血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子檢測(cè)對(duì)胃癌診斷的價(jià)值分析

周宇寧，潘 燕（通訊作者）

（南通大學(xué)第四附屬醫(yī)院<鹽城市第一人民醫(yī)院>病理科 江蘇 鹽城 224000）

胃癌屬于惡性腫瘤，具有較高的發(fā)病率與病死率，嚴(yán)重威脅了人們身體健康與生命安全。而胃癌發(fā)病機(jī)制相對(duì)復(fù)雜，與癌基因表達(dá)失調(diào)等存在密切關(guān)聯(lián)。伴隨現(xiàn)代醫(yī)學(xué)科技水平的提高，胃癌臨床研究也進(jìn)入全新階段，特別是診治與預(yù)后判斷等方面，進(jìn)展顯著。而血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子為糖基化分泌性多肽因子，加快形成腫瘤微血管速度，且實(shí)體瘤生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移等也會(huì)加快[1]。臨床中對(duì)惡性腫瘤與預(yù)后判斷的主要指標(biāo)就是形成的腫瘤血管。由此可見(jiàn)，對(duì)胃癌診斷與病理檢查中應(yīng)用分子腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的價(jià)值展開(kāi)深入研究與分析十分有必要。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2017 年7 月—2020 年4 月收治的胃癌患者、良性病變患者各96 例，將其胃黏膜組織作為統(tǒng)計(jì)對(duì)象，分別命名為實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組。對(duì)照組患者男62 例，女34 例，年齡43 ～72 歲，平均年齡（57.53±1.54）歲；實(shí)驗(yàn)組患者男68 例，女28 例，年齡45 ～72 歲，平均年齡（58.55±1.49）歲。患者充分知曉且同意參與此研究，兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

針對(duì)全部患者檢測(cè)分子腫瘤標(biāo)志物期間，需遵循常規(guī)方式對(duì)胃癌組織標(biāo)本進(jìn)行提取，并使用采集胃癌組織標(biāo)本創(chuàng)建石蠟切片，經(jīng)脫蠟水處理與抗原修復(fù)后，封閉處理胃黏膜組織特異性位點(diǎn)，將血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子一抗滴入到胃黏膜組織當(dāng)中，并在4℃條件下放置樣本并過(guò)夜，并在室溫條件沖洗，將生物素標(biāo)記二抗滴入其中，在37℃條件下孵育35 min，并在室溫下沖洗。隨后進(jìn)行二氨基聯(lián)苯顯色處理，經(jīng)5 min 反應(yīng)后借助蘇木素染色處理，經(jīng)5 min 后沖洗，通過(guò)對(duì)鹽酸酒精使用分化處理樣本3 s，沖洗過(guò)后使用溫水浸泡并反藍(lán)30 min，分別選擇濃度為75%、85%、95%與100%乙醇溶液沖洗脫水處理，在二甲苯溶液中浸泡5 min，創(chuàng)建中性樹(shù)膠封片[2]。若細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)部存在棕黃色或是棕褐色顆粒，即可診斷成陽(yáng)性細(xì)胞。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）對(duì)比分析兩組血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽(yáng)性表達(dá)率。

（2）對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和胃癌臨床分期、分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移關(guān)系進(jìn)行評(píng)估。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 23.0 軟件進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料以率[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（± s）表示，應(yīng)用t檢驗(yàn)。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組患者VEGF 陽(yáng)性表達(dá)率對(duì)比

實(shí)驗(yàn)組患者的VEGF 陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組患者VEGF 陽(yáng)性表達(dá)率對(duì)比

2.2 高分化、中分化胃癌與低分化、黏液腺癌VEGF陽(yáng)性表達(dá)對(duì)比

高分化、中分化胃癌患者VEGF 陽(yáng)性率低于低分化、黏液腺癌的VEGF 陽(yáng)性率，差異顯著（P ＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 不同分化程度血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽(yáng)性率對(duì)比[n（%）]

2.3 Ⅰ～Ⅱ期胃癌患者和Ⅲ～Ⅳ期患者VEGF 陽(yáng)性表達(dá)對(duì)比

Ⅰ～Ⅱ期胃癌患者的VEGF 陽(yáng)性表達(dá)水平低于Ⅲ～Ⅳ期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 不同分期胃癌患者血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽(yáng)性率對(duì)比[n（%）]

2.4 胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與未轉(zhuǎn)移患者VEFG 陽(yáng)性率對(duì)比

胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者VEFG 陽(yáng)性率高于未轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表4。

表4 轉(zhuǎn)移與未轉(zhuǎn)移胃癌患者血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽(yáng)性率對(duì)比[n（%）]

3.討論

3.1 常見(jiàn)胃癌分子標(biāo)志物

近年來(lái)，科學(xué)家們利用各種技術(shù)，從組織、細(xì)胞和體液中發(fā)掘出一大批與腫瘤病變相關(guān)的分子標(biāo)志物，如易感基因、致癌/抑癌基因、微R NA、長(zhǎng)鏈非編碼R NA、環(huán)狀R NA、癌胚活性蛋白及代謝產(chǎn)物等。臨床上也已將這些分子標(biāo)志物用于腫瘤高危人群的篩查、原發(fā)腫瘤的早期診斷、良性和惡性腫瘤的鑒別診斷、腫瘤惡性程度的判斷、藥靶、治療敏感性或耐藥性的評(píng)估以及腫瘤復(fù)發(fā)與預(yù)后的預(yù)測(cè)和干預(yù)等。在胃癌生長(zhǎng)、浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移過(guò)程中，參與的因子與分子主要包括生長(zhǎng)因子及其受體、細(xì)胞因子、端粒與端粒轉(zhuǎn)移酶、細(xì)胞黏附分子等。

（1）生長(zhǎng)因子及其受體、細(xì)胞因子。通常，胃癌細(xì)胞經(jīng)自分泌與旁分泌會(huì)形成大量生長(zhǎng)因子，會(huì)加快細(xì)胞生長(zhǎng)速度，且在降解細(xì)胞外基質(zhì)以及促進(jìn)血管生成方面更容易使腫瘤發(fā)生與增殖。而且，表皮生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子受體以及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子均和胃癌侵襲深度、預(yù)后不理想等存在直接關(guān)聯(lián)。其中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）家族成員包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D 和胎盤生長(zhǎng)因子。目前通過(guò)抗血管生成治療癌癥和其他疾病的策略，主要集中在調(diào)控VEGF 及其受體的信號(hào)通路上，并已公認(rèn)是一種有效的抗癌方法。雷莫蘆是一種抗VEGF-R 2 的重組人源化單克隆抗體，其活性受到VEGF 的抑制，雷莫蘆單抗單一使用或與紫杉醇聯(lián)合使用，在臨床實(shí)踐中具有抗腫瘤作用[3],因此，VEGF-D 有可能成為一種預(yù)后判斷的胃癌分子標(biāo)志物。

（2）端粒與端粒轉(zhuǎn)移酶。在維護(hù)端粒方面，一般需借助端粒末端轉(zhuǎn)移酶活性對(duì)細(xì)胞永生以及腫瘤發(fā)生的參與加以誘導(dǎo)。其中，在絕大多數(shù)腫瘤中均存在人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶的表達(dá)，這和腫瘤分期并不存在關(guān)聯(lián)。而端粒保護(hù)裝置1 則屬于端粒末端的鏈接蛋白，是端粒結(jié)構(gòu)帽子，同樣可經(jīng)染色體末端對(duì)端粒酶進(jìn)行滋養(yǎng)。在進(jìn)展期胃癌當(dāng)中，端粒保護(hù)裝置1 表達(dá)水平相對(duì)較高。為此，端粒保護(hù)裝置1 同樣被當(dāng)做進(jìn)展期腫瘤標(biāo)記物的一種。

（3）細(xì)胞黏附分子。對(duì)細(xì)胞形態(tài)調(diào)節(jié)以及細(xì)胞深入抑制方面期間，上皮細(xì)胞鈣粘蛋白E 的作用十分關(guān)鍵。通過(guò)諸多研究表明，上皮細(xì)胞鈣粘蛋白E 屬于獨(dú)立性預(yù)后因素。在胃癌預(yù)后判斷中，上皮細(xì)胞鈣粘蛋白E 可溶纖溶酶是常見(jiàn)的標(biāo)志物。另外，CD44 為細(xì)胞黏附分子，其外顯子6 高低表達(dá)比較證實(shí)其具有一定生存優(yōu)勢(shì)。而CD44 外顯子9 表達(dá)則和腫瘤轉(zhuǎn)移以及侵襲存在密切聯(lián)系，和腫瘤死亡率的關(guān)聯(lián)也十分緊密。S100 蛋白家族即鈣結(jié)合蛋白家族，通過(guò)結(jié)合鈣離子即可在人體內(nèi)發(fā)揮其生物學(xué)功能。在研究成果中可知，S100 蛋白在腫瘤增生異常、進(jìn)展以及侵襲轉(zhuǎn)移等過(guò)程中作用突出[5]。

3.2 分子腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)價(jià)值

胃癌屬于惡性腫瘤，且病死率較高，在我國(guó)胃癌發(fā)病率與病死率均位居首位，嚴(yán)重威脅了人民群眾的健康與生命安全。在腫瘤生長(zhǎng)期間會(huì)向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，而此表現(xiàn)會(huì)嚴(yán)重危害腫瘤患者。腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的過(guò)程同樣包括多因素與多步驟，其生長(zhǎng)、浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移中腫瘤血管占據(jù)關(guān)鍵地位。對(duì)于胃癌患者而言，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在血管生成因子中的作用最明顯。腫瘤患者的新生血管形成過(guò)程中，內(nèi)皮生長(zhǎng)因子作為中心性調(diào)控因子存在，且其結(jié)構(gòu)保守性特征明顯，通過(guò)二聚體的形式存在。而且，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子為特異性有絲分裂原，更有利于內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)以及血管生成，可有效增加血管的通透性。除此之外，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子也能夠使血管內(nèi)的物質(zhì)泄露，進(jìn)而為患者血管內(nèi)皮遷移以及細(xì)胞轉(zhuǎn)移提供必要基質(zhì)。

綜上所述，診斷疑似胃癌患者過(guò)程中，對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子進(jìn)行檢測(cè)，具有重要價(jià)值，且胃黏膜組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子陽(yáng)性率和胃癌臨床分期、分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)，通過(guò)檢測(cè)VEGF 有利于對(duì)胃癌高危群體進(jìn)行篩查，以便采取措施預(yù)防，有利于胃癌診斷工作的開(kāi)展。