的健康水平及營養物質的代謝情況。血清AST活性是反映機體肝臟功能的重要指標[19]。AST能夠調節機體內蛋白質的代謝，當蛋白質代謝水平提高或肝臟功能受損時，血清AST活性升高[19]。本試驗中，茶多酚組奶山羊血清AST活性有提高的趨勢，但處于正常范圍內[20]，推測茶多酚組血清AST活性的升高并不是肝功能受到損傷，而是促進了機體內蛋白質的代謝。李樺等[21]研究表明，茶多酚具有調節機體蛋白質代謝的作用。血清ALP也是檢測肝臟功能的一個重要指標，當肝臟受到損傷時，肝細胞膜通透性加大，從而導致血清ALP活性升高[22]。本試驗中，飼糧中添加茶多酚對奶山羊血清AST和ALP活性無顯著影響，說明飼糧中添加茶多酚不會對奶山羊的肝功能產生負面影響。

3.5 茶多酚對奶山羊血細胞指標的影響

血細胞作為血液中最基本的檢查指標，可通過血液中細胞的增多或減少來反映機體的健康狀況和預測疾病的發生[23]。血細胞中的白細胞是體內重要的免疫細胞，主要包括單核細胞、中性粒細胞、嗜酸性和嗜堿性粒細胞、淋巴細胞，在抵抗異物入侵機體、產生抗體、介導免疫應答方面發揮重要作用[24]。嗜酸性粒細胞在白細胞中的比例較小，通常存在于呼吸道和消化道內，在介導變態反應、寄生蟲感染和免疫調節等方面發揮重要作用[25]。研究表明，當機體感染寄生蟲時，體內嗜酸性粒細胞數量增多[26]。Zhong等[27]研究表明，茶多酚能夠抑制捻轉血矛線蟲的感染，提高宿主的抵抗力。本試驗中，飼糧中添加茶多酚降低了血液中嗜酸性粒細胞的數量，對其他血細胞指標無顯著影響，說明茶多酚對動物的健康無負面影響。目前，茶多酚對血細胞指標影響的研究較少，具體機制還有待進一步研究。

4 結 論

在本試驗條件下，飼糧中添加茶多酚能提高奶山羊的抗氧化功能，降低乳中體細胞數。