扶正化瘀膠囊對乙肝肝硬化患者肝纖維化、腸黏膜屏障功能及免疫功能的影響

張健榮，顧爾莉，王忠成

(江蘇省南通市第三人民醫院肝病科，江蘇南通 226006)

乙肝肝硬化是指患者由于長期的乙肝病毒感染、病情逐漸加重以及肝臟反復損傷與修復而發展成肝纖維化。據相關文獻報道[1]，肝硬化進一步損害與機體過量產生一氧化氮以及細菌異位到機體腸系膜淋巴結密切相關，從而使腸系膜血管系統的收縮性受到嚴重影響，并導致腸道黏膜屏障功能受損。腸黏膜屏障損害是乙肝肝硬化發展過程中的關鍵環節，將促進病情發展，引起病情惡化，使機體免疫功能降低，對預后造成不利影響，從而給患者帶來極大的痛苦。目前，臨床對乙肝肝硬化主要采取保肝、利尿以及抗纖維化等常規西藥對癥治療，但療效欠佳[2]。近年來，中西醫結合治療肝硬化得到了諸多醫師和患者的認可。本研究觀察了86例乙肝肝硬化患者采用扶正化瘀膠囊聯合恩替卡韋抗病毒治療，連續治療6個月后觀察治療對患者肝纖維化、腸黏膜屏障功能及免疫功能的影響。

1 資料和方法

1.1 納入標準和排除標準 納入標準：(1)診斷標準均符合《病毒性肝炎防治方案》[3]，肝功能Chlid-Pugh分級為A或B級，且通過CT、超聲等檢查證實為肝硬化；(2)年齡20～85歲；(3)乙肝表面抗原(HBsAg)均呈陽性；(4)所有研究對象均知情，自愿參與本試驗并簽訂知情同意書，積極配合治療。排除標準：(1)有嚴重精神疾病或無法溝通者；(2)嚴重心、肝、腎功能不全者；(3)妊娠期或哺乳期患者；(4)患有其他病毒感染者；(5)急慢性腸炎或胃潰瘍患者。

1.2 研究對象 選取2018年1月-2019年1月在江蘇省南通市第三人民醫院就診的86例乙肝肝硬化患者，采用隨機數字表法隨機分為對照組和觀察組，每組43例。

1.3 治療方案 兩組患者入院后均采取基礎治療，如保肝以及維持水、電解質、酸堿平衡等。對照組患者給予恩替卡韋片(國藥準字H20110172，規格0.5 mg×7粒，福建廣升堂藥業有限公司)，口服0.5 mg，qd。觀察組患者在對照組治療基礎上聯合扶正化瘀膠囊(國藥準字Z20020073，規格0.3 g×60粒，上海黃海制藥有限責任公司)，口服，5粒/次，tid。兩組患者均連續治療6個月，每周由兩名護士采用門診、電話等方式進行隨訪，以監督患者的治療依從性。

1.4 觀察指標

1.4.1 肝纖維化指標 采用放射免疫法，檢測兩組患者治療前和治療后6個月的血清透明質酸(hyaluronic acid,HA)、血清黏連蛋白(laminin,LN)、Ⅲ型前膠原(procollagen type Ⅲ,PC-Ⅲ)以及Ⅳ型膠原(type Ⅳ collagen,Ⅳ-C)。試劑盒均統一采購自上海信帆生物科技有限公司，嚴格按照試劑說明書進行檢測。

1.4.2 腸黏膜屏障功能指標 治療前后采用腸黏膜屏障功能試劑盒(北京中生金域診斷技術股份有限公司)檢測二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)、血漿D-乳酸以及內毒素，嚴格按照試劑盒說明書進行檢測。

1.4.3 免疫功能指標 采用EPICS XL型流式細胞分析儀和SYSTEM Ⅱ軟件(美國貝克曼庫爾特有限公司)檢測兩組患者治療前后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IgA和IgG等免疫指標。

1.4.4 HBV-DNA水平及轉陰率 比較兩組患者治療前后的HBV-DNA拷貝數及轉陰率。空腹時抽取肘靜脈血10 ml，離心分離血清，使用熒光定量PCR檢測系統檢測HBV-DNA拷貝數。若HBV-DNA 拷貝數<1.0×103/ml則為轉陰，計算轉陰率。轉陰率=(轉陰患者數/患者總人數)×100%。

2 結 果

2.1 一般資料的比較 兩組患者在性別、年齡等一般資料上無顯著差異，具有可比性，見表1。

表1 兩組患者一般資料的比較Table 1 Comparison of the general data of the patients in the two groups

2.2 肝纖維化指標的比較 兩組患者治療前后肝纖維化指標的比較見表2。由表2可見，兩組患者在治療前的4項肝纖維化指標HA、LN、PC-Ⅲ以及Ⅳ-C無顯著性差異(P>0.05)；治療后上述4項肝纖維化指標均顯著降低(P<0.05)，且觀察組均低于對照組(P<0.01)。

表2 兩組患者治療前后肝纖維化指標的比較Table 2 Comparison of the liver fibrosis indexes of the two groups before and after treatment

2.3 腸黏膜屏障功能指標的比較 兩組患者的DAO、D-乳酸和內毒素3項腸黏膜屏障功能指標在治療前無顯著性差異(P>0.05)；治療6個月后，兩組患者上述3項腸黏膜屏障功能指標較治療前均有所下降(P<0.05)，且觀察組患者的下降幅度比對照組更大(P<0.01)，見表3。

表3 兩組患者治療前后腸黏膜屏障功能指標的比較Table 3 Comparison of the intestinal mucosal barrier function indexes of the two groups before and after treatment

2.4 免疫功能指標的比較 兩組患者在治療前的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IgA和IgG 5項免疫功能指標均無顯著差異(P>0.05)；治療6個月后， 兩組患者的5項免疫功能指標均有顯著提高(P<0.05)，且觀察組患者的改善情況顯著優于對照組(P<0.05，P<0.01)，見表4。

表4 兩組患者治療前后免疫功能指標的比較Table 4 Comparison of the immune function indexes of the two groups before and after treatment

2.5 HBV-DNA水平和轉陰率的比較 兩組患者治療前HBV-DNA拷貝數無顯著性差異(P>0.05)；治療后，兩組患者的HBV-DNA拷貝數均顯著降低(P<0.05)，且觀察組顯著低于對照組(P<0.05)。觀察組患者的轉陰率為72.09%(31/43)，對照組患者的轉陰率為51.16%(22/43)，觀察組的轉陰率顯著高于對照組(P<0.05)，見表5。

表5 兩組患者治療前后HBV-DNA水平和轉陰率的比較Table 5 Comparison of the HBV-DNA level and negative conversion rate of the two groups before and after treatment (n=43)

3 討 論

導致肝硬化的原因較多，如慢性酒精中毒、營養不良、藥物毒物以及肝炎病毒等[4]。乙肝病毒長期在機體肝臟內復制、繁殖，將引起肝臟免疫性損傷，從而形成乙肝肝硬化。乙肝肝硬化在發展過程中常導致腸道黏膜充血、水腫甚至糜爛，引起腸黏膜功能和上皮細胞受損； 此外，由于大量G-桿菌在肝硬化患者的腸道內繁殖生長，釋放大量內毒素，還可導致腸源性內毒素血癥[5]。而腸源性內毒素血癥又將損害腸黏膜屏障功能，促進細菌異位，使D-乳酸和DAO水平受到炎性反應后，從而引起病情惡化。同時，腸源性內毒素血癥可通過激活肝巨噬細胞并釋放活性氧(ROS)而導致脂質過氧化，引起體內CD4+/CD8+、CD8+以及CD3+等T淋巴細胞紊亂并減弱B淋巴細胞的功能，從而使患者免疫功能降低[6]。因此，在患病早期有效地修復腸黏膜屏障功能、減少機體內毒素的釋放并提高免疫抵抗力是治療該疾病的重點。中醫認為肝硬化是由于氣陰兩虛以及瘀血阻絡所致，應當采取活血化瘀、益氣養陰等治療為主。扶正化瘀膠囊由丹參、發酵蟲草菌粉、松花粉、桃仁、絞股藍5味藥組成。方中丹參和桃仁具有活血化瘀的作用，發酵蟲草菌粉具有調節免疫功能的作用，松花粉具有促進肝細胞活性的作用，絞股藍具有清熱解毒的作用。諸藥相合，從而發揮抗肝纖維化的作用[7]。既往扶正化瘀膠囊對心肌梗死大鼠的影響的研究結果顯示，扶正化瘀膠囊能有效改善心臟功能，降低心肌梗死后心肌纖維化程度，其作用機制可能與扶正化瘀膠囊調控TGF-β1/Smads信號通路有關[8]。

本研究結果顯示，經6個月治療后兩組患者的HA、LN、PC-Ⅲ以及Ⅳ-C 4項肝纖維化指標均顯著降低，且觀察組患者的肝纖維化指標均低于對照組患者，表明扶正化瘀膠囊聯合恩替卡韋治療較單獨使用恩替卡韋治療能更有效地緩解肝纖維化。這與扶正化瘀膠囊中的發酵蟲草菌粉通過調節T淋巴細胞免疫功能保護肝細胞，使脂質過氧化受到抑制有關，從而達到抗肝纖維化的目的[9]。本研究結果還顯示，兩組患者治療后的DAO、D-乳酸以及內毒素3項腸黏膜屏障功能指標較治療前均有所下降，且觀察組患者的3項腸黏膜屏障功能指標均低于對照組患者，表明扶正化瘀膠囊聯合恩替卡韋可改善腸黏膜屏障功能，這可能與扶正化瘀膠囊中丹參含有多種有效的活性成分有關，如丹參酮具有抗菌、抗炎及抗氧化的作用，通過抑制血小板聚集和擴張腸道血管，改善腸道黏膜微循環，對腸黏膜屏障功能起到保護作用[10]。兩組患者治療后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IgA以及IgG 5項免疫功能指標均有所提高，且觀察組患者5項免疫功能指標的改善情況均優于對照組，這與陶淑萍[11]觀察扶正化瘀膠囊輔助西醫對乙肝肝硬化患者腸黏膜屏障功能、免疫功能及肝功能狀態的影響結果相似。因此，本研究結果進一步證實了扶正化瘀膠囊聯合恩替卡韋可有效調節機體免疫功能，這可能與扶正化瘀膠囊中的丹參有關，丹參可有效調節微循環流態，還可使成纖維細胞受到抑制，從而激活膠原酶，促進人體正常發育并維持體內激素平衡；還可能與發酵蟲草菌粉雙向調節免疫功能密切相關，從而提高機體免疫力[12]。研究結果還顯示，治療后觀察組患者的血清HBV-DNA水平顯著低于對照組，轉陰率較對照組更高，表明乙肝肝硬化患者使用扶正化瘀膠囊聯合恩替卡韋治療可降低HBV-DNA水平，提高轉陰率。

綜上所述，乙肝肝硬化患者使用扶正化瘀膠囊聯合抗病毒藥物可有效緩解肝纖維化、改善腸黏膜屏障功能并調節免疫功能。