FNA及BRAFV600E基因突變檢測甲狀腺乳頭狀癌的價值分析

廖鵬娟

（惠州市中心人民醫院 病理科，廣東 惠州 516001）

0 引言

甲狀腺乳頭狀癌（Papillary Thyroid Cancer，PTC）是臨床上較為常見的一種惡性程度較低的甲狀腺癌，以頸部無痛性腫塊為主要臨床表現，好發于兒童及40歲以下的女性，其發生發展多受激素、遺傳、環境等因素的影響[1]。該疾病具有惡性程度低、生長緩慢以及預后良好的特點，因此合理有效的診斷于患者意義重大。病理活檢為診斷該疾病的金標準，但其創傷較大故不宜作為首選。超聲引導下細針穿刺細胞學檢查（Fine-Needle Aspiration，FNA）是一種近乎無創的檢查方式，成為現階段臨床診斷該疾病的主要模式，即便如此仍會有漏診、誤診的發生[2]。BRAFV600E基因突變檢測是一類較為新穎的檢測途徑，但此檢查方式在PTC的診斷中仍需進一步進行探討[3]。本研究旨在探討FNA及BRAFV600E基因突變檢測PTC的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料。經患者及家屬同意并簽署知情同意書，選取惠州市中心人民醫院2019年10月至2020年12月200例疑似甲狀腺乳頭狀癌患者，所有患者均接受超聲引導下FNA和BRAFV600E基因突變檢測。男98例，女102例；年齡26～70歲，平均（42.36±13.71）歲；結節大小0.8～2.5 cm，平均（1.65±0.21）cm。納入標準：均可行超聲引導下FNA、BRAFV600E檢測者；初發甲狀腺結節。排除標準：合并精神類疾病，不予配合者；言語表達不清者；甲狀腺相關檢查指標異常者；資料不全，且無法確認者等。本研究已由院內醫學倫理委員會審核通過。

1.2 方法

1.2.1 超聲引導下FNA檢測：運用超聲診斷儀（PHILIPS Sparq），探頭為L5-12 MHz。穿刺前檢查是否存在穿刺禁忌證，置患者于仰臥位，充分暴露頸前區，彩色多普勒超聲掃描甲狀腺區域選定擬穿刺部位，以23 G×50 mm針尖穿刺可疑結節內，重復提插穿刺10～15次，取得樣本后并將所得樣本送病理科進行細胞學檢查。

1.2.2 BRAFV600E基因突變檢測：試劑盒（廈門艾德生物醫藥，國械注準20143401824，規格：24測試/盒）。首先將凍存于于-20℃中的標本取出，解凍并離心，將細胞標本溶入GA緩沖液，加入蛋白酶混勻，于70℃環境下靜置10 min，加入無水乙醇充分混勻，離心去除水珠，將溶液加入吸附柱，離心后加入GD緩沖液，再加入Pw漂洗液，離心倒掉廢液后加入TE緩沖液洗脫，靜置約5 min后離心收集溶液；擴增序列獲得突變信號或內控信號Ct值，判斷是否存在基因突變，Ct值＜30為突變陽性，Ct值≥30為無突變）。

1.3 觀察指標和評價標準。以手術病理結果作為診斷的金標準，分析超聲引導下FNA、BRAFV600E檢測單獨與聯合診斷對PTC的診斷價值，

1.4 統計學分析。數據錄入SPSS 22.0軟件中分析，計數資料用[n（%）]表示，采用配對χ2檢驗，計量資料用（）表示，采用配對t檢驗，P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 不同檢查方式的診斷結果。超聲引導下FNA顯示陽性和陰性分別為156和44例；BRAFV600E檢測顯示陽性和陰性分別為158和42例；兩種方式聯合檢測陽性和陰性分別為181和19例，見表1。

表1 不同檢查方式的診斷結果比較

2.2 不同檢查方式的診斷效能。超聲引導下FNA檢測和BRAFV600E基因檢測單獨檢測靈敏度、特異度、準確率均較聯合檢測低（P＜0.05），見表2。

表2 不同檢查方式的診斷效能對比[n（%）]

3 討論

PTC屬于惡性腫瘤的一種，其生長較為緩慢，且大多數預后良好，病灶可經腺內淋巴管自原發部位擴散至腺體的其他部位和頸部淋巴結，且近年來發病率呈現逐年增加的趨勢[4]。超聲引導下FNA是以往臨床上常用的檢查方式，其在診斷甲狀腺結節方面較為可靠，但仍然存在40%的誤診率，對后期治療造成不良影響[5]。

BRAFV600E突變檢測與腫瘤的不良臨床及病理表現關系密切，且BRAFV600E突變僅存在于甲狀腺惡性結節中，而良性結節中并未發現該基因的存在，同時該基因的突變可導致氨基酸結構發生變化，活化蛋白激酶信號通路，促使細胞發生異常性分化與增殖[6-7]。

以手術病理結果檢查為金標準，靈敏度、特異度、準確率可以檢測該檢查方式的診斷價值及可靠的理論依據。本研究結果顯示超聲引導下FNA顯示陽性和陰性分別為156和44例，BRAFV600E檢測顯示陽性和陰性分別為158和42例，兩種方式聯合檢測陽性和陰性分別為181和19例；超聲引導下FNA檢測和BRAFV600E基因檢測單獨檢測靈敏度、特異度、準確率均較聯合檢測低（P＜0.05），這提示FNA及BRAFV600E基因突變檢測均可檢測PTC且聯合檢測對PTC的診斷價值更高，進而可降低漏診率與誤診率，為后續的治療提供了可靠的影像學及分子學依據。分析其原因可能與FNA及BRAFV600E基因突變檢測具有操作簡便、降低手術傷害等優勢，且BRAFV600E檢測可有效鑒別甲狀腺疾病類型，同時還利用實時熒光定量PCR法擴增序列，獲得突變信號，提高了檢出的靈敏度和特異度，進而提高了準確率[8]。

綜上所述，超聲引導下FNA和BRAFV600E基因突變檢測均可檢出PTC，但聯合檢測診斷價值更高。