電感耦合等離子體質譜法測定吸入用七氟烷中元素雜質

陳珍珍，裴昆，程奇珍，常亮

1.江西省藥品檢驗檢測研究院，國家藥品監督管理局中成藥質量評價重點實驗室，江西省藥品與醫療器械質量工程技術研究中心，江西 南昌 330029；2.江西省藥品檢查員中心，江西省疫苗檢查中心，江西 南昌 330029

吸入用七氟烷是一種鹵代吸入性全身麻醉劑，揮發性液體，汽化后使用，屬于國家基本藥物目錄品種，主要用于成人和兒科患者的全身麻醉的誘導和維持，院內手術及門診手術均適用［1-4］。為保證藥品的安全，國家藥品監督管理局明確要求從2018年1 月起所有新藥和仿制藥需進行元素雜質的風險評估。有些元素雜質不僅會對藥品的療效、穩定性產生不好的影響［5-7］，還可能由于潛在毒性引發藥物毒副作用。由于元素雜質不能為患者提供任何治療效果，所以從藥物安全性角度考慮，有必要對吸入用七氟烷中元素雜質進行分析考察。

本研究采用有較高靈敏性和準確性的電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）法［8-13］建立測定吸入用七氟烷中釩（V）、鉻（Cr）、鈷（Co）、鎳（Ni）、銅（Cu）、砷（As）、硒（Se）、銀（Ag）、鎘（Cd）、鋇（Ba）、鉈（Tl）、鉛（Pb）12種重金屬元素含量的方法，為其質量控制和安全性評價提供參考，并將其應用于6 批次吸入用七氟烷的元素檢測。

1 材料

1.1 儀器

Synergguv millipore 超純水制水機（密理博中國有限公司），安捷倫7700 ICP-MS 電感耦合等離子體質譜儀。

1.2 試劑與對照品

硝酸，來源：fluka，批號：BCBP0680V；混合（包含釩、鉻、鈷、鎳、銅、砷、硒、銀、鎘、鋇、鉈、鉛等元素）對照標準溶液，濃度均為10 μg/mL，購自安捷倫科技有限公司；內標對照品溶液：ICP-MS內標（含Bi、Ge、In、Rh、Sc 等內標元素）溶液，濃度為100 μg/mL，購自安捷倫科技股份有限公司。

1.3 樣品信息

本次試驗樣品由3 家企業提供，共6 批次。A 企業三批（規格120 mL），批號18040431、18110431、18122231，編號Y1～Y3；B 企業兩批（規格100 mL），批號65180610、65180609，編號Y4～Y5；C 企業一批（規格250 mL），批號C038180701，編號Y6。

2 方法與結果

2.1 試驗條件

ICP-MS 儀器參數：射頻功率：1.53 KW；碰撞氣：高純氦氣；載氣：高純氬氣；載氣流量：1.05 L/min；冷卻溫度：4 ℃；等離子氣流量：15 L/min；采樣錐孔徑：1.0 mm；四級桿真空度：3.02×10-4Pa；數據采集重復次數：3 次；出口溫度：41.5 ℃；入口溫度：33.8 ℃。

測定法：測定時選取的同位素為51V、53Cr、59Co、60Ni、63Cu、75As、82Se、107Ag、111Cd、137Ba、205Tl、208Pb，其中51V、53Cr 以45Sc 作為內標，59Co、60Ni、63Cu、75As、82Se、以72Ge 作為內標，107Ag 以103Rh 作為內標，111Cd、37Ba 以115In 作為內標,205Tl、208Pb 以209Bi 作為內標。以測量值為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。在同樣的分析條件下進行空白試驗和空白校正。

2.2 溶液制備

2.2.1 混合內標溶液精密量取1 mL 內標溶液置100 mL 量瓶中，用2%硝酸稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為1 μg/mL 的混合內標溶液。

2.2.2 供試品溶液精密量取吸入用七氟烷10 mL 置塑料離心管中，80 ℃水浴上揮干，再精密加入2%硝酸溶液10 mL，超聲15 min，搖勻，即得。

2.2.3 空白溶液除不加樣品外，按“2.2.2”項下方法制備空白溶液。

2.3 線性關系

精密量取混合對照標準溶液（濃度均為10 μg/mL）適量，用2%硝酸稀釋制成各元素雜質濃度為0、1、4、8、10、20、40、60、80、100、200、400 ng/mL混合對照品溶液。取混合對照品溶液和混合內標溶液按“2.1”項下試驗條件進行測定，對照品溶液線性關系試驗結果詳見表1。

2.4 檢測限考察

取“2.2.3”項下空白溶液，連續測定11 次，計算儀器響應值的標準偏差，以測定標準偏差的3 倍為各待測元素的檢測限，見表1。

表1 線性關系與檢測限

2.5 精密度考察

取“2.3”項下濃度80 ng/mL 的混合對照品溶液，連續進樣測定6 次，記錄測定結果。結果各元 素V、Cr、Co、Ni、Cu、As、Se、Ag、Cd、Ba、Tl、Pb 測定結果的RSD 分別為1.00%、1.18%、0.71%、0.66%、1.02%、0.99%、2.69%、0.81%、0.43%、1.05%、0.40%、0.52%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.6 重復性考察

精密量取樣品6 份（編號Y1）各10 mL，置塑料離心管中，分別精密加入混合對照標準溶液（濃度均為10 μg/mL）100 μL，置80 ℃水浴上揮干，再精密加入2%硝酸溶液10 mL，超聲15 min，搖勻，作為重現性試驗溶液；進樣測定，記錄測定結果。結果樣品中各元素V、Cr、Co、Ni、Cu、As、Se、Ag、Cd、Ba、Tl、Pb 測定結果的RSD 分別為1.17%、2.54%、1.05%、0.79%、1.32%、0.77%、3.56%、2.12%、1.01%、0.99%、0.87%、0.87%（n=6），表明本方法重復性好。

2.7 加樣回收率試驗

精密量取樣品9 份（編號Y1）各10 mL，置塑料離心管中，分別精密加入混合對照標準溶液（濃度均為10 μg/mL）60、60、60、100、100、100、200、200、200 μL，置80 ℃水浴上揮干，再精密加入2%硝酸溶液10 mL，超聲15 min，搖勻，做為12種元素回收試驗溶液，進樣測定；12種元素平均回收試驗結果詳見表2。

表2 回收試驗結果（n=9）

2.8 樣品中元素雜質的測定

取6 批次市售吸入用七氟烷，按“2.2”項下方法處理，進樣測定，計算樣品元素雜質的含量，三家企業的6 批次結果見表3。

表3 樣品測定結果（ng/mL）

3 討論

本次研究對三家企業市售6 批吸入用七氟烷進行測定，參照ICH Q3D 元素雜質指南對制劑潛在元素雜質限度規定［14］，分析結果顯示各元素雜質均符合限度要求，表明本品在使用時重金屬安全風險較低。元素雜質的分類、限度及吸入用七氟烷樣品中元素雜質含量范圍詳見表4。

表4 元素雜質的分類、限度及樣品中元素雜質含量范圍

吸入用七氟烷是揮發性液體，沸點較低，若采用微波消解法作為樣品前處理容易引起爆炸。由于樣品中元素雜質含量均為微量，為提高檢測準確度和安全性，故采用水浴揮干再酸溶解的前處理方式。ICP-MS 是一種將ICP 技術和質譜結合在一起的分析儀器，具有靈敏度高、速度快、樣品量小的優點，可以同時完成幾十個元素的定量測定。本文采用ICP-MS 法測定吸入用七氟烷中12種元素雜質，經方法學評價顯示此方法干擾少，準確性好、靈敏度高，可適用于吸入用七氟烷中12種元素雜質的檢測分析。