血清MBL、CCL11、Beclin1對潰瘍性結腸炎患者腸道菌群分布的影響

胡雪廬，湯強

潰瘍性結腸炎（UC）是臨床上十分常見的慢性腸道疾病，近年來發病率有逐漸上升的趨勢。甘聚糖結合凝集素（MBL）參與炎癥介質產生和結腸損傷過程[1]，CC修飾趨化因子11（CCL11）參與了血管生長和促炎性因子釋放過程，在多種腫瘤形成和發展中具有重要作用[2]，Beclin1蛋白可調節機體自噬活性，并可發揮抑制過度炎癥反應和介導免疫反應的作用[3]。研究認為，UC的發病與腸道菌群存在密切聯系，腸道寄生的大量細菌，影響了腸道消化能力、自體免疫力及機體抗感染等過程，在炎癥性腸道疾病中發揮重要作用[4]。因此，本研究探究UC患者血清MBL、CCL11及Beclin1蛋白水平及與腸道菌群分布和病情的關系，以期為臨床提供相關參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取寧波市北侖區人民醫院和浙江省云和縣人民醫院2015年12月至2019年12月收治的UC患者66例。納入標準：（1）存在腹瀉、糞便含有黏液、膿、血等，排便后緩解，結腸鏡檢查黏膜水腫、充血，部分可見息肉樣潰瘍；（2）符合《中國炎癥性腸病診斷治療規范的共識意見》[5]中UC的診斷標準；（3）自愿參與本研究并簽署知情同意書。排除標準：（1）肝、腎、心、肺等器官功能不全；（2）合并免疫系統疾病、凝血障礙、神經疾病者及其他感染性疾病；（3）合并惡性腫瘤。根據Raclmilewitz UC臨床活動指數評估系統（CAI評分）[6]分為活動期組（≥4分，n=28）和緩解期組（＜4分，n=38）。其中活動期組男16例，女12例；年齡35～58歲，平均（46.7±4.1）歲；緩解期組男23例，女15例；年齡32～60歲，平均（47.2±3.9）歲。另選擇同期健康志愿者60例作為對照組，其中男39例，女21例；年齡31～60歲，平均（47.3±4.2）歲。3組一般資料差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法 所有研究對象均抽取空腹靜脈血5 ml，采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測血清MBL、CCL11及Beclin1水平，試劑盒購自加拿大ELIXIR醫藥公司。采用美國Thermo Fisher Scientific公司生產的酶標儀于450 nm波長下測定吸光度，并由標準濃度曲線計算OD值。所有受試者取1～2 g新鮮糞便樣本，檢測大腸桿菌、消化球菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌及腸球菌水平。采用CAI評分、Mayo活動評分[7]及Baron分級評分[8]評估病情活動程度。

1.3 統計方法 采用SPSS 20.0統計學軟件進行數據分析，計量資料以均值±標準差表示，采用t檢驗，組間比較采用單因素方差分析；相關性分析采用Spearman檢驗。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清MBL、CCL11及Beclin1水平比較 對照組、緩解期組、活動期組MBL水平依次降低，CCL11、Beclin1水平依次升高，差異均有統計學意義（均P＜0.05）。見表1。

表1 各組血清MBL、CCL11及Beclin1水平比較

2.2 各組腸道菌群分布比較 活動期組大腸桿菌、腸球菌數量高于緩解期組和對照組，乳酸桿菌、雙歧桿菌和消化球菌數量低于緩解期組和對照組（均P＜0.05）；緩解期組乳酸桿菌、雙歧桿菌和消化球菌數量低于對照組（均P＜0.05），緩解期組與對照組大腸桿菌、腸球菌數量差異均無統計學意義（均P＞0.05）。見表2。

表2 各組腸道菌群分布比較 （×109個）

2.3 不同病情UC患者CAI、Mayo及Baron評分比較 活動期組CAI、Mayo及Baron評分均高于緩解期組（均P＜0.05），見表3。

表3 各組CAI、Mayo及Baron評分比較 分

2.4 MBL、CCL11及Beclin1與腸道菌群數量的相關性 Spearman相關性分析結果顯示，血清MBL與大腸桿菌、腸球菌數量存在負相關，與乳酸桿菌、雙歧桿菌和消化球菌數量存在正相關（均P＜0.05）；CCL11、Beclin1與大腸桿菌、腸球菌數量存在正相關性，與乳酸桿菌、雙歧桿菌和消化球菌數量存在負相關（均P＜0.05）。見表4。

表4 血清MBL、CCL11及Beclin1與腸道菌群數量的相關性分析

2.5 血清MBL、CCL11、Beclin1與病情的相關性分析 Spearman相關性分析結果顯示，血清MBL與CAI、Mayo及Baron評分存在負相關（均P＜0.05）；CCL11、Beclin1與CAI、Mayo及Baron評分存在正相關（均P＜0.05）。見表5。

表5 血清MBL、CCL11及Beclin1與病情活動的相關性分析

3 討論

目前，內鏡及結腸鏡檢查是評估UC病情的主要方式，但均具有入侵性，不適合耐受性較差的患者。因此，通過準確、快捷且無創的檢測標志物評估UC病情為臨床研究的重要內容。

本研究探討MBL、CCL11及Beclin1在UC患者中的表達，并探討與UC患者腸道菌群的相關性，結果顯示活動期UC患者中，CCL11、Beclin1水平升高明顯，MBL水平則顯著降低，且與緩解期UC患者及健康對照人群存在明顯差異。這提示檢測血清MBL、CCL11及Beclin1水平有助于UC患者的疾病診斷和病情評估。相關性分析結果顯示，血清MBL、CCL11及Beclin1水平與UC患者CAI、Mayo及Baron評分均存在顯著相關性（均P＜0.05）。因此，MBL、CCL11及Beclin1可作為UC診斷和病情評估的潛在生物學指標。

腸道菌群可反應腸道細菌狀態，分為有益菌、有害菌和中性菌，不同菌群數量存在動態平衡。菌群數量失衡將影響機體功能，并引發多種疾病。研究指出[9]，腸道炎癥疾病狀態下，腸道菌群會對腸黏膜的功能造成影響，并誘發機體免疫炎癥反應，導致UC發生。另有研究指出[10]，不同時期UC患者腸道菌群會發生改變。本研究活動期組大腸桿菌、腸球菌數量明顯高于緩解期組和對照組，乳酸桿菌、雙歧桿菌和消化球菌數量明顯低于緩解期組和對照組，這與上述研究結果相類似。雙歧桿菌、乳酸桿菌和和消化球菌為腸道有益菌，可與腸黏膜細胞密切結合，形成腸黏膜表面的生物學屏障，發揮阻止病原菌定植和入侵等作用，三者數量降低腸黏膜的防御作用隨之降低；腸球菌可釋放外毒素，加重UC患者免疫紊亂和腸道局部炎癥反應。本研究對于血清MBL、CCL11及Beclin1水平與腸道菌群數量的相關性分析結果顯示，MBL、CCL11及Beclin1分別與大腸桿菌、腸球菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌和消化球菌存在密切相關性。這提示檢測血清MBL、CCL11及Beclin1水平還有助于揭示UC患者腸道菌群紊亂情況，有助于UC患者的病情評估和病因分析。