胸腔積液Xpert MTB/RIF UItra檢測對結核性胸膜炎臨床診斷的價值分析

陳艷玲 鐘益鍇 黃 健

江西省胸科醫(yī)院呼吸與危癥醫(yī)學二科，江西南昌 330006

隨著醫(yī)學技術的不斷發(fā)展，結核病逐漸成為一種可提前預防、可治愈的疾病，其是由結核桿菌導致的疾病。通常感染肺部、淋巴系統(tǒng)，其他器官如：中樞神經、腦部、泌尿系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、骨骼等也可受到感染，損害患者各項器官，嚴重威脅了人們生命健康[1-2]。結核病具有傳染性，是全球十大死亡因素之一，在《2018 WHO 全球結核報告：全球與中國關鍵數(shù)據分析》中可知，我國每年新增病例越有91.8 萬例，在全球結核病發(fā)病率較高[3]。在可持續(xù)發(fā)展過程中，為實現(xiàn)“終止結核病”這一愿景，及早篩查診斷結核病，成為關鍵。結核性胸膜炎，主要在患者胸膜腔處于高度過敏狀態(tài)時，結核桿菌生成的代謝產物進入其中，導致胸膜炎癥，部分為直接感染，臨床表現(xiàn)為胸悶、胸痛、發(fā)熱、乏力、盜汗、咳嗽等，無特異性癥狀。為特異性診斷結核性胸膜炎，區(qū)分非結核胸膜炎，對患者疾病治療具有重要意義[4]。臨床多使用超聲波、X 線診斷胸膜炎，儀結合分枝桿菌培養(yǎng)判斷是否為結核感染，但是，常規(guī)方式陽性率第，難以通過單一指標確診，不利于疾病控制。因此，本研究分析了胸腔積液Xpert MTB/RIF UItra（以下簡稱Xpert UItra）檢測對結核性胸膜炎臨床診斷的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年6月—2020年6月江西省胸科醫(yī)院收治的120 例疑似結核性胸膜炎患者作為研究對象，采集所有患者的胸腔積液制得胸水標本。其中，男64 例，女56 例，年齡23～63 歲，平均（48.02±4.12）歲。根據病理學檢查為金標準將患者分為確診組（58 例，確診為結核性胸膜炎）、疑診組（42 例，臨床診斷結核性胸膜炎）和非結核病組（20 例，普通肺炎或胸膜炎患者）。本研究經江西省胸科醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核批準。

納入標準：①患者均有結核性胸膜炎癥狀，如胸痛、呼吸困難、咳嗽咳痰、發(fā)熱盜汗等；②患者6 個月內未曾服用過抗結核藥物；③影像學或組織病理學檢査，患者疑似結核性胸膜炎；④抗酸涂片鏡檢、細菌培養(yǎng)及Xpert MTB/RIF（簡稱Xpert）檢測，培養(yǎng)陽性者行表型藥敏試驗；⑤患者的隨訪時長均超過半年；⑥所有患者同意參與本研究。排除標準：①在-70℃保存的胸腔積液量＜1 mL；②污染標本；③患者的Xpert 檢測結果不確定。

1.2 方法

細菌培養(yǎng)：參照《結核病診斷實驗室檢驗規(guī)程》[5]進行標準化操作，取標本10 mL，在4℃環(huán)境中以3000 r/min 速度離心30 min，用N-乙酰基工半胱氨酸-氫氧化鈉對1.5 mL 痰液去污染20 min，在PBS 中和至4 mL，4℃環(huán)境中以5 cm 的旋轉半徑、3000 r/min速度離心15 min。離心后將沉淀重懸于1.5 mL PBS中，取其中的0.5 mL 接種至BACTEC MGIT960 系統(tǒng)分枝桿菌培養(yǎng)管中。剩余的1 mL 凍存-70℃用于Xpert Ultra 檢測，直至獲得培養(yǎng)結果或在隨訪期結束時進行。儀器在42 d 之內自動報告MTB培養(yǎng)結果，將剩余處理后的標本凍存于-70℃冰箱，培養(yǎng)陽性者進一步行Xpert Ultra 檢測。直至獲得培養(yǎng)結果或在隨訪期結束時進行。對所有分離株進行MPT64 抗原測試，以確認結核分枝桿菌復合群的存在。

Xpert 檢測，操作步驟：①使用新鮮胸腔積液標本，嚴格按照美國Cepheid 公司提供的檢測盒使用說明操作，將1 mL 標本與2 mL 樣本處理液混合，渦旋振蕩至少10 s 后室溫孵育10 min，再次渦旋10 s 并室溫孵育5 min；②孵育后的2 mL 混合液轉移至Xpert檢測盒中并裝載至Xpert 儀器，運行自動檢測程序并報告結果。

Xpert Ultra 檢測，操作步驟：①使用在-70℃凍存的10 mL 標本，孵育操作步驟與Xpert 檢測一致。②孵育后，將2 mL 混合液轉移到Xpert Ultra 檢測盒，裝載到Xpert 儀器，自動檢測，得出檢測結果。注意：若檢測結果無效，應采用相同樣本重復上述檢驗操作。

1.3 觀察指標

①觀察三組患者兩種檢驗方式的陽性率與陰性率。②觀察計算兩種檢驗方式對確診結核性胸膜炎患者診斷的靈敏度、特異度與準確度。靈敏度=真陽性例數(shù)/（假陰性+真陽性）例數(shù)×100%；特異度=真陰性例數(shù)/（假陽性+真陰性）例數(shù)×100%；準確度=（真陽性+真陰性）例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 17.0 統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據分析，計量資料用均數(shù)±標準差（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 確診組、疑診組和非結核病組兩種檢驗方式檢驗結果的比較

在對確診組檢測時，Xpert UItra 檢測的陽性率高于Xpert 檢測，差異有統(tǒng)計學差異（P＜0.05）；在對疑診組檢測時，Xpert UItra 檢測陽性率高于Xpert 檢測，差異有統(tǒng)計學差異（P＜0.05）；在對非結核病組檢測時，Xpert UItra 檢測陽性率低于Xpert 檢測，差異有統(tǒng)計學差異（P＜0.05）（表1）。

表1 確診組、疑診組和非結核病組兩種檢驗方式檢驗結果的比較[n（%）]

2.2 兩種檢驗方式對結核性胸膜炎患者診斷靈敏度、特異度與準確度的比較

對58 例確診結核性胸膜炎和20 例非結核病患者進行診斷，Xpert UItra檢測對結核性胸膜炎的敏感度為96.50%，特異度為95.00%，準確度為96.15%，均高于Xpert 的82.76%、70.00%、79.49%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）（表2）。

表2 Xpert 與Xpert UItra 檢測結核性胸膜炎患者診斷靈敏度、特異度與準確度的比較[%（n/N）]

3 討論

結核病作為全球十大死亡原因之一，發(fā)病率、死亡率較高，嚴重危害人民健康。若在早期發(fā)現(xiàn)結核病并對癥治療，能夠降低結核病的傳染性，降低結核病患者死亡率。結核性胸膜炎作為特殊類型的肺結核，主要因胸膜被分枝桿菌直接感染或者胸膜對結核桿菌高敏感性，當分枝桿菌的代謝物進入胸膜，導致炎癥[6-8]。

在臨床上，為有效診斷是否為結核性胸膜炎，胸腔積液檢驗非常關鍵。傳統(tǒng)常見檢測方式有抗酸染色、熒光定量聚合酶鏈式反應（pdymerase chain reactien，PCR）等，但是，各類檢測方式均存在假陽性率高、等待時間長、敏感度與特異度低等缺陷，不利于結核病的篩查[9-10]。Xpert MTB/RIF 的問世，為結核病早期診斷帶來便捷、有效的篩查方式。該檢測方式由半巢式實時定量PCR 技術發(fā)展而來，是一種基因擴增技術，可通過PCR 循環(huán)閾值了解胸腔積液內結核桿菌的數(shù)量，通過半定量分析，可在2 h 內快速、準確判斷患者是否為結核性胸膜炎[11-13]。Xpert 檢測為封閉式系統(tǒng)，可全自動操作，降低了人為操作帶來的誤差與標本污染情況，具有檢測時間短暫、敏感度與特異度高等特點。Xpert UItra 為Xpert 檢測的升級版，以半定量巢式PCR 技術發(fā)展，PCR 體系升高，引進高分辨溶解曲線技術，提高了檢驗敏感性，rpoB 突變類型的區(qū)分更加準確等[14-15]。本研究結果顯示，在對確診組檢測時，Xpert UItra 檢測的陽性率為96.55%，高于Xpert的82.76%，差異有統(tǒng)計學差異（P＜0.05）；在對疑診組檢測時，Xpert UItra 檢測陽性率為66.67%，高于Xpert 的45.24%，差異有統(tǒng)計學差異（P＜0.05）；在對非結核病組檢測時，Xpert UItra 檢測陽性率為5.00%，低于Xpert 的30.00%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。Xpert UItra檢測對結核性胸膜炎的敏感度為96.50%，特異度為95.00%，準確度為96.15%，均高于Xpert 的82.76%、70.00%、79.49%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。提示Xpert UItra 檢測會提高結核性胸膜炎的特異度、敏感度和診斷準確度，診斷價值較高。

綜上所述，結核性胸膜炎作為特殊類型的肺結核，常規(guī)檢查方式浪費時間長，陽性率與敏感度較低，篩查難度相對較高。相對而言，Xpert 檢測作為新型檢測方式，準確率更高，陽性檢出率升高，自動化檢測降低了誤差。Xpert UItra 作為Xpert 檢測的升級版，研究顯示其陽性率、敏感度、特異度與準確度更高，能夠快速判斷患者是否為結核性胸膜炎，為患者的后續(xù)治療提供幫助，具有較高臨床推廣價值。