重組人干擾素-α1b吸入聯合免疫球蛋白對重癥腺病毒肺炎患兒細胞免疫功能的影響

楊婷，饒花平，羅力妍，丁妞，徐暢，羅淑娟，金世杰，陳艷萍

肺炎在兒童疾病中較為常見，5歲以內小兒是常見發病人群，主要是因為兒童的氣管和支氣管腔道相對狹小，缺乏彈力組織，平滑肌發育不完善，分泌黏液不足且比較干燥，黏膜纖毛運動弱，清除呼吸道微生物的能力比較差，而且年齡小，免疫系統尚未完善，抵抗力低，容易患肺炎[1]。腺病毒(adenovirus ADV)屬于一種DNA病毒，其傳播途徑為呼吸道傳染，可使兒童呈散發或暴發流行。兒童罹患重癥腺病毒肺炎(severe adenovirus pneumonia SAP)后常表現為持續的高熱不退，肺部影像學改變重，病情進展快，存活者中 14%～60% 可遺留不同程度的后遺癥，病死率高達10%～40%[2-3]，是目前造成嬰幼兒肺炎死亡和致殘的重要原因之一。重癥患者T淋巴細胞主要是在胸腺中分化，并且其發育成熟會向外周淋巴組織中T細胞區轉移，完成特異性免疫應答，發揮細胞免疫功能作用。相關研究指出，機體發生感染時，淋巴細胞數量會發生變化，機體免疫功能也隨之發生紊亂，導致相關疾病發生[4]。目前在臨床中，免疫球蛋白治療主要采用丙種球蛋白，其抗感染效果顯著[5]。聶思怡等[6]指出，重組人干擾素α1b(recombinant human interferon α1B，rhIFN-α1b)與利巴韋林治療效果相似，臨床效果較好。現觀察rhIFN-α1b吸入聯合免疫球蛋白對重癥腺病毒肺炎患兒細胞免疫功能的影響，為其臨床應用提供理論依據，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2019年8月—2020年8月湖南省兒童醫院呼吸內科診治重癥腺病毒肺炎患兒82例，男52例，女30例，年齡0.5～5歲。按照抽簽法隨機分為對照組和聯合組，各41例。對照組男25例，女16例，平均年齡(2.61±2.00)歲；聯合組男27例，女14例，平均年齡(2.60±2.01)歲。2組患兒的性別比例、平均年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經過醫院倫理委員會批準，患兒家屬均知情同意并簽署協議書。

1.2 病例選擇標準 (1)納入標準：所有患兒均符合第八版《諸福棠實用兒科學》中關于急性支氣管肺炎的相關診斷標準[7]；入院后均通過直接呼吸道免疫熒光技術測定腺病毒抗原陽性；重癥肺炎的診斷標準參照英國胸科學會提出的診斷標準[8]：①體溫>38.5 ℃，全身中毒癥狀重，或有超高熱；②呼吸極度困難，紫紺明顯，肺部啰音密集或有肺實變體征，胸部X 線片示片狀陰影；③有心力衰竭、呼吸衰竭、中毒性腦病、微循環障礙、休克等任1項；④合并膿胸、膿氣胸和/或敗血癥、中毒性腸麻痹；⑤多器官功能障礙。其中①、②為必備條件，同時具備③～⑤中任1項即可診斷為重癥肺炎。(2)排除標準：合并支氣管哮喘患兒；肺結核患兒；免疫系統異常患兒；近1個月進行免疫抑制劑、糖皮質激素、抗生素治療患兒；精神異常患兒。

1.3 治療方法 患兒首先進行基礎治療：解痙、平喘、退熱、鎮靜、吸氧等支持治療，呼吸衰竭患兒給予機械通氣輔助治療。對照組另予注射用rhIFN-α1b(深圳科興藥業有限公司)霧化吸入，2 μg/kg加入至0.9%氯化鈉溶液3 ml中，壓縮霧化吸入(壓縮霧化吸入機，型號：NEBULAIR F2000，上海涵飛醫療器械有限公司)，每天1次。聯合組在對照組基礎上加用免疫球蛋白(丙種球蛋白，華蘭生物工程股份有限公司)靜脈滴注，劑量為1.0 g·kg-1·d-1，開始滴注速度1.0 ml/min，持續滴注15 min后無不良反應，可以逐漸加速，但最快滴注速度<3.0 ml/min。2組患兒均連續治療7 d。

1.4 觀測指標與方法

1.4.1 臨床癥狀：比較2組治療期間患兒發熱、肺部啰音、咳嗽、憋喘、咯痰癥狀緩解/減輕時間。

1.4.2 血清T細胞檢測：治療前、治療后7 d抽取患兒空腹靜脈血3 ml，離心分離得上層血清，加抗凝血鉀熒光抗體100 μl，在4℃環境下避光孵育30 min；加紅細胞裂解液1 ml，在溫室中繼續孵育15 min，離心吸取上清液；加含1% BSA的PBS 2 ml，再次離心吸取上清液，重懸于PBS緩沖液0.5 ml中，通過流式細胞儀檢測CD3、CD4、CD8水平。

1.4.3 血清炎性因子檢測：取上述血清，采用酶聯免疫吸附法檢測腫瘤壞死因子α(TNF-α)、γ-干擾素(IFN-γ)、白介素-2(IL-2)水平。

1.4.4 不良反應：觀察2組患兒治療過程中可能出現的皮膚潮紅、腹瀉、胃腸道反應、頭痛等不良反應。

1.5 臨床療效評價[9]顯效：患兒胸部X線檢查肺部陰影明顯吸收，發熱、肺部啰音、咳嗽、憋喘、咯痰癥狀明顯改善；有效：上述癥狀改善；無效：上述癥狀無變化。治療總有效率=(顯效+有效)/總例數×100%。

2 結 果

2.1 2組治療總有效率比較 治療7 d后，聯合組總有效率為90.24%，高于對照組的73.17%，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 2組重癥腺病毒肺炎患兒治療效果比較 [例(%)]

2.2 2組臨床癥狀緩解時間比較 與對照組比較，聯合組各項臨床癥狀緩解時間均縮短，差異有統計學意義(P<0.01)，見表2。

表2 2組重癥腺病毒肺炎患者治療后臨床癥狀緩解時間比較

2.3 2組治療前后血清T細胞水平比較 治療前，2組CD3、CD4、CD8水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)；治療7 d后，2組CD3、CD4、CD8水平均升高，且聯合組較對照組明顯升高，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 2組重癥腺病毒肺炎患兒治療前后血清T細胞水平比較

2.4 2組治療前后血清炎性因子水平比較 治療前，2組TNF、IFN-γ、IL-2水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)；治療7 d后，2組TNF、IFN-γ、IL-2水平均降低，且聯合組下降較對照組更明顯，差異均有統計學意義(P<0.01)，見表4。

表4 2組重癥腺病毒肺炎患兒治療前后血清炎性因子水平比較

2.5 2組不良反應發生率比較 對照組和聯合組不良反應發生率比較，差異無統計學意義(χ2=0.156，P=0.693)，見表5。

表5 2組重癥腺病毒肺炎患兒不良反應發生情況比較 [例(%)]

3 討 論

目前臨床中關于小兒腺病毒肺炎治療，主要以保守治療為主，同時輔助抗細菌感染、解痙、平喘、退熱等治療，但效果不是十分顯著[10]。干擾素α1b在人體中分布較廣，rhIFN-α1b在抗病毒治療方面發揮著顯著效果，主要是因為其屬于一種低分子蛋白質，具有廣譜抗菌效果[11]。rhIFN-α1b進入機體后，會誘導細胞產生抗病毒蛋白，病毒mRNA被不斷降解，其mRNA轉錄、翻譯、復制過程被抑制，從而使治療效果提升[12]。

CD3、CD4 T淋巴細胞一旦經受刺激，會向Th1、Th2淋巴細胞增殖和分化，正向調節免疫應答過程，對機體免疫調控起到一定的作用[13-14]。鄭麗麗等[15]研究結果指出，與非重癥患兒比較，腺病毒肺炎重癥組患兒外周血CD3、CD4、CD8水平明顯降低，說明ADV感染會引起患兒細胞免疫功能降低。在本研究結果中，rhIFN-α1b吸入聯合免疫球蛋白能提升患兒CD3、CD4、CD8水平，從而提高患兒細胞免疫功能，促進患兒恢復。劉艷艷[16]研究也指出，丙種球蛋白聯合抗感染治療小兒重癥腺病毒肺炎，有助于患兒機體免疫力提升，與本研究結果保持一致。

目前臨床中已經有研究證實，TNF對病毒復制有一定的抑制能力，主要是能抑制病毒蛋白產生，起到殺死病毒感染細胞的作用[17]。相關研究指出，IFN-γ、IL-2通過對巨噬細胞進行刺激，促進TNF合成，對機體免疫起到一定的保護作用[18]。本研究結果認為，rhIFN-α1b吸入聯合免疫球蛋白能促進TNF、IFN-γ、IL-2水平下降，對重癥腺病毒肺炎患兒病情發展有一定的抑制作用。大部分腺病毒感染肺炎患兒常常出現腹瀉、惡心、嘔吐等臨床癥狀，其中發熱、咳嗽、咯痰是較為典型的癥狀，一旦發病后，如果治療不及時，其病情加重，患兒死亡風險也隨之增加[19]。本研究中，rhIFN-α1b吸入聯合免疫球蛋白治療腺病毒肺炎患兒，能顯著縮短其各項臨床癥狀緩解時間，提高治療有效率，有助于加快康復進程。分析其可能原因：丙種球蛋白對抗原、抗體復合物形成有一定的抑制作用，降低炎性反應；通過抑制肺泡滲出，對患兒的臨床癥狀有一定的改善能力[20-22]。本研究中，治療后2組患兒不良反應發生率無差異，可能是因為rhIFN-α1b治療安全性有保證，能提高患兒耐受能力。

綜上所述，rhIFN-α1b吸入聯合免疫球蛋白對重癥腺病毒肺炎患兒治療效果顯著，能提高其細胞免疫功能，控制患兒病情發展，改善其臨床癥狀，促進患兒早日康復，為其臨床應用提供理論依據。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突

作者貢獻聲明

楊婷：實施研究過程、統計分析及論文撰寫；饒花平、陳艷萍：指導研究思路；羅力妍：設計研究方案、分析數據；丁妞：實施研究過程；徐暢：實施研究過程、資料收集；羅淑娟：資料收集；金世杰：實施研究過程、指導分析數據