鵝圓環病毒研究進展

趙 敏 李家玉 何海斌 黃 瑜 萬春和,3＊

（1.福建農林大學生命科學學院 福州 350002；2.福建省農業科學院畜牧獸醫研究所/福建省畜禽疫病防治工程技術研究中心/福建省禽病防治重點實驗室 福州 350013；3.龍巖學院/預防獸醫學與生物技術福建省高校重點實驗室 福建龍巖364012）

鵝圓環病毒（Goose circovirus，GoCV）屬于圓環病毒科（Circoviridae）圓環病毒屬（Circovirus）[1]，圓環病毒科因其成員具有共價閉合環狀DNA而得名。根據國際病毒分類委員會（International Committee on Taxonomy of Viruses，ICTV）最新分類，圓環病毒科分為兩個屬（genera）：圓環病毒屬和Cyclovirus（建議命名為圓圈病毒屬，中文名尚未明確）。其中，圓環病毒屬有49個病毒種（species），Cyclovirus屬有52個病毒種。當前，研究熱點主要集中在圓環病毒屬，如豬圓環病毒1型（PCV1）[2]、豬圓環病毒2型（PCV2）[3]、鸚鵡喙羽病毒（BFDV）[4]、鵝圓環病毒（GoCV）[5]、鴿圓環病毒（PiCV）[6]、雀圓環病毒（FiCV）[1]、鷗圓環病毒（GuCV）[7]、鴨圓環病毒（DuCV）、八哥圓環病毒（StCV）、天鵝圓環病毒（SwCV）[8]、斑鳩圓環病毒[9]和鴕鳥圓環病毒[10]等。

1 流行病學特點

GoCV感染最早是由德國學者Soike在1999年德國勃蘭登南部地區一群發育遲緩的鵝中發現[5]。我國臺灣學者Chen等[11]對21個臺灣地區鵝場進行GoCV檢測，發現有16個鵝場存在GoCV感染。匈牙利學者Ball等[12]對來自76個鵝場的病死鵝血清進行GoCV檢測，陽性率高達48.1%。余旭平等[13]在浙江永康禽流感病死鵝中檢測到GoCV。英國學者Scott等[14]對28個鵝場進行血清學調查，GoCV陽性率高達88.6%。楊曉偉等[15]應用PCR方法在重慶地區也檢測到GoCV。萬春和等[16]在江西省朗德鵝中檢測到GoCV。張敏等[17]從山東濰坊朗德鵝場中毛囊出血的鵝體內檢測到GoCV。吳方達[18]在福建一例生長消瘦鵝中，檢測到GoCV。陳濟鐺等[19]對廣東232份鵝組織進行GoCV感染檢測，發現陽性率為44%。蘭世捷等[20]從齊齊哈爾52日齡白鵝體內檢測到GoCV。Niu等[21]從中國11個省采集了478個鵝組織進行鵝常見病原監測，發現H9禽流感和GoCV檢出率最高，且在春季和冬季流行更嚴重。此外，影響該病毒流行的其中一個因素就是鵝的飼養方式。郭婧[22]對圈養鵝和散養鵝開展GoCV流行病學調查發現，圈養鵝比散養鵝GoCV陽性率更高，提示不同飼養模式可能會影響GoCV傳播。大量的流行病學研究揭示，GoCV在世界多地鵝群中廣泛流行[23]。

2 基因組特征

GoCV基因組為共價閉合環狀、單股負鏈DNA。目前，基因組大小分三種，分別為：1820 nt（僅2株，GenBank登錄號AF536939和AF536938）、1821 nt和1822 nt（僅1株，GenBank登錄號KT207809）。

2.1 編碼區 GoCV基因組編碼4個大的主要開放閱讀框（ORF）：V1（nt72/73-953）、C1（nt1760/1761-1008）、V2（nt1612/1613-1725）和C2（nt426/427-127）。V1位于病毒正義鏈上，編碼復制相關蛋白（Rep）；C1位于病毒負義鏈上，編碼病毒的核衣殼蛋白（Cap）。與其它圓環病毒屬病原類似，GoCV的Rep蛋白存在很多保守基序，如FRLNN、HLQ、WWDGY、DDFYGWLP、YCSK等，其中有3個保守基序（FRLNN、HLQG和YCSK）推測與病毒的滾環復制有關。

圖1 鵝圓環基因線性結構圖

2.2 基因間區 GoCV在編碼序列V1-ORF與C1-ORF間5'端基因間區含有保守的九堿基序列（TATTATTAC），研究發現其它代表株該序列頂部的第1位和第3位堿基的保守堿基序列存在特征性差異，具有種屬特異性[24]。而5'端基因間區在莖環附近，有兩個七堿基序列（GTACTCC）正向重復，該序列可能與滾環復制有關。

2.3 遺傳進化分析 遺傳進化分析發現，GoCV可以被劃分為3個類群，即I群和II群和III群。其中，I群和II群分別包含兩個亞群：I1群（臺灣株TW1/2/3/4/5/7/10/11）、I2群 （中國浙江株xs2/3/4）、IIl群（臺灣株TW6/8/9）、II2群（中國浙江株xs5/6）；III群包含德國株、中國浙江株yk1/2/3/4及xsl[22]。

3 致病性

鵝感染GoCV后，主要表現為發育不良、羽毛凌亂、消瘦，同時伴有精神沉郁，嚴重者還會出現羽毛脫落和羽毛囊壞死現象，且這些癥狀的產生可能與感染年齡、病毒毒力和繼發感染等因素有關[25-27]。Ting等[26]在研究我國臺灣地區鵝群羽毛脫落征與GoCV之間的關系時發現，用純化后的GoCV對雛鵝進行人工感染，觀察到雛鵝出現腹瀉、生長遲緩和羽毛生長障礙，通過PCR檢測GoCV時，法氏囊、胸腺、脾腺、十二指腸和肝均呈現陽性。

病理組織學檢查結果表明，鵝感染GoCV后主要表現為法氏囊、胸腺和脾等組織的淋巴細胞減少，肝臟發生病變同時出現空泡，脾臟有間質性肺炎和出血，中央靜脈周圍大多被炎性細胞大部分浸潤，法氏囊結構遭到破壞，并觀察到嗜堿性的包涵體[28]。也有研究發現GoCV與其它病毒進行共感染，會導致高死亡率[29]。

4 診斷方法

血清學檢測是檢測鵝圓環病毒的方法之一，近年來也有很多學者對該方法進行了研究。2006年，英國學者Scott等[14]建立了熒光抗體檢測方法。2008年，余旭平等[30]通過開展不包含核定位信號序列編碼區的核衣殼蛋白基因（Cap）的融合表達研究，為建立鵝圓環病毒ELISA檢測方法奠定了重要的基礎。2013年，姜珂冉等[31]建立了鵝圓環病毒抗體間接ELISA檢測方法，該方法具有較好的特異性和重復性，有利于大面積地開展GoCV感染的流行病學普查。

關于GoCV病原學檢測見有如下報道。2001年，Todd等[32]根據V1 ORF保守序列設計簡并引物。2003年，臺灣學者Chen等[11]通過設計Cap蛋白保守區引物建立了GoCV PCR方法。Halami等[8]于2007年建立了巢氏PCR（nested PCR）方法。2012年，萬春和等[33]建立了鵝圓環病毒TaqMan實時熒光定量PCR方法。2013年，林蕾等[34]建立了GoCV競爭PCR檢測方法。2015年，曹慧慧等[35]建立了雙重PCR檢測方法，可同時檢測并區分DuCV和GoCV。此外，還建有同時檢測鵝群中GPV、GHPV和GoCV感染的三重PCR方法DNA[36]。

5 展 望

目前，研究人員在GoCV的流行病學、基因組特征、致病性和診斷技術上取得了一定的研究進展，但由于GoCV純培養技術方法尚未見報道，導致GoCV致病機理、對宿主免疫系統的影響均無法進行深入研究，極大限制了對該病的科學防控。