血清miR-181b在兒童阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征中的作用及意義

宣妙燕 郁峰 黃秋玲 蔡堯梁

[摘要] 目的 探討血清miR-181b在兒童阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征（OSAHS）中的作用及意義。 方法 選取2018年1—12月湖州市中心醫院收治的OSAHS患兒60例，經多導睡眠監測儀監測，按照病情分為輕度OSAHS組與中重度OSAHS組，每組各30例。選取同一時期來湖州市中心醫院進行健康體檢的無OSAHS癥狀患兒30例為對照組。對受試者進行Achenbach兒童行為量表（CBCL）檢測、韋氏兒童智力量表（WWISC）檢測，以及血清神經元特異性烯醇化酶（NSE）、S100β、miR-181b水平檢測。 結果 輕度、中重度OSAHS組CBCL評分，NSE、S100β、miR-181b水平顯著高于對照組;中重度OSAHS組CBCL評分、NSE、S100β、miR-181b水平顯著高于輕度OSAHS組，WISC顯著低于輕度OSAHS組（P<0.05）。OSAHS患者血清miR-181b水平與NSE、S100β水平、CBCL評分均呈顯著正相關（P<0.05），與WISC呈顯著負相關（P<0.05）。 結論 通過對血清中的miR-181b水平進行檢測，能夠對OSAHS患兒認知行為障礙的程度、腦損傷的程度進行早期的篩查，提高診斷水平。

[關鍵詞] 阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征;認知行為障礙;腦損傷;miR-181b

[中圖分類號] R563.9? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2021）09-0005-05

The role and significance of serum miR-181b in children with obstructive sleep apnea- hypopnea syndrome

XUAN Miaoyan? ?YU Feng? ?HUANG Qiuling? ?CAI Yaoliang

Department of Pediatrics， Huzhou Central Hospital in Zhejiang Province， Affiliated Hospital of Huzhou University， Huzhou? ?313000， China

[Abstract] Objective To explore the role and significance of serum miR-181b in children with obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome（OSAHS）. Methods Sixty children with OSAHS admitted to Huzhou Central Hospital from January to December 2018 were selected as the subjects. They were monitored by polysomnography and divided into mild OSAHS group and moderate-severe OSAHS group according to their condition， with 30 cases in each group. Thirty children with no OSAHS symptoms who came to Huzhou Central Hospital for physical examination during the same period were selected as the control group. All subjects were tested with achenbach child behavior checklist（CBCL）， wechsler intelligence scale for children （WISC）， serum neuron-specific enolase（NSE）， S100β， and miR-181b level. Results The CBCL scores， NSE， S100β， and miR-181b levels of the mild and moderate-severe OSAHS groups were significantly higher than those of the control group. The CBCL scores， NSE， S100β， and miR-181b levels of the moderate-to-severe OSAHS group were significantly higher than those of the mild OSAHS group. WISC of the moderate-to-severe OSAHS group was significantly lower than that of the mild OSAHS group（P<0.05）. Serum miR-181b levels in OSAHS patients were significantly positively correlated with NSE， S100β levels， and CBCL scores（P<0.05）， and significantly negatively correlated with WISC（P<0.05）. Conclusion By detecting the level of miR-181b in the serum， early screening of the degree of cognitive behavioral impairment and the degree of brain damage in children with OSAHS can be carried out to improve the level of diagnosis.

[Key words] Obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome; Cognitive behavior disorder; Brain injury; miR-181b

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征（Obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome，OSAHS）是由于各種原因導致的上呼吸道部分或全部阻塞，從而擾亂睡眠過程中正常通氣過程和睡眠結構的疾病[1]。OSAHS的發生不僅影響睡眠質量，還與高血壓、心血管疾病等疾病的發生發展密切相關，影響患者的健康與生活質量，據統計，OSAHS在兒童中的患病率達1.2%～5.7%[2]。兒童的身體結構與機能與成人存在較大差異，OSAHS可影響患兒身體及智力發育[3]。目前，對OSAHS患兒進行早期篩查，并制定個體化的治療和管理方案已成為該領域研究的熱點。近年來相關血清生物標志物的表達與OSAHS關系成為研究熱點。微小核糖核酸（microRNA，miRNA）表達異常參與多種腦疾病的發病過程[4]，本研究分析血清miR-181b與OSAHS兒童腦損傷、認知行為障礙的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018年1—12月所有因打鼾、張口呼吸和呼吸困難等來本院兒科及耳鼻喉科門診就診的OSAHS患兒60例為研究對象。OSAHS診斷標準：符合中華醫學會耳鼻咽喉科分會2007年發表的兒童OSAHS診療指南草案中OSAHS的診斷標準[5]。

經多導睡眠監測儀監測，根據呼吸暫停低通氣指數（Apnea hypopnea index，AHI）和最低血氧飽和度將60例患兒按照病情分為輕度OSAHS組與中重度OSAHS組，每組各30例。輕度OSAHS組，男16例，女14例;年齡5～12歲，平均（7.25±2.13）歲。中重度OSAHS組男17例，女13例;年齡5～12歲，平均（7.75±2.29）歲。選取同一時期來本院進行健康體檢的無OSAHS癥狀患兒30例為對照組，男15例，女15例;年齡5～12歲，平均（7.15±2.04）歲。三組性別、年齡比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 納入標準及排除標準

納入標準：①因打鼾、張口呼吸、呼吸困難等來本院科就診的睡眠呼吸障礙（Sleep-disordered breathing，SDB）患兒;②完成整夜睡眠監測;③符合中華醫學會兒童OSAHS診療指南草案診斷標準;④經患兒及家長知情同意。排除標準：①伴有神經系統疾病或心理疾病;②患有影響生理及智力發育的疾病;③不能配合調查。

對照組納入標準：①被家人證實無鼾聲，發育正常;②無慢性呼吸道疾病如支氣管哮喘，無上氣道腫物或壓迫氣道的疾病，鼻腔通暢;③無影響呼吸中樞的疾病，如腦干腫瘤或梗死等;④無顱內病變或任何解剖畸形;⑤經患兒和家長知情同意。排除標準：①精神、神經、代謝性腦病疾患患兒;②顱面部畸形;③中樞性呼吸暫停低通氣綜合征。

1.3 方法

1.3.1 兒童行為測試? 采用Achenbach兒童行為量表（Child behavior checklist，CBCL）對受試者進行社會能力及行為問題測試。該量表能夠評價兒童的行為及情緒問題，對活動能力、社交能力、學習能力等進行綜合評估。評分越高表明各項目的行為特征越明顯。

1.3.2 兒童智力測試? 采用韋氏兒童智力量表（Wechsler intelligence scale for children，WISC）進行受試者的兒童智力水平測試，根據各項測試指標核算言語智商、操作智商、總智商得分。得分越高表明受試者的智力水平越高。

1.3.3 血清NSE、S100β、miR-181b水平檢測? 清晨空腹采集靜脈血，采用酶鏈免疫吸附實驗檢測血清中神經元特異性烯醇化酶（Neuron-specific enolase，NSE）、S100β蛋白水平。采用熒光實時定量PCR法檢測血清中miR-181b水平。

1.4 統計學處理

應用SPSS 22.0統計學軟件分析數據，正態計量資料用（x±s）表示，兩樣本比較采用獨立樣本t檢驗，多個樣本比較采用單因素方差分析;兩兩比較采用LSD法。兩變量相關分析采用Pearson直線相關分析法，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組CBCL量表測試結果比較

單因素方差分析結果顯示，對照組、輕度OSAHS組、中重度OSAHS組間的CBCL量表總分比較，差異有統計學意義（P<0.001）。輕度OSAHS組、中重度OSAHS組的CBCL量表總分均顯著高于對照組（P<0.05）;中重度OSAHS組CBCL量表總分顯著高于輕度OSAHS組（P<0.05）。進一步比較發現，對照組、輕度OSAHS組、中重度OSAHS組間的分裂樣、抑郁、交往不良、社交退縮、多動、攻擊性、違紀評分比較，差異有統計學意義（P<0.05）。輕度、中重度OSAHS組的分裂樣、抑郁、交往不良、社交退縮、多動、攻擊性、違紀評分顯著高于對照組（P<0.05）。中重度OSAHS組的分裂樣、抑郁、交往不良、社交退縮、多動、攻擊性、違紀評分顯著高于輕度OSAHS組（P<0.05）。

2.2 三組WISC測試結果比較

單因素方差分析結果顯示，對照組、輕度OSAHS組、中重度OSAHS組間的言語智商、操作智商、總智商評分比較，差異有統計學意義（P<0.001）。中重度OSAHS組的言語智商、操作智商、總智商評分均顯著低于對照組、輕度OSAHS組（P<0.05）。

2.3 三組血清NSE、S100β、miR-181b水平比較

單因素方差分析結果顯示，對照組、輕度OSAHS組、中重度OSAHS組間的血清NSE、S100β、miR-181b水平比較，差異有統計學意義（P<0.05）。輕度OSAHS組、中重度OSAHS組的血清NSE、S100β、miR-181b水平均顯著高于對照組（P<0.05）。中重度OSAHS組的血清NSE、S100β、miR-181b水平顯著高于輕度OSAHS組（P<0.05）。

2.4 OSAHS患者血清miR-181b水平與NSE、S100β水平相關性分析

相關性分析結果顯示，OSAHS患者血清miR-181b水平與NSE、S100β水平均呈顯著正相關（P<0.05）。

2.5 OSAHS患者血清miR-181b水平與CBCL、WISC測試結果相關性分析

相關性分析結果顯示，OSAHS患者血清miR-181b水平與CBCL評分呈顯著正相關（P<0.05），與WISC呈顯著負相關（P<0.05）。

3 討論

由于兒童的身體結構與成人存在較大差異，因此在生長發育階段，OSAHS對機體的影響是多方面的，不僅身體發育將受到明顯的影響，智力、行為也將受到不同程度的影響。研究發現，20%左右的OSAHS兒童存在學習能力受限的情況，部分兒童還伴有注意力下降、攻擊等方面的問題[6]。但關于OSAHS對兒童行為及心理影響的確切機制尚無定論。行為是反映人對外部環境適應能力的重要指標，OSAHS患兒在行為上可表現為多動、攻擊性、注意力不集中等[7]。有研究發現，OSAHS導致的睡眠過程中間斷性缺氧，可影響人的情緒波動，甚至導致暴力傾向的發生[8]。劉雅璇[9]在研究中分析存在睡眠頻繁中斷癥狀兒童的注意力情況及多動情況，統計結果顯示，存在此類癥狀的兒童在日常的學習生活中，注意力不集中及多動的現象明顯高于其他兒童。本研究結果也顯示，在CBCL量表的各個評價項目中，OSAHS患兒與正常對照組兒童之間的CBCL量表總分存在顯著差異。進一步分析發現，OSAHS組兒童主要在活動能力、社交能力、學習能力等項目的評分中與正常兒童存在顯著差異，且OSAHS病情越嚴重，相應的指標評分越高，提示OSAHS對兒童的行為發育存在較大影響。在智力水平的評價方面，本研究結果提示，輕度OSAHS組患兒在WISC測試中的言語智商、操作智商、總智商評分均與正常對照組比較，差異無統計學意義，提示輕度OSAHS發病對患兒的智力水平影響不大。中重度OSAHS組患兒在WISC測試中，其言語智商、操作智商、總智商評分均顯著低于對照組和輕度OSAHS組患兒，提示中重度OSAHS發病對于兒童的智力水平存在顯著影響。

NSE、S100β蛋白是公認的腦損傷外周血標志物[10]。NSE是一種特異性蛋白質，存在于神經元和神經內分泌細胞中，當腦損傷發生時，NSE可從神經元、神經內分泌細胞中溢出，釋放進入外周血液和腦脊液中[11]。S100β蛋白為存在于神經組織中的一種鈣結合蛋白，當腦損傷發生時，血中S100β蛋白水平顯著升高[12]。研究發現[13]，OSAHS患者存在記憶力下降以及血中NSE、S100β蛋白水平升高的現象，這可能與夜間低氧血癥的發生有關，而NSE、S100β蛋白水平升高可能是導致腦損害和記憶力下降的主要機制之一。本研究結果也顯示，OSAHS患兒的血清NSE、S100β蛋白水平均顯著高于對照組，說明OSAHS患兒可能存在一定程度的腦損害情況。進一步比較顯示，中重度OSAHS組的血清NSE、S100β水平顯著高于輕度OSAHS組，說明OSAHS病情越嚴重，腦損傷的程度越重。

目前，對OSAHS病理機制的研究結果表明，其發病過程是一種慢性炎癥過程，經證實多種miRNA在炎癥反應的過程中發揮重要作用[14-16]。miRNA是一類由20～24個核苷酸組成的內源性非編碼單鏈RNA，在大腦發育、神經元分化等過程中發揮重要的生物學作用。miRNA的異常表達與多種神經系統疾病的發生發展密切相關，在缺血缺氧性腦損傷的發生機制中，也存在特定的miRNA表達異常的現象，這使miRNA作為標記物評估OSAHS的腦損傷程度成為可能[17]。經證實，miR-181b的過表達能夠對血管壁損傷的信號通路發揮明顯的調節作用，從而降低炎癥反應發生的程度[18-20]。本研究中，OSAHS的病情越重，血清中miR-181b水平越高，分析可能是由于miR-181b與OSAHS的炎癥反應調控機制密切相關。相關性分析結果也顯示，OSAHS患者血清miR-181b水平與NSE、S100β水平均呈顯著正相關（P<0.05），與CBCL評分呈顯著正相關（P<0.05），與WISC呈顯著負相關（P<0.05）。說明通過對血清中的miR-181b水平進行檢測，能夠對OSAHS患兒認知行為障礙的程度、腦損傷的程度進行早期的篩查，提高診斷水平。

在未來的研究中，將進一步收集兒童OSAHS病例資料，對患兒進行長期隨訪，定期監測認知行為改變，適時進行腦損傷標志物相關檢測，以期發現更多助于OSAHS患兒腦損傷改變的篩查指標。

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（收稿日期：2020-08-15）