高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法在毒品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

游雙銀

（河南金劍司法鑒定中心，河南 洛陽(yáng) 471000）

一、引言

現(xiàn)如今，隨著色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)應(yīng)用的不斷廣泛，其在毒品檢測(cè)中的應(yīng)用也不斷深入，并且近年來(lái)已經(jīng)在檢測(cè)方法上取得了很大程度的突破，國(guó)內(nèi)外學(xué)者也開展了廣泛的研究和應(yīng)用，例如李超等人，建立了基于高動(dòng)能研磨酸性甲醇超聲法的毛發(fā)內(nèi)部存留毒品提取法，實(shí)現(xiàn)了對(duì)兩種合成大麻素的LC-MS/MS等物質(zhì)的提取[1]，此方法能夠被應(yīng)用于多種毒品的檢測(cè)和分析過程中，在檢測(cè)過程中其操作比較簡(jiǎn)便，并且回收率比較高[2-3]。鑒于此，本文對(duì)高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法在毒品檢驗(yàn)中的應(yīng)用進(jìn)行了研究。

二、實(shí)驗(yàn)研究

（一）實(shí)驗(yàn)儀器和實(shí)驗(yàn)試劑

本文所采用的實(shí)驗(yàn)儀器是日本島津公司生產(chǎn)的超高壓液相色譜儀（型號(hào)Shimadzu 30A UPLC）、美國(guó)AB SCIEX公司串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀（型號(hào)Q-TRAP 5500）、美國(guó)MILLIPORE公司純水儀、日本島津公司AUW120D電子天平、德國(guó)SiGMA公司臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)、北京萬(wàn)孚智能科技公司球磨儀。

實(shí)驗(yàn)材料選擇方法如下，選擇3個(gè)月以來(lái)從未進(jìn)行過任何毒品吸食的健康志愿者，選擇3個(gè)月以內(nèi)具有毒品吸食經(jīng)歷的吸毒人員。樣品頭發(fā)選取位置均從頭后頂部位置采集。

（二）樣品的預(yù)處理

將頭發(fā)樣品置于體積為15ml的離心設(shè)備中，首先對(duì)其進(jìn)行清洗和消毒，對(duì)污染物質(zhì)進(jìn)行去除。每個(gè)頭發(fā)樣品均使用5毫升的洗滌水進(jìn)行兩次洗滌，然后再用5ml的丙酮溶液進(jìn)行兩次洗滌，每次洗滌的時(shí)間均為2分鐘。收集洗滌完成后的溶劑進(jìn)行吹干，并使用1ml的甲醇溶液進(jìn)行再次清洗，使用UPLC-MS/MS進(jìn)行檢驗(yàn)工作，其最終目的是排除其他的污染物以免影響檢測(cè)效果。

在對(duì)頭發(fā)洗滌完成后，首先將其從離心管中拿出，然后將其放置晾干。然后將其剪為2-3毫米的段狀，并取20mg頭發(fā)進(jìn)行研磨操作，在研磨過程中將管內(nèi)部加入1ml甲醇，將其混合震蕩。在研磨管內(nèi)部采用研磨儀在3000轉(zhuǎn)/分鐘轉(zhuǎn)速下開展研磨操作，研磨持續(xù)三分鐘，隨后超聲處理2小時(shí)，然后取研磨液500μL將其放置于離心管中，以400轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速開展離心操作持續(xù)5分鐘。最后取上層液體0．22μm經(jīng)過有機(jī)模進(jìn)行過濾操作，綠葉經(jīng)色譜-質(zhì)譜儀進(jìn)行分析和檢驗(yàn)。

（三）色譜和質(zhì)譜的基本條件，見表1

表1 色譜和質(zhì)譜的基本條件

7類毒品混合物的質(zhì)譜采集參數(shù)，見表2。

表2

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析

（一）提取劑種類的優(yōu)化

本文對(duì)提取劑的種類對(duì)毒品代謝物的提取效率進(jìn)行了分析，進(jìn)而通過色譜的波峰面積大小分析了不同提取劑的類型對(duì)毒品的提取能力，詳細(xì)情況，見圖1。提取效率分析可知，乙腈對(duì)于MDMA的提取效率好于其他類型的提取劑，但對(duì)于其他六類毒品物質(zhì)，甲醇的提取效果最好。通過對(duì)兩種提取物的色譜圖分析可知，兩者并無(wú)明顯的波峰變化，其根本原因是由于儀器的進(jìn)樣量為1μL，提取劑進(jìn)入流動(dòng)相后由于甲酸銨緩沖液的作用使得其對(duì)峰形的影響不大。

圖1 不同提取劑類型對(duì)毒品的提取效率

（二）研磨方式優(yōu)化

如圖1所示，對(duì)去離子水、甲醇、乙腈、乙醇、甲醇/乙腈等五種試劑對(duì)7類毒品的代謝物

從研磨方式上來(lái)看，研磨可以分為干磨和濕磨兩大類。其中濕磨是將毛發(fā)及其提取物直接放置在研磨管內(nèi)部，開展研磨操作，使得毒品可以在研磨過程中滲透到提取劑內(nèi)部，然而干磨時(shí)，首先要將毛發(fā)研磨成為灰色的粉末狀物質(zhì)，然后再將提取劑加入其內(nèi)部，混合均勻然后進(jìn)行提取操作。對(duì)上述7類毒品毛發(fā)分別用兩類研磨方式進(jìn)行了研磨，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用甲基苯丙胺和氯胺酮這兩類物質(zhì)，研磨過程中采用濕磨方法提取效果比較好，和干磨相比其提取率分別提升19．8%和22．2%。然而對(duì)于其他5類毒品，此種研磨方式并無(wú)明顯的改善效果，從總體上來(lái)看，濕磨對(duì)于提取效果的改善優(yōu)于干磨。

（三）樣本統(tǒng)計(jì)分析

采用以上方法，采集適當(dāng)?shù)臉颖具M(jìn)行數(shù)據(jù)分析。本文采集了冰毒吸食者共計(jì)185份樣本毛發(fā)，其中男性125例，女性60例。

采用上述檢測(cè)方法完成檢測(cè)后，所有被檢測(cè)樣本中均可檢測(cè)出甲基苯丙胺物質(zhì)，其中124例吸食者可檢測(cè)出苯丙胺物質(zhì)，所有樣本的病毒檢測(cè)均在規(guī)定的閾值范圍內(nèi)，對(duì)兩類物質(zhì)的含量數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析可知，毛發(fā)中陽(yáng)性樣本的甲基苯丙胺含量為0．2-0．203ng/mg，其平均含量約為14．09ng/mg，苯丙胺含量為 0．28-10．65ng/mg，其平均含量為1．97ng/mg。在所有毛發(fā)樣本中，兩類物質(zhì)的分布情況，見圖2。在圖中紅色直線代表平均含量。

圖2 毛發(fā)樣本中兩類物質(zhì)的含量分布情況

由圖2可知，在數(shù)據(jù)維度兩類物質(zhì)的離散程度較大，如果單純地采用此種描述方法進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)，無(wú)法準(zhǔn)確地分析出兩類物質(zhì)的含量分布規(guī)律情況，因此應(yīng)該按照一定的方法對(duì)其含量開展詳細(xì)統(tǒng)計(jì)。因此本文采用濃度區(qū)間法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分段統(tǒng)計(jì)。以甲基苯丙胺為例，將其分為0-5、5-10、10-20、20-30、30-40、40以上6個(gè)濃度區(qū)間，然后根據(jù)濃度區(qū)間對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用此種方法并且經(jīng)過實(shí)際數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析后，數(shù)據(jù)的離散程度變得相對(duì)較小，當(dāng)含量越大時(shí)，數(shù)據(jù)的離散程度也變得越大，從整體上來(lái)看，毒品物質(zhì)大多集中在毛發(fā)陽(yáng)性樣本中。詳細(xì)情況，見圖3。

圖3 采用分段區(qū)間統(tǒng)計(jì)后兩類物質(zhì)的含量統(tǒng)計(jì)

四、結(jié)論

本文研究了基于高效液相色譜串聯(lián)法的質(zhì)譜法檢測(cè)毒品的檢測(cè)方法，實(shí)現(xiàn)了7種毒品物質(zhì)的檢測(cè)，該方法檢測(cè)方法簡(jiǎn)單、成本較低，適合于毒品檢測(cè)的基本工作需要，本檢測(cè)方法可以在毒品檢測(cè)工作中推廣應(yīng)用。