免疫法與化學法糞便隱血試驗在大腸癌早期篩查中的應用比較

蔡金平 劉 瓊 李 琴

1.南昌市洪都中醫院檢驗科，江西南昌 330008；2.江西省萍鄉市第三人民醫院檢驗科，江西萍鄉 337055

大腸癌中大部分具有癌前病變性質，通常需要數年或數十年轉變為大腸癌，但由于大腸癌患者早期癥狀并不明顯，其中僅1/3 患者可在早期明確診斷，因此早期診斷大腸癌對疾病預防具有重要意義，且能明顯改善患者預后。糞便隱血試驗（fecal occult blood test，OBT）可對微量血紅蛋白（hemoglobin，Hb）進行檢測，以明確患者是否存在消化道出血，且具有便捷、廉價的優勢，適合高危人群進行反復檢測[1]。化學法與免疫法是常用的OBT 檢測方法，前者是利用顯色反應判斷出血情況，后者則可對Hb 進行定量檢測[2-3]。基于此，本研究探討免疫法與化學法OBT 在大腸癌早期篩查中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年5月—2020年1月南昌市洪都中醫院收治的50 例疑似為大腸癌早期患者作為研究對象，其中男28 例，女22 例；年齡28～74 歲，平均（51.76±8.54）歲；病灶直徑2～5 cm，平均（3.43±0.85）cm。本研究經醫院醫學倫理委員會審核批準。

1.2 納入與排除標準

納入標準：①高度疑似為早期大腸癌患者；②患者簽署知情同意書。排除標準：①有慢性腹瀉史者；②既往有闌尾切除、膽囊切除手術史者；③合并其他消化道出血疾病者；⑤患有其他腫瘤者。

1.3 方法

收集50 例患者糞便標本于一次性標本杯中，7 d內送檢。

1.3.1 免疫法OBT 使用采便棒采集適量糞便標本后，將其放入采便器內，充分搖勻，選擇FB-100 型全自動便潛血分析儀（長春迪瑞醫療科技股份有限公司；吉械注準20162400019）檢測免疫法糞便隱血試驗（iFOBT）值，時間7 min，以50～1000 μg/L 為測量范圍，波長660 nm；陽性判斷：iFOBT＞100 μg/L。

1.3.2 化學法OBT 向糞便標本中加入鄰甲苯胺試劑（分子式C7H9N；含量99%；上海吉至生化科技有限公司；貨號：O69180；規格：500 mL），觀察3 min；陽性判斷：隱血（-）：3 min 不顯色；隱血（+）：30 s 變為藍色；隱血（2+）：變為淺藍褐色，并逐漸向藍褐色轉變；隱血（3+）：立刻變為藍褐色；隱血（4+）：立刻變為藍黑褐色。

1.4 大腸癌預后判斷

對確診為大腸癌的患者進行門診隨訪10 個月，根據《實體瘤治療療效評價標準-RECIST》[4]評估患者預后，包括完全緩解、部分緩解、疾病穩定、疾病進展；將疾病進展患者納入預后不良組，其余患者納入預后良好組。

1.5 觀察指標及評價標準

由經驗豐富的化驗師對結果進行評估，以活檢病理結果作為“金標準”，比較免疫法與化學法OBT 對早期大腸癌的診斷效能，a=真陽性，b=假陽性，c=假陰性，d=真陰性，靈敏度=a/（a+c）×100%，特異度=d/（b+d）×100%，準確度=（a+d）/總例數×100%，陽性預測值=a/（a+b）×100%，陰性預測值=d/（c+d）×100%。

1.6 統計學方法

采用SPSS 25.0 統計學軟件進行數據分析，計數資料用率表示，兩組間比較采用χ2檢驗；繪制iFOBT值預測大腸癌預后的受試者工作特征（receiver operating characteristic curve，ROC）曲線，得出ROC 曲線下面積（area under curve，AUC），檢驗iFOBT 值對大腸癌預后的預測價值，AUC=0.5 為無診斷價值，0.5＜AUC≤0.7 為診斷價值較低，0.7＜AUC≤0.9 為診斷價值中等，AUC＞0.9 為診斷價值較高；以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 活檢病理結果

50 例疑似早期大腸癌患者中，早期大腸癌30 例（60.00%），大腸息肉12 例（24.00%），炎性腸病8 例（16.00%）。

2.2 診斷效能比較

免疫法OBT 對大腸癌的診斷靈敏度、特異度、準確度、陽性預測值及陰性預測值高于化學法OBT，差異有統計學意義（P＜0.05）（表1～3）。

表1 免疫法OBT 檢查結果（例數）

表2 化學法OBT 檢查結果（例數）

2.3 預后不良與預后良好患者iFOBT 值的比較

對活檢病理結果確診為大腸癌的30 例患者進行10 個月隨訪，其中預后良好21 例，預后不良9 例；預后不良組患者的iFOBT 值為（776.35±124.73）μg/L，高于預后良好組的（578.65±103.68）μg/L，差異有統計學意義（P＜0.001）。

表3 免疫法與化學法OBT 診斷效能的比較[%（n/N）]

2.4 iFOBT 值對大腸癌預后的預測價值

將iFOBT 值作為檢驗變量，將大腸癌預后作為狀態變量，繪制ROC 曲線（圖1），得到iFOBT 值預測大腸癌預后的AUC=0.894，95%CI=0.775～1.000，最佳閾值609.880 μg/L，敏感度為0.889，特異度為0.571，約登指數為0.460，iFOBT 值在大腸癌預后預測中均具有較高的價值，當達到最佳閾值時，可達到最佳預測價值。

圖1 iFOBT 值對大腸癌預后預測價值的ROC 曲線

3 討論

大腸癌的發病率在50 歲以上人群中明顯升高，主要與致癌物質接觸時間、人口老齡化等密切相關，對大腸癌高危人群，應提倡進行早期大腸癌篩查，以盡早進行腸鏡檢查，早期治療以改善患者預后[5-6]。腸鏡檢查雖然對早期大腸癌具有較高的陽性檢出率，但因其費用較高、腸道準備嚴格，加上操作復雜、檢查時間較長，不適用于早期大腸癌的篩查[7-8]。與正常患者比較，早期大腸癌患者腸黏膜更容易發生出血，臨床癥狀可表現為糞便隱血，因此目前臨床主要通過OBT對早期大腸癌進行篩查。OBT 中化學法包括聯苯胺化學法、匹拉米洞化學法、鄰聯甲苯胺法等[9]。化學法的主要原理是利用Hb 中具有類似于過氧化物酶活性的亞鐵血紅素，能夠釋放新生態氧，從而氧化鄰甲苯胺受體，轉變為鄰甲偶氮苯，而發生顯色反應，顯色的深淺則能夠對糞便標本中Hb 的多少進行反映[10-11]。但是由于化學法容易受到多種因素影響，如食物（鐵劑、動物肉、肝臟或血等）、維生素C、部分具有還原性的藥物等，導致糞便中Hb 變性，出現假陽性結果，增加不必要的腸鏡檢查[12]。

本研究結果顯示，免疫法OBT 對大腸癌的診斷靈敏度、特異度、準確度、陽性預測值、陰性預測值高于化學法OBT，差異有統計學意義（P＜0.05），提示與化學法OBT 比較，免疫法OBT 應用于大腸癌早期篩查具有更高的臨床價值。免疫法OBT 屬于光學檢驗方法，是利用糞便中Hb 與OC 乳膠試劑發生的特異性聚集反應原理，通過自動分析儀器對Hb 進行檢測，糞便中Hb 濃度增加，則光學密度變化量隨之增加，并且OC 乳膠試劑不會與水果蔬菜中的過氧化氫酶發生反應[13-14]。因此，免疫法OBT 不需要進行飲食限制，同時不會受抗氧化劑的影響，檢測準確度更高，假陽性結果較少。另外，免疫法OBT 操作方法簡單，并且能夠對大批量樣本進行檢測，其自動閱讀功能能夠對樣本進行定量測定，不受飲食、藥物等影響，作為早期大腸癌的篩查工具，具有較高的臨床價值[15-16]。本研究結果顯示，預后不良組患者的iFOBT 值高于預后良好組，繪制ROC 曲線，得到iFOBT 值預測大腸癌預后的AUC＞0.7，提示iFOBT 值在大腸癌預后預測中均具有較高價值，當達到最佳閾值時，可達到最佳預測價值。免疫法OBT 可將糞便中血紅蛋白濃度進行數值化，定量地評估大腸癌患者消化道出血情況，間接地反應患者凝血功能狀態，而腫瘤侵犯程度越高，越容易激活纖溶系統，導致出血量增多[17-18]。因此，通過iFOBT 值可對大腸癌患者預后進行預測，對評估患者病情、預后具有重要的臨床意義。但免疫法OBT 仍存在局限性，比如對于間斷出血的大腸癌，需要連續檢測3 d，或者對于未發生出血的早期大腸癌，無法篩查出大腸病變[19-20]。因此，在早期大腸癌的篩查時，仍應與患者臨床癥狀、影像學及血清學檢查相結合，以提高篩查的準確性。

綜上所述，與化學法OBT 比較，免疫法OBT 應用于大腸癌早期篩查具有更高的臨床價值，篩查效果更佳。