血清miR-21、CysC及氧化應(yīng)激指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)在診斷糖尿病腎病中的應(yīng)用效果

劉 君，王立平

〔1.山東省立醫(yī)院（集團(tuán)）魯東醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東 煙臺(tái) 265500；2.山東大學(xué)齊魯醫(yī)院南山分院生物治療中心，山東 煙臺(tái) 265700〕

糖尿病是一種基礎(chǔ)代謝疾病。此病患者常會(huì)發(fā)生糖尿病腎病。糖尿病腎病患者的主要臨床表現(xiàn)為腎功能漸進(jìn)性損傷、持續(xù)性蛋白尿等。此病患者的病情可進(jìn)展為腎功能衰竭，從而可危及其生命安全。在發(fā)病初期，此病患者無顯著的臨床癥狀，對(duì)其病情進(jìn)行準(zhǔn)確診斷的難度較大[1]。胱抑素C（cystatin C，CysC）是臨床上評(píng)價(jià)腎損傷的常用指標(biāo)之一。有學(xué)者指出，糖尿病腎病的發(fā)生與氧化應(yīng)激反應(yīng)密切相關(guān)，miR-21在此病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用。在本文中，筆者主要是探究血清miR-21、CysC及氧化應(yīng)激指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)在診斷糖尿病腎病中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選擇我院2018年4月至2020年1月期間接診的148例糖尿病患者為研究對(duì)象。其納入標(biāo)準(zhǔn)是：病情符合糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)；其本人和（或）其家屬知情并同意參與本研究。其排除標(biāo)準(zhǔn)是：患有繼發(fā)性腎病；近期內(nèi)使用過腎毒性藥物；患有泌尿系統(tǒng)疾病。將其分為單純糖尿病組（A組，n=50）、輕度糖尿病腎病組（B組，n=53）和中重度糖尿病腎病組（C組，n=45）。A組患者中有男性24例、女性26例；其年齡為45～74歲，平均年齡（57.8±3.7）歲。B組患者中有男性28例、女性25例；其年齡為43～71歲，平均年齡（57.5±3.4）歲。C組患者中有男性25例、女性20例；其年齡為41～68歲，平均年齡（55.2±4.1）歲。選擇同一時(shí)期在我院接受體檢的50例健康體檢者作為對(duì)照組。對(duì)照組體檢者中有男性26例、女性24例；其年齡為42～70歲，平均年齡（56.3±3.9）歲。四組研究對(duì)象的基本資料相比，P＞0.05。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

對(duì)四組研究對(duì)象均進(jìn)行血清miR-21、CysC及氧化應(yīng)激指標(biāo)的檢測(cè)。進(jìn)行血清miR-21檢測(cè)的方法是：采集受檢者的空腹外周靜脈血3～4 mL，以每分鐘3500轉(zhuǎn)的速度對(duì)血樣進(jìn)行10 min的離心處理，然后分離出血清。采用SYBRGreenI熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)檢測(cè)血清標(biāo)本中的miR-21。進(jìn)行血清CysC檢測(cè)的方法是：使用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)受檢者血清CysC的水平。進(jìn)行血清氧化應(yīng)激反應(yīng)指標(biāo)檢測(cè)的方法是：使用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)受檢者血清晚期氧化蛋白產(chǎn)物（advanced oxidation protein products，AOPP）的水平。使用硫代巴比妥酸比色法檢測(cè)受檢者血清丙二醛（malondialdehyde，MDA）的水平。使用羥胺法檢測(cè)受檢者血清超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）的水平。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察四組研究對(duì)象血清miR-21、CysC、氧化應(yīng)激指標(biāo)（AOPP、MDA、SOD）的水平和用各項(xiàng)檢測(cè)診斷B組患者、C組患者所患糖尿病腎病的效果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 22.0對(duì)本次研究中的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)比四組研究對(duì)象血清miR-21、CysC的水平

B組患者、C組患者血清miR-21、CysC的水平均高于A組患者和對(duì)照組體檢者，P＜0.05。C組患者血清miR-21、CysC的水平均高于B組患者，P＜0.05。詳見表1。

表1 對(duì)比四組研究對(duì)象血清miR-21、CysC的水平（±s）

表1 對(duì)比四組研究對(duì)象血清miR-21、CysC的水平（±s）

注：#與對(duì)照組相比，P＜0.05；*與A組相比，P＜0.05；a與C組相比，P＜0.05。

分組 miR-21（2-△△CT） CysC（mg/L）A組（n=50） 1.24±0.08 0.74±0.19 B組（n=53） 4.08±0.87#*a 1.41±0.15#*a C組（n=45） 8.58±1.07#* 2.15±0.41#*對(duì)照組（n=50） 1.11±0.10 0.68±0.22

2.2 對(duì)比四組研究對(duì)象血清氧化應(yīng)激指標(biāo)的水平

A組患者血清AOPP、MDA的水平均高于對(duì)照組體檢者，其血清SOD的水平低于對(duì)照組體檢者，P＜0.05。B組患者血清AOPP、MDA的水平均高于A組患者，其血清SOD的水平低于A組患者，P＜0.05。C組患者血清AOPP、MDA的水平均高于B組患者，其血清SOD的水平低于B組患者，P＜0.05。詳見表2。

表2 對(duì)比四組研究對(duì)象血清氧化應(yīng)激指標(biāo)的水平（±s）

表2 對(duì)比四組研究對(duì)象血清氧化應(yīng)激指標(biāo)的水平（±s）

注：#與對(duì)照組相比，P＜0.05；*與A組相比，P＜0.05；a與C組相比，P＜0.05。

分組 AOPP（μmol/L）MDA（μmol/L） SOD（U/mL）A組（n=50） 79.87±7.88# 5.74±0.47# 128.77±12.58#B組（n=53） 96.87±10.04#*a 7.01±0.67#*a 95.78±10.87#*a C組（n=45） 156.35±12.47#* 12.25±1.49#* 78.99±7.69#*對(duì)照組（n=50）62.64±5.78 4.57±0.66 228.59±28.89

2.3 對(duì)比四組研究對(duì)象血清miR-21、CysC、氧化應(yīng)激反應(yīng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果的陽性率

B組患者、C組患者血清miR-21、CysC、氧化應(yīng)激反應(yīng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果的陽性率均高于A組患者和對(duì)照組體檢者，P＜0.05。B組患者與C組患者血清miR-21、CysC、氧化應(yīng)激反應(yīng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果的陽性率均高于90.00%，二者相比，P＞0.05。詳見表3。

表3 對(duì)比四組研究對(duì)象血清miR-21、CysC、氧化應(yīng)激反應(yīng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果的陽性率[例(%)]

3 討論

糖尿病腎病是一種發(fā)病機(jī)制復(fù)雜、發(fā)病隱匿的糖尿病并發(fā)癥。此病屬于微血管病變，發(fā)病后會(huì)損傷患者的腎小管功能和血管內(nèi)皮功能，影響其腎小球?yàn)V過率。尿白蛋白排泄率是目前臨床上診斷糖尿病腎病的常用指標(biāo)。但該指標(biāo)易受多種因素的影響，用其診斷糖尿病腎病的靈敏性較差。人體的所有細(xì)胞核內(nèi)均可以生成CysC。CysC在血液中有較高的穩(wěn)定性，其水平可反映腎小球基底膜的濾過能力。相關(guān)的臨床研究顯示，在患者發(fā)生腎功能受損后，其血清CysC的水平會(huì)出現(xiàn)明顯的變化，且損傷的程度越嚴(yán)重，其血清CysC的水平就越高[2]。本研究的結(jié)果顯示，B組患者、C組患者血清CysC的水平均高于A組患者和對(duì)照組體檢者，P＜0.05。C組患者血清CysC的水平高于B組患者，P＜0.05。miR-21屬于小分子RNA，是臨床上診斷腫瘤常用的血清標(biāo)志物。其在血清中有較高的穩(wěn)定性。有研究顯示，糖尿病腎病患者腎組織中miR-21的含量較高[3]。有學(xué)者指出，該物質(zhì)是一種腎組織的保護(hù)因子，在腎臟出現(xiàn)損傷后其水平會(huì)明顯增高。本研究的結(jié)果顯示，B組患者、C組患者血清miR-21的水平均高于A組患者和對(duì)照組體檢者，P＜0.05。C組患者血清miR-21的水平高于B組患者，P＜0.05。這表明，血清miR-21檢測(cè)在診斷糖尿病腎病中的應(yīng)用價(jià)值較高。多項(xiàng)臨床研究證實(shí)，糖尿病腎病的發(fā)生、發(fā)展與氧化應(yīng)激反應(yīng)密切相關(guān)。此病患者的抗氧化能力會(huì)隨著其病情的加重而逐漸降低[4]。本研究的結(jié)果顯示，A組患者血清AOPP、MDA的水平均高于對(duì)照組體檢者，其血清SOD的水平低于對(duì)照組體檢者，P＜0.05。B組患者血清AOPP、MDA的水平均高于A組患者，其血清SOD的水平低于A組患者，P＜0.05。C組患者血清AOPP、MDA的水平均高于B組患者，其血清SOD的水平低于B組患者，P＜0.05。

本研究的結(jié)果表明，血清miR-21、CysC及氧化應(yīng)激指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)在診斷糖尿病腎病中的應(yīng)用價(jià)值較高。此法值得在臨床上推廣應(yīng)用。