銀、銅離子對臨床常見致病細菌的抑菌性能研究

黃曉燕 丘早瑜 陳麗丹 李林海

世界衛生組織(WHO)頒布的《院內感染防治實用手冊》數據顯示60% 的細菌感染與使用醫療器械有關［1］,包括手術器材及植入材料。銀、銅具有抗菌作用早有報道,在醫用耗材中加入具有強烈抗菌功能的銀、銅金屬納米單質或離子均可達抗菌目的［2,3］,但其具體作用及機制尚在探索階段,無統一標準。本實驗通過研究Ag+、Cu2+對臨床常見致病細菌［大腸埃希菌(escherichia coli,CRE)、肺炎克雷伯菌(carbapenemresistant klebsiella pneumoniae,CRKP)、銅綠假單胞菌(pseudomonas aeruginosa,PAE)、金黃色葡萄球菌(staphylococcus aureus,MASA)及糞腸球菌(enterococcus faecails,EFA)］的抗菌性能,為臨床使用和研發新型抗菌材料提供參考依據。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1Ag+、Cu2+溶液的配制 利用滅菌去離子水配制濃度均為 0.1 M 的硝酸銀(AgNO3)和氯化銅(CuCl2·2H2O)水溶液,用0.22 m 的濾菌器過濾后裝在無菌容器備用,其中硝酸銀的配制及保存需要避光操作。

1.1.2菌株

1.1.2.1臨床菌株 隨機選取本院檢驗科微生物室分離的來源于傷口分泌物及組織的多重耐藥菌株飾物CRE、CRKP、PAE、MARA、EFA,所有菌株均采用法國梅里埃VITEK MS 全自動快速微生物質譜檢測儀進行鑒定,菌株保存于-80℃冰箱。

1.1.2.2標準 菌株 CRE(ATCC25922)、CRKP(ATCC700603)、PAE(ATCC27853)、MARA(ATCC25923)、EFA(ATCC29212)干粉均購自廣東臨床檢驗中心,溶解后轉種血平板備用。

1.1.2.3菌株貯存 將上述臨床菌株及標準菌株接種至血平板,35℃ CO2溫箱培養24 h 備用。

1.1.3陽離子調節肉湯(CAMHB) 的配制 稱取CAMHB 肉湯干粉22.0 g,加熱溶解于1000 ml 去離子水中,121℃高壓滅菌20 min 備用。

1.1.4無菌去離子水 取去離子水121℃高壓滅菌20 min 后備用。

1.2方法

1.2.1菌懸液的制備［4］取上述所有菌株的24 h 新鮮培養物接種至CAMHB 肉湯,35℃ CO2溫箱恒溫增菌6 h 后,用比濁儀配制成0.5 麥氏單位的菌懸液(相當于108cfu/ml),再用無菌去離子水梯度稀釋為100 倍,使之成為106cfu/ml 的菌懸液,備用?！?br>