基于HPLC測定的苯磺酸氨氯地平片雜質測定研究

王贊朋

（亞寶藥業集團股份有限公司，山西 運城044602）

苯磺酸氨氯地平片作為一種治療心臟疾病的藥物，主要能夠起到降血壓的治療效果，尤其針對慢性心絞痛具有顯著的治療成效[1]。近年來，苯磺酸氨氯地平片在市場上越來越受到心臟疾病患者的認可。考慮到苯磺酸氨氯地平片在制作過程中會存在一些雜質，為保證苯磺酸氨氯地平片的藥品質量，必須對其進行精準測定并降解，進一步提高苯磺酸氨氯地平片藥品純度。基于此，苯磺酸氨氯地平片雜質測定方法應勢而生[2,3]。在我國，以往針對苯磺酸氨氯地平片雜質測定方面的相關研究中，主要采用近紅外光譜模型，測定苯磺酸氨氯地平片雜質，但傳統測定方法由于對苯磺酸氨氯地平片雜質色譜的分析精度低，導致測定結果與實際相比存在較大殘差。由此可見，傳統測定方法存在顯著不足有待解決，HPLC測定又稱高效液相色譜測定，主要應用原理為通過分析色譜的高效液相，將物質中的成分分離，有針對性的加以檢測，進而保證其測定精度。因此，有理由將HPLC測定應用在苯磺酸氨氯地平片雜質測定中，本文基于HPLC測定設計苯磺酸氨氯地平片雜質測定方法，致力于最大限度上提高苯磺酸氨氯地平片雜質測定的高效液相色譜分析精度，進而降低其測定殘差。

1 HPLC測定

HPLC測定在本質上屬于色譜法的其中一種，主要針對液體，以流動相的方式，分離液體中的各成分，進而對不同成分進行有針對性的測定[4]。HPLC測定以其獨特的優勢受到了市場多方行業的重點關注，結合以往研究表明，該項測定技術具有極高的適用性，能夠適用于70%以上的有機化合物中。區別于傳統的測定技術，HPLC測定技術因為具有靈敏度較高的特點，在液態色譜檢測技術中占有重要地位，是藥品雜質測定的理想手段之一。HPLC測定技術對于常規的親水性分子檢測的識別程度高，并且檢測周期短，在確保測定精度的同時，最大限度上提高雜質測定效率，以此HPLC測定在市場中的應用較為廣泛，常被人們美譽為高精度、高效率檢測技術。本文基于HPLC測定設計的苯磺酸氨氯地平片雜質測定方法。

2 基于HPLC測定的苯磺酸氨氯地平片雜質測定方法

2.1 基于HPLC檢測苯磺酸氨氯地平片雜質酸堿性

在苯磺酸氨氯地平片雜質測定過程中，本文基于HPLC檢測苯磺酸氨氯地平片雜質酸堿性。

首先，將苯磺酸氨氯地平片制成粉狀，加入流動相，使其能夠滿足HPLC測定需求；然后，選用一臺高效液相色譜儀，將上述制成溶液倒入高效液相色譜儀，為了更好分析高效液相色譜，根據分離的陰陽離子，檢測苯磺酸氨氯地平片中所含雜質的酸堿性方法。第一步，用純凈的蒸餾水將苯磺酸氨氯地平片試劑樣本稀釋至5%濃度，使用醫用pH值檢測試紙，檢測酸堿度，作為初期值。同時記錄稀釋溶液中金屬元素雜質的酸堿度[5]。第二步，選取丁甲酸、酒石酸、檸檬酸、乳酸等水質常見酸，控制酸基中空基，建立新的離子團，使用樣本填充離子團空隙，使其與帶酸離子融合，形成強陽性酸基，增強分離基的選擇性，起基與堿性離子上的結合，形成組合氫鍵，生成氣相色譜。劃分試劑中多種親水性有機酸的定期分析條件，找到與檢測酸性匹配的堿性離子，進而確定試劑中酸性離子的游離形式，判斷是否為腐蝕性酸性物質，多次檢測水質獲取結果平均值，將所得平均值與可溶水酸對比，直至得到與之匹配的結果，得出試劑中含金屬元素的酸堿性。

2.2 劃分苯磺酸氨氯地平片雜質高效液相色譜條件

在得出苯磺酸氨氯地平片雜質酸堿性檢測結果的基礎上，基于HPLC檢測劃分苯磺酸氨氯地平片雜質高效液相色譜條件[6]。通過分離試劑樣本中小分子竣酸，利用苯磺酸氨氯地平片中含雜質離子的排斥特性，改變試劑中常見的無機離子等價特性，包括：F-、cl-、OH-2、PS-4等，濃縮試劑溶液，并過濾掉多余的等價元素，避免影響高效液相色譜分析結果，判定陰離子在試劑中的最高濃度。使用相等濃度的淋洗裝置對樣本加熱7min，按照元素梯度分離法，抑制陽離子與陰離子的交換。基于乳酸可取代陰陽離子中的空基原理，選擇高效液相色譜代替傳統檢測中使用的其它化學物質，分離有機酸與無機酸，簡化傳統的檢測過程。使用低濃度鹽酸與DAP作為樣本清洗液，分離試劑中的雜質。疏水性離子與鹽酸反應，通過等濃度淋洗樣本，選擇一次進樣分析方法，引入陽離子分離柱，被析出的陰離子以團狀物形態依附在分離柱之上，其離子價呈現由高至低排列順序，待靜置12～15min后即可實現分離水質中的陰、陽離子的目的。

2.3 完成苯磺酸氨氯地平片雜質測定

在劃分苯磺酸氨氯地平片雜質高效液相色譜條件的步驟中，雖然苯磺酸氨氯地平片中大部分雜質陽離子已經處于完全分離的狀態下，但是仍有極少部分的陽離子滯留于試劑中，會引發檢測誤差，影響分析結果的準確性。為進一步降低檢測誤差，基于HPLC測定避免試劑中陽離子相互作用，采用酸性較弱的淋洗液深度清洗試液，保證試劑中所有雜質陽離子均處于完全分離狀態的條件下，分析試劑中所有雜質陽離子；最后，運用高效液相色譜柱確定高效液相色譜條件。以此，實現基于HPLC測定的苯磺酸氨氯地平片雜質測定。

3 實驗測定及分析

3.1 實驗準備

設計實驗分析，本次實驗選取一粒苯磺酸氨氯地平片作為實驗樣品，通過化學成分分析可知，苯磺酸氨氯地平片中含有雜質A，針對苯磺酸氨氯地平片進行雜質測定的試驗研究。實驗目的為證明HPLC測定方法在苯磺酸氨氯地平片雜質測定中的準確性。實驗所使用的檢測環境與測試儀器清單詳見表1。

表1 設計試驗儀器工作條件

結合表1所示：本次實驗測定苯磺酸氨氯地平片雜質含量時，設定X光管電壓為80kV、電流為80mA，晶體選用LiF150，準直器為200μm。首先使用本文基于HPLC測定設計方法，測定苯磺酸氨氯地平片雜質含量，通過黑盒工具-QAcenter測得測定殘差，記為實驗組；再使用傳統方法，測定苯磺酸氨氯地平片雜質含量，同樣通過黑盒工具-QAcenter測得測定殘差，記為對照組。實驗主要內容為測試兩種方法的測定殘差，測定殘差越低證明測定精度越高。使用QAcenter軟件測定殘差數據。實驗在同等條件下進行8次，以消除誤差的影響。

3.2 實驗結果分析與結論

在同樣環境下反復進行8次實驗，記錄每一次實驗數據（見表2）。

表2 測定殘差實驗結果記錄表

分析表2數據，發現設計的基于HPLC測定方法檢測所的殘差值明顯低于傳統方法的對照組，準確度更高，更適合于用于苯磺酸氨氯地平片雜質測定。

4 結束語

HPLC測定方法通過理化結合的方式，通過離子特定光譜檢查苯磺酸氨氯地平片藥劑中雜質含量，方法更為簡便，測定更為快捷，可以更為高效的完成藥劑雜質測定工作。通過實驗對比測試的方式，也證明了這一點。研究工作也存在不足之處，還需要在測定的準確性方面深入探討，優化試劑配比，固化檢驗步驟，真正將HPLC測定方法應用于實際之中。