王夢琪,朱 蔭,張 悅,施 江,林 智,,呂海鵬,
(1.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部茶樹生物學(xué)與資源利用重點(diǎn)實驗室,中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所,浙江 杭州 310008;2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院,北京 100081)
綠茶的風(fēng)味品質(zhì)宜人,深受消費(fèi)者的喜愛,是我國產(chǎn)量和銷量最大的茶類。綠茶的化學(xué)成分十分復(fù)雜,根據(jù)存在形式的差異,一般可分為揮發(fā)性成分和非揮發(fā)性成分。揮發(fā)性成分主要包括芳香類物質(zhì),這類物質(zhì)的化學(xué)性質(zhì)不同、含量微小且差異較大,綠茶內(nèi)的碳?xì)浠衔铩⒋碱悺⑼悺⑺犷悺⑷╊惖任镔|(zhì)以不同的濃度構(gòu)成了茶葉的多種香氣類型[1];非揮發(fā)性成分種類眾多,數(shù)量龐大,其中初級代謝物有蛋白質(zhì)、糖、脂質(zhì)、核酸等,次級代謝物則主要包括生物堿、黃酮、多酚等物質(zhì),這些代謝產(chǎn)物是茶葉味道和生物活性的重要貢獻(xiàn)者。
綠茶的加工工藝一般可分為攤青、殺青、揉捻和干燥等步驟。殺青工藝可鈍化酶的活性,有效保留茶鮮葉中各種化學(xué)成分,形成綠茶“清湯綠葉”的品質(zhì)特點(diǎn);此外,殺青還對綠茶香氣的形成具有非常重要的作用,在殺青過程中,鮮葉中的青草味物質(zhì)向果香、花香、清香味物質(zhì)轉(zhuǎn)變,構(gòu)成綠茶多樣的香型[2]。隨著殺青程度的增加,茶葉香氣物質(zhì)形成顯著[3],不同殺青溫度可影響揮發(fā)性化合物的組成及其相對含量從而實現(xiàn)不同香型綠茶的加工[4]。
目前科研工作者在不同香型綠茶的揮發(fā)性成分研究方面取得了重要進(jìn)展,例如查明了不同香型綠茶中揮發(fā)性成分的組成及其含量上差異[5-6],揭示了不同類型綠茶中的關(guān)鍵香氣成分[7],并建立了綠茶香型的快速鑒別方法[8]。然而,目前鮮見不同香型綠茶中非揮發(fā)性成分差異的研究報道,僅有陳玉瓊等[9]于2003年研究了同一鮮葉制成的清香型、栗香型、高火香型以及焦香型綠茶的主要風(fēng)味及品質(zhì)成分,發(fā)現(xiàn)茶葉的火功從清香、栗香、高火香到焦香而逐漸加重,其茶多酚、氨基酸、可溶性糖的含量均逐漸下降,且差異顯著。可見,目前不同香型綠茶中非揮發(fā)性成分的研究比較薄弱,限制了人們對綠茶風(fēng)味品質(zhì)的科學(xué)認(rèn)知。
超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLCMS/MS)法具有檢出限低、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),可同時用于定性和定量分析,目前在農(nóng)藥殘留檢測[10]、食品真菌毒素檢測[11]、代謝物檢測[12]等諸多領(lǐng)域均有廣泛應(yīng)用,適用于茶葉中非揮發(fā)性成分的檢測分析。“清香”和“栗香”是綠茶的2 種典型香型,也是綠茶香氣品質(zhì)優(yōu)異的重要感官評價特征。因此,本實驗擬采用UPLC-MS/MS分析技術(shù),嘗試分析比較“清香”和“栗香”2 種典型香型綠茶中的非揮發(fā)性化學(xué)成分差異,以期為后續(xù)深入剖析綠茶風(fēng)味品質(zhì)的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)提供依據(jù)。
甲醇、乙腈、乙醇(均為色譜純) 德國Merck公司;標(biāo)準(zhǔn)品(色譜純) 美國Sigma公司。
1.3.1 樣品制備與感官評價
依據(jù)GB/T 23776—2018《茶葉感官審評方法》,按3 g茶葉,150 mL水的比例對49 個實驗室自制分析茶樣進(jìn)行感官審評,基于GB/T 23776—2018的評價準(zhǔn)則(滿分100 分);審評小組成員由實驗室內(nèi)5 名具有茶葉感官審評經(jīng)驗5 年以上的人員組成。最終從中篩選出“清香”綠茶3 個樣品(QX1、QX2、QX3)、“栗香”綠茶3 個樣品(LX1、LX2、LX3)。
1.3.2 樣品前處理
樣品利用研磨儀研磨(30 Hz、1.5 min)直至粉末狀。稱取100 mg茶粉溶解于0.6 mL體積分?jǐn)?shù)70%的甲醇提取液中;溶解后的樣品放置于4 ℃冰箱過夜12 h,期間旋渦振蕩6 次;最后在4 ℃、12 000 r/min離心10 min,吸取上清液,用微孔濾膜(0.22 μm)進(jìn)行樣品過濾,而后封存于進(jìn)樣瓶中,用以進(jìn)行后續(xù)UPLC-MS/MS檢測。
1.3.3 UPLC-MS/MS分析
色譜條件:Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C18色譜柱(100.0 mm×2.1 mm,1.8 μm);流速0.35 mL/min;柱溫40 ℃;進(jìn)樣量4 μL。流動相A相為超純水(溶有體積分?jǐn)?shù)0.04%的乙酸),B相為乙腈(溶有0.04%的乙酸);流動相洗脫梯度為:0.00 min B相比例為5%,10.00 min內(nèi)B相比例線性增加到95%,并維持B相95%的比例1 min,11.00~11.10 min,B相比例降為5%,并以B相5%的比例平衡至14 min。
質(zhì)譜條件:電噴霧離子源溫度550 ℃,質(zhì)譜電壓5 500 V,簾氣壓力30 psi,碰撞誘導(dǎo)電離(collisionacticated dissociation,CAD)參數(shù)設(shè)置為高。在三重四極桿中,依據(jù)優(yōu)化的去簇電壓和碰撞能對每個離子對進(jìn)行掃描檢測。
1.3.4 質(zhì)控樣本
質(zhì)控樣本(quality control samples,QC)由樣本提取物混合制備而成,用于分析樣本在相同的處理方法的重復(fù)性。在儀器分析過程中,每3 個檢測分析樣本中插入1 個質(zhì)控樣本,以檢測分析過程的重復(fù)性。
西安電子科技大學(xué)圖書館已與一家大數(shù)據(jù)公司合作,把大數(shù)據(jù)應(yīng)用于白皮書、報表、智慧墻大屏、專題分析、熱點(diǎn)分析、資源保障分析,還將實現(xiàn)各類數(shù)據(jù)展示圖書館形象。
基于MWDB數(shù)據(jù)庫對樣品中化學(xué)成分的二級質(zhì)譜信息進(jìn)行定性分析,分析時除去同位素信號,含K+、Na+、NH4+等的重復(fù)信號。根據(jù)代謝物保留時間與峰形的信息,采用Multia Quant軟件對每個代謝物在不同樣本中檢測得到的質(zhì)譜峰進(jìn)行校正。
利用三重四極桿質(zhì)譜的多反應(yīng)監(jiān)測模式(multiple reaction monitoring,MRM)進(jìn)行化合物定量分析,獲得不同樣本的化合物質(zhì)譜分析數(shù)據(jù)后,利用Analyst 1.6.3軟件對所有物質(zhì)質(zhì)譜峰進(jìn)行峰面積積分,并對其中同一化合物在不同樣本中的質(zhì)譜出峰進(jìn)行積分校正[13]。
采用多元統(tǒng)計分析,建立數(shù)學(xué)模型對2 種不同香型綠茶樣品的代謝譜特點(diǎn)進(jìn)行歸納和總結(jié)。首先對樣本(包括質(zhì)控樣品)進(jìn)行主成分分析(principal component analysis,PCA),以便初步了解各組樣本之間的總體代謝差異和組內(nèi)樣本之間的變異度大小。而后,采用具有監(jiān)督模式識別的多元統(tǒng)計分析方法——偏最小二乘判別分析(partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA),提取相關(guān)性較小變量的主要信息;通過正交偏最小二乘判別分析(orthogonal partial least squaresdiscriminant analysis,OPLS-DA)除去不相關(guān)的差異以篩選差異變量。評價模型的預(yù)測參數(shù)有R2X、R2Y和Q2,其中R2X和R2Y分別表示所建模型對X和Y矩陣的解釋率,Q2表示模型的預(yù)測能力,這3 個指標(biāo)越接近1表示模型越穩(wěn)定可靠,Q2大于0.5表示有效模型,Q2大于0.9表示出色模型。基于OPLS-DA結(jié)果,從獲得的多變量分析OPLS-DA模型的變量重要投影(variable importance in projection,VIP),可以初步篩選出不同樣品間差異顯著的化合物。結(jié)合單變量分析的假設(shè)值(probability,P-value)或者差異倍數(shù)值進(jìn)一步篩選出差異化合物。最終選取VIP大于1,差異倍數(shù)值大于等于2或差異倍數(shù)值小于等于0.5的代謝物為差異化合物。
采用多元統(tǒng)計分析,對“清香”和“栗香”2 種不同香型綠茶中的非揮發(fā)性化學(xué)成分進(jìn)行差異分析,PCA得分圖如圖1所示,每個點(diǎn)代表1 個獨(dú)立的樣品,2 個主成分的累計貢獻(xiàn)率達(dá)到81.69%,2 組樣品之間的分離趨勢明顯,表明2 組樣品之間存在明顯差異。PCA模型的可解釋變量R2(R2X=0.774、R2Y=1.000)及可預(yù)測度Q2(Q2=0.992)均較高,說明該模型能夠較好地解釋和預(yù)測2 組樣本之間的差異,該模型可較好地反映“清香”及“栗香”香型綠茶樣品之間非揮發(fā)性化學(xué)成分的不同。

圖1 “清香”及“栗香”綠茶樣本的PCA得分圖Fig.1 PCA score plot for green tea samples with different aromas
2.2.1 非揮發(fā)性成分分析
采用UPLC-MS/MS分析技術(shù),從“清香”及“栗香”綠茶中共檢測得到化學(xué)成分543 個,其中含量存在差異的化學(xué)成分有173 種,其相對含量以峰面積表示,結(jié)果如表1所示。根據(jù)化合物結(jié)構(gòu)的差異,上述173 種差異化學(xué)成分可分為黃酮類75 個、酚酸類22 個、萜類1 個、脂質(zhì)31 個、氨基酸及其衍生物類9 個、生物堿4 個、核苷酸及其衍生物9 個、有機(jī)酸5 個、木脂素和香豆素5 個、鞣質(zhì)1 個以及其他類11 個共11 類物質(zhì)。

表1 清香及栗香綠茶中差異化合物分析結(jié)果Table 1 Analysis of differential components between green tea samples with different aromas

續(xù)表1

續(xù)表1

續(xù)表1
如圖2所示,脂質(zhì)化合物、酚酸類化合物在“栗香”綠茶中的含量較“清香”綠茶高,脂質(zhì)也是2 種香型綠茶中化合物數(shù)量較多的一類物質(zhì),根據(jù)結(jié)構(gòu)差異,茶葉中的脂質(zhì)又可細(xì)分為以下幾類:甘油酯、游離脂肪酸、磷脂酰膽堿、溶血磷脂酰膽堿、溶血磷脂酰乙醇胺等;γ-亞麻酸、棕櫚油酸是在“栗香”及“清香”綠茶中含量均較高的脂肪酸類物質(zhì),其與茶葉香氣的形成密切相關(guān)。3-O-對香豆酰奎寧酸則是在“栗香”及“清香”綠茶中含量均較高的酚酸類差異化合物;此外,黃酮類物質(zhì)在“清香”及“栗香”綠茶中所占比重也較大,銀椴苷是“栗香”綠茶中具有最高相對含量的黃酮類化合物,該物質(zhì)具有抑制人胰腺癌細(xì)胞增殖的作用效果[14];而山柰酚-3-吡喃阿拉伯糖苷則是“清香”綠茶中具有最高相對含量的黃酮類化合物。除黃酮類物質(zhì)外,N,N-二甲基甘氨酸則是上述2 種香型綠茶中含量最高的氨基酸及其衍生物類差異化合物。

圖2 “清香”及“栗香”綠茶的聚類熱圖Fig.2 Heatmap analysis of differential components between green tea samples with different aromas
通過結(jié)合2 種不同香型綠茶的分組情況及定量信息,對檢測得到的化合物差異倍數(shù)變化進(jìn)行進(jìn)一步比較。其中,有63 個差異化合物于“栗香”綠茶的含量高于“清香”綠茶的對應(yīng)值,而“栗香”綠茶含量高于“清香”綠茶的差異化合物則多達(dá)110 個,差異倍數(shù)排名前20 位的化合物如圖3所示。“清香”綠茶中含量明顯高于“栗香”綠茶的差異化合物主要是部分黃酮類及酚酸類化合物,包括矢車菊素-半乳糖苷、木犀草苷、芹菜素-6-C-葡萄糖-8-木糖、丁香亭、阿福豆苷、異野漆樹苷、牡荊素-2-O-鼠李糖苷、槲皮素-葡萄糖-鼠李糖-鼠李糖苷、芹菜素-6-C-2-葡萄糖醛酸基木糖苷以及綠原酸甲酯,其中矢車菊素-半乳糖苷在2 種香型綠茶中含量差異倍數(shù)最大,其對應(yīng)值為17.37;而“栗香”綠茶中含量明顯高于“清香”綠茶的化合物主要包括松柏苷、香豆酸、山梨酸、12,13-環(huán)氧十八碳二烯酸、芥子酸甲酯、p-香豆醇、芍藥花青素、山柰酚-鼠李糖-半乳糖-鼠李糖、6,7,8-三羥基-5-甲氧基黃酮、DL-泛酰醇等酚酸、脂質(zhì)以及黃酮類物質(zhì),其中松柏苷在2 種香型綠茶中的含量差異倍數(shù)最大,其對應(yīng)值為16.37。盡管火功由清香、栗香、高火香到焦香逐漸加重,茶葉中茶多酚(主要是兒茶素)等成分的含量均逐漸下降[9],但本實驗發(fā)現(xiàn),“栗香”綠茶中的大部分單一黃酮成分(主要是黃酮的糖苷成分)的含量往往比“清香”綠茶高。

圖3 “清香”及“栗香”樣品差異倍數(shù)排名前20 位物質(zhì)的柱形圖Fig.3 Histogram of top 20 differential components between green tea samples with different aromas
利用KEGG數(shù)據(jù)庫對檢測得到的差異化合物進(jìn)行通路的富集分析結(jié)果如圖4所示,“清香”及“栗香”綠茶樣品中共有117 種差異化合物可被注釋到相關(guān)的代謝通路上,主要在淀粉和蔗糖代謝、花青素生物合成、黃酮和黃酮醇的生物合成、精氨酸和脯氨酸代謝、咖啡因代謝等通路上顯著富集。

圖4 “清香”及“栗香”綠茶中差異代謝物KEGG富集圖Fig.4 KEGG enrichment map of differential components between green tea samples with different aromas
2.2.2 “栗香”及“清香”綠茶中可能與香氣品質(zhì)形成有關(guān)的非揮發(fā)性化合物
香氣對茶葉風(fēng)味、品質(zhì)等級評定以及消費(fèi)者感官評價都具有重要影響。一般認(rèn)為,茶葉香氣的形成主要可以概括為以下4 個主要途徑:1)以類胡蘿卜素類物質(zhì)為前體物質(zhì),通過酶促氧化及非酶促氧化途徑降解生成β-紫羅蘭酮、β-大馬酮、橙花叔醇、α-法尼烯以及香葉基丙酮等;2)以脂肪酸為前體物質(zhì),氧化生成醇、酮、醛類化合物;3)以糖苷類為前體物質(zhì),通過加工過程中的水解作用釋放萜品醇、芳香醇等;4)茶葉加工過程中美拉德反應(yīng)生成吡喃、吡咯類雜環(huán)化合物[15]。香氣前體物質(zhì)不同、作用途徑不同,反應(yīng)所生成的茶葉中揮發(fā)性化合物香氣類型也各不相同,可見茶葉香氣類型的差異,與茶葉中香氣前體物質(zhì)的組成、含量及比例密切相關(guān)。
“栗香”及“清香”綠茶中差異化合物的分析結(jié)果如圖5所示,發(fā)現(xiàn)了部分可能參與“栗香”及“清香”綠茶香氣成分形成的化合物或香氣前體物,例如α-亞麻酸、棕櫚油酸、香蘭素、隱綠原酸、山柰酚-3-O-蕓香糖苷、L-蛋氨酸以及γ-氨基丁酸等。實驗表明,“清香”綠茶中隱綠原酸以及L-蛋氨酸含量較“栗香”綠茶高。隱綠原酸又可被稱為4-O-咖啡酰奎寧酸,該物質(zhì)是綠原酸在異構(gòu)化反應(yīng)條件生成的[16];隱綠原酸屬于酚酸類物質(zhì),是植物體中很關(guān)鍵的次生代謝產(chǎn)物,該物質(zhì)曾作為烤煙煙葉中的糖苷類香氣前體物質(zhì)被發(fā)現(xiàn)[17]。作為隱綠原酸的同分異構(gòu)體,綠原酸帶有清香風(fēng)味,可氧化生成吡咯、吡嗪等揮發(fā)性香氣成分[18],因此,推測茶葉中的隱綠原酸可能參與茶葉中揮發(fā)性香氣成分的合成。L-蛋氨酸則在茶葉加工過程中通過Strecker降解反應(yīng)形成了甲硫基丙醛,進(jìn)而形成其他常見的含硫化合物[15],如甲硫醇、二甲基硫醚、二甲基三硫醚、二甲基亞砜等物質(zhì)。

圖5 “清香”及“栗香”綠茶中香氣前體物質(zhì)差異組分層次聚類分析熱圖Fig.5 Hierarchical clustering heat map of differential aroma precursors between green tea samples with different aromas
與“清香”綠茶相比,“栗香”綠茶樣品中的α-亞麻酸、香蘭素、γ-氨基丁酸、棕櫚油酸以及山柰酚-3-O-蕓香糖苷含量較高。其中,α-亞麻酸及棕櫚油酸為不飽和脂肪酸,脂肪酸類物質(zhì)本身具有一定的香氣特征,同時可通過氧化降解生成其他香氣物質(zhì),因此其對茶葉呈香也具有重要貢獻(xiàn)作用,是某些茶葉呈香成分的重要前體物質(zhì)[19-21]。在茶葉中,這2 種物質(zhì)主要通過脂肪酸氧化途徑生成6~10 個碳的醛、酮、醇類揮發(fā)性化合物,六碳化合物如:(E)-2-己烯醛、(E)-2-己烯醇、(Z)-3-己烯醇等物質(zhì)均表現(xiàn)出“青氣”氣味特征,但由于這類物質(zhì)具有沸點(diǎn)低、易揮發(fā)的特性,導(dǎo)致其在“栗香”綠茶加工的高溫干燥過程中大量揮發(fā)。實驗表明,“栗香”綠茶中脂肪族類關(guān)鍵呈香成分有3-甲基丁醛、(E)-3-戊烯-2-酮、辛醛、(E)-2-辛烯醛、(E,E)-3,5-辛二烯-2-酮、壬醛、(E)-2-壬烯醛、癸醛、橙花叔醇共9 種物質(zhì)[22];而“清香”綠茶中脂肪族關(guān)鍵呈香成分僅有2-甲基丁醛、庚醛、1-辛烯-3-醇、(E,E)-2,4-庚二烯醛、(E,E)-3,5-辛二烯-2-酮及壬醛共6 種物質(zhì)[23]。可見,“清香”及“栗香”綠茶中不飽和脂肪酸含量的差異,可能導(dǎo)致了其脂肪族類關(guān)鍵呈香成分在種類及含量上的不同。
“栗香”綠茶中含量較高的差異化合物還包括香蘭素,又被稱為香草醛,該物質(zhì)為酚酸類化合物。香蘭素具有香草豆的特殊香氣,在茶葉中主要參與黃酮及黃酮醇的生物合成過程,曾在西湖龍井茶中被檢測到[24]。此外,“栗香”綠茶中γ-氨基丁酸也被檢測到具有較高含量,該物質(zhì)又可被稱為氨酪酸,作為一種非蛋白質(zhì)天然氨基酸,γ-氨基丁酸具有降血壓、助眠、改善焦慮、抗癲癇等多種生理作用[25-27]。三羧酸循環(huán)是植物體內(nèi)γ-氨基丁酸合成與代謝的主要步驟,即α-酮戊二酸經(jīng)谷氨酸、γ-氨基丁酸、琥珀酸半醛作用生成琥珀酸[28]。茶葉中γ-氨基丁酸一般由L-谷氨酸在谷氨酸脫羧酶作用時脫羧基形成[29],γ-氨基丁酸具有特殊的、類似肉類的氣味特征[30]。諸多研究表明,γ-氨基丁酸含量較高的綠茶在風(fēng)味上與普通綠茶存在較大差異。例如,曾貞等[31]發(fā)現(xiàn)γ-氨基丁酸綠茶風(fēng)味為紅棗香,同時帶有酸悶氣味,富含γ-氨基丁酸的綠茶中2,6-二叔丁基對甲基苯酚、十四酸甲酯、月桂酸甲酯、棕櫚酸甲酯的含量高于普通綠茶;江平[32]同樣認(rèn)為γ-氨基丁酸綠茶的特征風(fēng)味與脂肪酸酯密切相關(guān)。因此,γ-氨基丁酸的存在可能促進(jìn)了“栗香”綠茶中脂肪酸酯含量的上升,在一定程度上助力了綠茶“栗香”品質(zhì)的形成,然而γ-氨基丁酸作用于脂肪酸酯類化合物的途徑尚不明確。此外,“栗香”綠茶中山柰酚-3-O-蕓香糖苷的含量也高于“清香”綠茶,山柰酚-3-O-蕓香糖苷屬黃酮醇類化合物,是已報道的烤煙煙葉中的糖苷類香氣前體物質(zhì),可在煙草陳化燃燒過程中釋放香氣物質(zhì)[17],然而目前鮮見山柰酚-3-O-蕓香糖苷作用于茶葉香氣形成的相關(guān)研究,因此推測“栗香”綠茶加工過程中的烘烤干燥可能有利于山柰酚-3-O-蕓香糖苷的轉(zhuǎn)化。此外,綠茶中較為常見的糖苷類香氣前體物質(zhì),如櫻草糖苷、葡萄糖苷類、巢菜糖苷類物質(zhì),本實驗中未能全部檢測到,其主要原因可能與檢測方法有關(guān),茶葉中的糖苷類香氣前體物質(zhì)含量低,且存在紫外吸收光譜中沒有明顯峰的缺點(diǎn),單純依靠液相色譜技術(shù)難以實現(xiàn)較為全面的檢測,因此本實驗未對該類成分進(jìn)行富集分析。
本實驗考察“清香”及“栗香”綠茶中的非揮發(fā)性化學(xué)成分的差異情況,共檢測得到543 種非揮發(fā)性化合物,其中含量差異化合物有173 種;矢車菊素-半乳糖苷以及松柏苷在“栗香”和“清香”2 種香型綠茶中的含量差異最大;黃酮類化合物中,銀椴苷在“栗香”綠茶中具有最高的相對含量,而山柰酚-3-吡喃阿拉伯糖苷則在“清香”綠茶中具有最高的相對含量。多元統(tǒng)計分析表明,“清香”及“栗香”綠茶樣品可被顯著區(qū)分。
實驗發(fā)現(xiàn)了α-亞麻酸、棕櫚油酸、香蘭素、隱綠原酸、山柰酚-3-O-蕓香糖苷、L-蛋氨酸以及γ-氨基丁酸共7 種對茶葉香氣品質(zhì)形成有重要影響的非揮發(fā)性化合物;其中“栗香”綠茶中α-亞麻酸、棕櫚油酸、香蘭素、γ-氨基丁酸以及山柰酚-3-O-蕓香糖苷的相對含量高于“清香”綠茶,可能提高了“栗香”綠茶中脂肪族醇、醛、酮、脂肪酸酯等化合物的含量,從而貢獻(xiàn)了綠茶的栗香品質(zhì);而“清香”綠茶中隱綠原酸、L-蛋氨酸的相對含量則高于“栗香”綠茶,這2 種物質(zhì)分別與綠原酸、甲硫基丙醛密切相關(guān),隱綠原酸、L-蛋氨酸可能促進(jìn)了“清香”綠茶中吡咯類及含硫類揮發(fā)性成分的生成。本實驗可為后續(xù)深入研究綠茶香氣品質(zhì)化學(xué)提供參考。