氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定韭菜中 5種農(nóng)藥前處理方法的比較

趙阿璇，李雪雪，槐歲絨，楊香娟

（咸陽(yáng)市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，陜西咸陽(yáng) 712000）

為提高農(nóng)作物產(chǎn)量，防治病蟲(chóng)害，高毒性農(nóng)藥的使用量越來(lái)越多。食品中特別是水果、蔬菜的農(nóng)藥污染通過(guò)食物鏈在人體積累，給人體健康帶來(lái)危害，但由于農(nóng)藥殘留對(duì)人體產(chǎn)生的生理變化不明顯，往往被忽視[1]。目前農(nóng)藥殘留所采用的檢測(cè)方法主要有氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法。由于韭菜基質(zhì)較為復(fù)雜，天然色素含量較高，有揮發(fā)性含硫組分，尤其冷凍后的韭菜較難通過(guò)微波加熱消除巰基，因此使用上述方法檢測(cè)農(nóng)藥殘留時(shí)，經(jīng)提取凈化后方可上機(jī)[2]。

檢測(cè)農(nóng)藥殘留常用的凈化方式有固相萃取、硫酸磺化、凝膠凈化、QuEChERS等[3-4]，本文利用固相萃取和QuEChERS兩種凈化方式對(duì)比了韭菜中腐霉利、氟蟲(chóng)腈、毒死蜱、氯氰菊酯和氯氟氰菊酯這5種農(nóng)藥的殘留量，并進(jìn)行了回收率、標(biāo)準(zhǔn)曲線、準(zhǔn)確度、精密度等特性參數(shù)實(shí)驗(yàn)，為相關(guān)工作者提供選擇。

1 材料與方法

1.1 主要儀器

氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，島津GCMS-TQ8040NCI，EI電子轟擊源；電子分析天平（梅特勒ME204）；渦旋混合器（IKA VXR B S025）；水浴恒溫振蕩器；高速離心機(jī)（湘儀）；全自動(dòng)濃縮儀（LabTech MV5）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（廣東IKA RV-10）。

1.2 試藥

農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)品：腐霉利、氟蟲(chóng)腈、毒死蜱、氯氰菊酯、氯氟氰菊酯，以上標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度均為1 000 μg/mL；環(huán)氧七氯B，濃度為100 μg/mL；試劑：氯化鈉（分析純，天津科密歐）；乙腈（色譜純，TEDIA）；乙酸乙酯（色譜純，TEDIA）；甲苯（色譜純，TEDIA）；QuEChERS凈化管：885 mg硫酸鎂、150 mgPSA、15 mgGCB；固相萃取柱：Cleanert S C18500 mg/ 6 mL，Agela；石墨碳黑-復(fù)合氨基復(fù)合柱 500 mg/500 mg/ 6 mL，Agela。

1.3 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析條件

1.3.1 色譜條件

色譜柱為Rxi-5Mil MS石英毛線管色譜柱（30 m×0.25 mm ×0.25 μm）；載氣：氦氣，純度≥99.999%，流速1.69 mL/min； 進(jìn)樣溫度為220 ℃；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣體積 1 μL；柱溫：初始溫度60 ℃，保持1 min，40 ℃/min升到120 ℃，保持0 min，5 ℃/min升到310 ℃，保持1 min。

1.3.2 質(zhì)譜條件

離子源溫度為250 ℃，接口溫度為280 ℃，溶劑延遲13 min，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）采集模式，其他質(zhì)譜條件見(jiàn) 表1。

1.4 樣品前處理、提取

在市場(chǎng)上隨機(jī)采購(gòu)10批次韭菜，將其全部切碎混勻，用四分法取樣，搗碎均質(zhì)成漿，稱取樣品量1 kg放入聚乙烯瓶中，-18 ℃下保存。準(zhǔn)確稱取10.0 g樣品，置于100 mL 離心管中，加入20 mL乙腈，高速勻漿2 min，超聲振蕩提取30 min，加入4 g氯化鈉，高速勻漿1 min，以5 000 r/min離心5 min。

1.5 凈化方法

1.5.1 QuEChERS凈化法

準(zhǔn)確吸取10 mL上清液于裝有900 mg無(wú)水硫酸鎂+150 mg PSA+15 mg GCB的15 mL塑料離心管中，渦旋混勻約 1 min，5 000 r/min離心5 min。準(zhǔn)確吸取凈化后的上清液 5 mL到10 mL比色管中，40 ℃水浴中氮吹至近干。加入20 μL的環(huán)氧七氯內(nèi)標(biāo)溶液，1 mL乙酸乙酯復(fù)溶，過(guò)0.22 μm有機(jī)微孔濾膜，用于測(cè)定。

1.5.2 SPE凈化法

將C18柱放入固定架上，加樣前先用10 mL乙腈預(yù)洗柱，下接雞心瓶，準(zhǔn)確吸取10 mL上清液，并用15 mL乙腈洗滌柱，將收集的提取液和洗滌液在40 ℃水浴中旋轉(zhuǎn)濃縮至約1 mL，備用。用5 mL乙腈-甲苯（3+1）預(yù)淋洗石墨化碳黑-氨基復(fù)合固相萃取柱，棄去流出液。加入濃縮液，雞心瓶用2 mL乙腈-甲苯（3+1）分次淋洗，重復(fù)3次，將洗滌液轉(zhuǎn)移至柱中，再用25 mL乙腈-甲苯（3+1）洗脫，收集流出液，40 ℃水浴中旋轉(zhuǎn)濃縮至近干。用正己烷定容至2 mL，加入內(nèi)標(biāo)液80 μL，混勻上機(jī)。

1.6 樣品的定性與定量分析

取經(jīng)過(guò)前處理的樣品與農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)工作液1.0 μL，在氣相色譜/質(zhì)譜條件下進(jìn)行測(cè)定，保留時(shí)間及碎片離子可以進(jìn)行定性、定量分析，用內(nèi)標(biāo)法計(jì)算樣品中的農(nóng)藥濃度。檢測(cè)時(shí)，色譜峰保留時(shí)間在±5%內(nèi)，在質(zhì)譜圖中所選擇的離子對(duì)都出現(xiàn)，離子對(duì)豐度比和相近質(zhì)量濃度標(biāo)準(zhǔn)品的離子豐度比一致，則該樣品中存在這種農(nóng)藥。為減少基質(zhì)的影響，定量時(shí)用陰性基質(zhì)樣品配制混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度與待測(cè)化合物的濃度相近，要求曲線相關(guān)系數(shù)大 于0.995。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法的線性方程

分別按照QuEChERS凈化與SPE凈化方法制備兩種不同的陰性韭菜基質(zhì)溶液，配制成質(zhì)量濃度為0.01～0.50 μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)工作液，基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液內(nèi)標(biāo)法定量。按照1.3的條件測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2，兩種凈化方法的5種農(nóng)藥在0.01～0.50 μg/mL 范圍內(nèi)與目標(biāo)物的響應(yīng)值呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均大于0.999，方法定量限均為0.01 mg/kg。

表2 5種農(nóng)藥的線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)及定量限

2.2 加標(biāo)回收率和精密度

按照QuEChERS凈化與SPE凈化對(duì)陰性韭菜樣品進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，選取高、中、低3個(gè)不同含量，6次平行測(cè)定，計(jì)算回收率、平均回收率、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD。由表3知，采用QuEChERS法前處理時(shí)，5種農(nóng)藥的平均回收率為83.0%～116.2%，RSD為0.8%～4.4%；采用SPE法前處理時(shí)，5種農(nóng)藥的平均回收率在80.0%～108.2%，RSD為0.8%～4.6%。QuEChERS和SPE回收率比較結(jié)果表明，兩種凈化方式法測(cè)定同一種農(nóng)藥同一個(gè)含量回收率存在差異，但均滿足農(nóng)藥殘留分析要求。

表3 兩種方法5種農(nóng)藥的回收率及精密度

3 結(jié)語(yǔ)

通過(guò)對(duì)兩種前處理方法的比較，發(fā)現(xiàn)兩種方法存在差異，但兩種前處理方法的定量限、回收率、精密度都滿足農(nóng)藥殘留分析要求，可應(yīng)用于實(shí)際樣品檢測(cè)。