肺炎鏈球菌臨床分離株的臨床特點、血清分型及耐藥性分析

何義

山東省曹縣人民醫院檢驗科，山東菏澤 274400

肺炎鏈球菌感染是全球性公共衛生問題，據世界衛生組統計，全球每年約有120萬人因肺炎鏈球菌感染性疾病而死亡。肺炎鏈球菌感染通常會引起肺炎、腦膜炎、菌血癥等，臨床致死率較高，尤其是對于學齡前兒童及老年人[1]。1965年，美國首次提出青霉素耐藥肺炎鏈球菌（PRSP），后期全球各地不斷出現PRSO感染病例，以兒童群體居多，這為臨床治療帶來較大困難。1980年，美國肺炎鏈球菌青霉素耐藥性均屬于低水平耐藥，耐藥率小于5.00%。1990年時，青霉素耐藥率升高到17.00%，如今已高于30.00%。由此可見，準確掌握肺炎鏈球菌臨床特點、血清分型與耐藥性，對肺炎鏈球菌感染后期防治具有重要作用。鑒于此，該文對該院2019年4月—2020年4月收治的120例患者展開探討。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇該院收治的120例患者作為該次研究對象，其中男72例，女58例；年齡5～80歲，平均（42.16±3.47）歲。該次研究經該院倫理委員會批準,所選患者、家屬均了解且認同該次研究,并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 研究材料、試劑 左氧氟沙星（國藥準字H33021415）、萬古霉素（國藥準字H30222295）、四環素（國藥準字H51020049）、紅霉素（國藥準字H50021705）、克林霉素 （國藥準字H20067875）、苯唑西林 （國藥準字H20067209）、利福平（國藥準字H44022114）、復方新諾明 （國藥準字H41023726）、奎奴普汀 （國藥準字J20040031）、利奈唑胺（國藥準字H20150035），青霉素G藥敏試片；肺炎鏈球菌分離培養基選用血瓊脂平板，5%脫纖維綿羊血選用水解酪蛋白瓊脂平板，膽鹽溶菌，菊糖微量生化管。

1.2.2 標本收集、細菌鑒定 依據臨床相關標準實施樣本收集、處理及運送。結合菌落特點，挑出可疑菌落，實施革蘭染色、膽鹽溶菌試驗、糖發酵試驗、Optochin試驗、。

1.2.3 血清分型 以莢膜腫脹分型方法開展肺炎鏈球菌血清分型，油鏡下查看試驗結果。陽性判定結果：莢膜漲起，菌體周邊薄厚不一，邊界清晰，存在無色環狀物。

1.2.4 藥敏試驗 選用含有5%脫纖維綿羊血M-H平板，以0.5麥氏單位作為菌液濃度控制標準；在5%二氧化碳培養箱內（35℃）孵育24 h，參照美國臨床與實驗室標準協會（CLSI）修訂的M100-S24標準對藥敏試驗結果敏感性進行判斷，以1μg苯唑西林檢測其青霉素敏感性，對青霉素低于19 mm菌株施用E-test檢測，明確青霉素最低抑菌水平，而后判斷其對青霉素敏感度。

1.3 觀察指標

觀察120例患者分離株臨床特點、血清分型結果、對不同藥物敏感性及耐藥性情況。

1.4 統計方法

采用SPSS 24.0統計學軟件進行數據分析，計數資料的表達方式為[n(%)]，采用 χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 120株肺炎鏈球菌臨床特點分析

120株肺炎鏈球菌大多為呼吸道標本，其中，咽與痰試子標本分離共104株菌株，占總體86.67%，血培養分離10株，占8.33%，膿液標本6株，占5.00%。120株肺炎鏈球菌中92株 （76.67%）為兒科，28株（23.33%）為非兒科；其中，8歲以下患兒81例（67.50%），9～60歲患者12例（10.00%），60歲以上患者27例（22.50%）。

2.2 120株肺炎鏈球菌血清分型結果分析

120株肺炎鏈球菌以23F、19F血清型居多，分別占31.67%、20.83%。見表1。

表1 120株肺炎鏈球菌血清分型結果

2.3 120株肺炎鏈球菌對不同藥物敏感性分析

萬古霉素、利奈唑胺及左氧氟沙星對肺炎鏈球菌敏感性最高，分別占100.00%、100.00%、98.33%。見表2。

表2 120株肺炎鏈球菌對不同抗菌藥物敏感性分析（%）

2.4 不同科室肺炎鏈球菌耐藥率分析

兒科青霉素耐藥率和非兒科相比，差異有統計學意義（P＜0.05）。除青霉素外，兒科、非兒科肺炎鏈球菌對其他藥物耐藥率相比，差異無統計學意義 （P＞0.05）。 見表3。

表3 不同科室肺炎鏈球菌耐藥率比較[n(%)]

3 討論

肺炎鏈球菌最初是在1881年于狂犬病患兒唾液內提取而出，30.00%兒童與10.00%正常健康成人上呼吸道內均可提取到該種病菌。該病通常分布于鼻咽部，一般條件下不致病。當免疫能力降低時，可在局部發生感染，如急性鼻竇炎、急性中耳炎、扁桃體炎、肺炎等非侵入性疾病，也有一些菌經黏膜抵達血液引起最初無感染位置感染，譬如骨髓炎、腦膜炎、菌血癥等侵入性疾病，其致死率能達到20.00%。肺炎鏈球菌感染性疾病多見于兒童、老年人與體弱者。

該研究中，經對120例患者菌體分離發現，肺炎鏈球菌多為呼吸道感染，其中，咽與痰試子標本檢出率為86.67%，血培養檢出8.33%；感染者多為兒童，以8歲以下群體為主，占67.50%。由此可見，肺炎鏈球菌感染以呼吸道感染居多，好發于兒童群體。

目前，臨床上用于肺炎鏈球菌血清分型的方法較多，該研究應用的為常規血清分型，即依照莢膜成分提出不同抗血清。研究中，120株肺炎鏈球菌以23F與19F居多，分別占31.67%、20.83%。王樂雨等[2]對河北省肺炎鏈球菌血清型情況展開研討，結果顯示：血清型主要有19F（9.3%）、14（18.2%）、6A/6B（11.4%）、19A（10.2%），而23F僅占5.7%。陳素菜等[3]研究中報道，肺炎鏈球菌血清分型以19A（32.56%）、19F（23.26%）、23F（13.95%）居多。 可見肺炎鏈球菌血清分型存在一定地域差異性。27株無法進行分型，出現該種現象的原因可能和菌株無莢膜存在關聯。另外，由于肺炎鏈球菌接種率的增高，也可能會出現新的血清型。

對青霉素而言，肺炎鏈球菌耐藥性發生機制為細菌細胞壁上青霉素融合蛋白基因出現變異，進而致使肺炎鏈球菌抗生素親和力下降，最終發生耐藥性[4-5]。國內肺炎鏈球菌分離有較強地域性和實踐性，再加之我國肺炎鏈球菌分離率較低，并因各醫院各地區應用抗菌藥方式不同，近幾年來臨床對肺炎鏈球菌的青霉素耐藥性相關報道也有著明顯差異。該研究中，肺炎鏈球菌的青霉素耐藥率為63.33%。目前，臨床上借助青霉素防治肺炎鏈球菌感染已超過于50年，而對青霉素治療失敗案例的相關報道也隨之增多。故而，臨床上對肺炎鏈球菌的青霉素敏感性判斷標準做出相應改進[6-7]。

當前，國內肺炎鏈球菌首要耐藥問題為高度耐大環內酯藥物，從目前被監控的10種常見抗菌藥物而言，還未發現對利奈唑胺、萬古霉素耐藥菌株。另外，肺炎鏈球菌對奎奴普汀、左氧氟沙星耐藥性也較低，分別為2.50%、1.67%，這提示以上藥物均可當作臨床肺炎鏈球菌治療常規藥物[8-10]。

因兒童組織器官尚未發育程度，抗生素的不合理應用易造成其體內正常菌落破壞，特別對于新生兒而言。故而，兒童所用抗菌藥物方式和成人存在顯著差別。該研究中，除青霉素之外，兒科與非兒科常用抗菌藥物耐藥率相似，這表示患者抗菌藥物應用方式不會明顯影響到肺炎鏈球菌耐藥性。但在實際應用過程中，還應結合患者和具體情況，合理選擇給藥方案[11-12]。

綜上所述，面對當今肺炎鏈球菌耐藥日益突出的問題，臨床上應不斷增強肺炎鏈球菌分離能力，注意監測其耐藥性抗原變化，并施以其耐藥機制研究，以發現、控制耐藥菌株。