食管癌患者血清白細(xì)胞介素和免疫球蛋白水平檢測(cè)及其臨床意義

李日著 高 潔 農(nóng) 峰 王居平 唐任光

1.右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院心胸血管外科，廣西百色 533000；2.右江民族醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，廣西百色 533000；3.右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院輸血科，廣西百色 533000

食管癌是我國(guó)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，新發(fā)病人數(shù)占全球食管癌發(fā)病總?cè)藬?shù)的一半以上[1]。食管癌在我國(guó)惡性腫瘤發(fā)病率中居第六位，是一種來(lái)源于上皮組織的惡性腫瘤，其中90%以上屬于鱗狀細(xì)胞癌[2-3]。有研究報(bào)道[4-6]，所有與食管癌有關(guān)的死亡中有一半以上發(fā)生在中國(guó)。近年來(lái)，有研究發(fā)現(xiàn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與機(jī)體免疫功能有關(guān)[7-9]。故檢測(cè)患者免疫指標(biāo)在判斷患者病情及指導(dǎo)治療中有指導(dǎo)意義。本課題組前期研究[10]發(fā)現(xiàn)，食管癌患者白細(xì)胞介素（IL）-6、IL-10 和IL-18明顯異常。本研究從血清IL 和免疫球蛋白水平角度去分析食管癌患者發(fā)病的相關(guān)指標(biāo)，以期為臨床診療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016 年1 月—2018 年12 月右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院（以下簡(jiǎn)稱“我院”）收治的150 例食管癌患者為食管癌組，所有病理結(jié)果均為食管鱗狀細(xì)胞癌，其中男80 例，女70 例；年齡（58.2±5.8）歲；Ⅰ～Ⅱ期77 例，Ⅲ～Ⅳ期73 例；轉(zhuǎn)移組65 例，無(wú)轉(zhuǎn)移組85 例。選擇同期我院體檢的健康者130 名作為對(duì)照組，其中男69 名，女61 名；年齡（55.2±4.1）歲；肝、腎功能均正常，無(wú)腫瘤病史。兩組性別、年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P >0.05），具有可比性。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者均經(jīng)胃鏡取活檢，且病理組織學(xué)確診為食管癌；②擬限期行食管癌根治術(shù)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①精神或意識(shí)障礙；②合并嚴(yán)重的免疫性疾病或全身感染性疾病；③合并重要臟器的功能異常；④既往有嚴(yán)重的手術(shù)史和外傷史；⑤合并活動(dòng)性炎癥或感染（如肺炎和肺結(jié)核）。

1.3 食管癌分期標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)食管癌的TNM 分級(jí)[11]，T 分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)包括Tx：原發(fā)腫瘤不能測(cè)定；T0：無(wú)原發(fā)腫瘤的證據(jù)；Tis：原位癌；T1：腫瘤侵及黏膜固有層或黏膜下層；T2：腫瘤侵及肌層；T3：腫瘤侵及食管纖維膜；T4：腫瘤侵及臨近器官。N 分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)包括Nx：區(qū)域內(nèi)淋巴結(jié)不能測(cè)定；N0：無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移；N1：區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。M 分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)包括Mx：遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移不能測(cè)定；M0：無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移；M1：有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。0 期：TisN0M0；Ⅰ期：T1N0M0；ⅡA 期：T2N0M0、T3N0M0；ⅡB 期：T1N1M0、T2N1M0；Ⅲ期：T3N1M0、T4N1-2MO；Ⅳ期：T1-4N0-1M1。

1.4 方法

于清晨空腹抽取所有研究對(duì)象肘正中靜脈血4 mL，于4℃冰箱放置1 h 后，2000 r/min 離心4 min，離心半徑為10 cm，血清分離后放置于-80℃冰箱保存待測(cè)。血清IL-6、IL-10、IL-18、IgG、IgA 和IgM 水平的檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），ELISA 試劑盒購(gòu)于武漢華美生物工程有限公司，生產(chǎn)批號(hào)分別：20170303、20170312、20170320、20170415、20170419、20170425，實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，符合正態(tài)分布計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)；不符合正態(tài)分布的改用中位數(shù)（M）和四分位數(shù)（P25，P75）表示，兩組間比較采用秩和檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用例數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P <0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 食管癌組與對(duì)照組IL-6、IL-10、IL-18、IgG、IgA和IgM 水平比較

食管癌組IL-6、IL-18、IgA 水平高于對(duì)照組，IL-10水平低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P <0.05）。兩組IgG 和IgM 水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P >0.05）。見(jiàn)表1。

表1 食管癌組與對(duì)照組IL-6、IL-10、IL-18、IgG、IgA、IgM 水平比較（）

表1 食管癌組與對(duì)照組IL-6、IL-10、IL-18、IgG、IgA、IgM 水平比較（）

注：IL：白細(xì)胞介素

2.2 不同食管癌臨床分期患者IL-6、IL-10、IL-18、IgG、IgA、IgM 水平比較

Ⅲ～Ⅳ期IL-6、IL-18、IgA 水平高于Ⅰ～Ⅱ期組，IL-10 水平低于Ⅰ～Ⅱ期，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P <0.05）。兩組IgG 和IgM 比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P >0.05）。見(jiàn)表2。

表2 不同食管癌臨床分期患者IL-6、IL-10、IL-18、IgG、IgA、IgM 水平比較

2.3 食管癌轉(zhuǎn)移組與無(wú)轉(zhuǎn)移組IL-6、IL-10、IL-18、IgG、IgA、IgM 水平比較

食管癌轉(zhuǎn)移組IL-6、IL-18、IgA 水平高于無(wú)轉(zhuǎn)移組，IL-10 水平低于無(wú)轉(zhuǎn)移組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P <0.05）。兩組IgG 和IgM 比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P >0.05）。見(jiàn)表3。

表3 食管癌轉(zhuǎn)移組與無(wú)轉(zhuǎn)移組IL-6、IL-10、IL-18、IgG、IgA、IgM 水平比較

3 討論

我國(guó)是食管癌的高發(fā)地區(qū)，發(fā)病率和死亡率均居世界之首。有研究報(bào)道[12-14]，食管癌發(fā)病危險(xiǎn)因素眾多（如煙熏食品、吸煙史、油炸食品、高鹽食品、霉變食品和腌制食品等）。

IL-6 作為食管癌診斷的標(biāo)志物[15]，可直接作用于腫瘤細(xì)胞，促增殖、抗凋亡[16]，其可提高食管癌Eca-109 細(xì)胞體外增殖、侵襲、遷移能力[17]。IL-10 是免疫抑制作用比較強(qiáng)的細(xì)胞因子[18]。有研究顯示[19]，IL-10通過(guò)刺激B 細(xì)胞增殖和分化形成漿細(xì)胞，分泌一些免疫因子，從而起到免疫促進(jìn)的作用，抑制腫瘤的生長(zhǎng)。作為抗炎因子的重要組成部分，IL-10 對(duì)機(jī)體的炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答均有重要的調(diào)節(jié)作用[20]。IL-18 是免疫應(yīng)答和固有免疫應(yīng)答的重要細(xì)胞因子，病理分期越低、分化程度越低，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及浸潤(rùn)程度越深，其表達(dá)越低[21]。IL-18 能誘導(dǎo)活化免疫T 細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞產(chǎn)生γ 干擾素[22]。IgA 主要由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，多種腫瘤患者的血漿、體液、腫瘤組織中IgA 水平異常升高[23]。

免疫球蛋白是反映機(jī)體免疫狀態(tài)的有效因子之一，在體液免疫應(yīng)答中發(fā)揮最主要作用，正常情況下，其濃度相對(duì)穩(wěn)定，當(dāng)發(fā)生感染的時(shí)候其水平較低，降低幅度與創(chuàng)傷的嚴(yán)重程度有關(guān)[24]。血清免疫球蛋白含量最高的是lgG，是機(jī)體再次產(chǎn)生免疫應(yīng)答的主要機(jī)體，產(chǎn)生時(shí)間晚，維持時(shí)間長(zhǎng)，是機(jī)體感染的主力軍。lgM 是一種五聚體的免疫蛋白，是抗原刺激誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答中最先產(chǎn)生的免疫球蛋白，是機(jī)體抗感染免疫的先頭部隊(duì)，lgA 有中毒毒素的作用。有文獻(xiàn)報(bào)道[25]，上皮源性腫瘤細(xì)胞系能夠表達(dá)lgA mRNA 和蛋白。通過(guò)檢測(cè)血清中l(wèi)gG、lgM、lgA 水平，可了解患者機(jī)體合成免疫球蛋白的功能及機(jī)體抗感染免疫能力，可用于評(píng)估機(jī)體體液免疫狀態(tài)[26]。食管鱗狀細(xì)胞癌患者血清IgG 和IgA 是獨(dú)立的預(yù)后因素，血清IgG和IgA 含量高的患者預(yù)后最差，IgG 和IgA 聯(lián)合檢測(cè)有利于提高診斷和預(yù)后[27]。本研究結(jié)果顯示，食管癌患者IgA水平高于健康人群，Ⅲ～Ⅳ期患者IgA 水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者，轉(zhuǎn)移患者IgA 水平高于無(wú)轉(zhuǎn)移患者（均P <0.05）。

本研究結(jié)果顯示，食管癌患者IL-6、IL-18 水平高于健康人群，IL-10 水平低于健康人群；Ⅲ～Ⅳ期患者IL-6、IL-18 水平高于Ⅰ～Ⅱ期組，IL-10 水平低于Ⅰ～Ⅱ期組；轉(zhuǎn)移患者IL-6、IL-18 水平高于無(wú)轉(zhuǎn)移患者，IL-10 水平低于無(wú)轉(zhuǎn)移患者（均P <0.05）。有文獻(xiàn)報(bào)道[28]，血清IL-18 的升高與腫瘤惡性程度密切相關(guān)，其水平越高，患者生存率就越低，且與疾病預(yù)后不良呈正相關(guān)，通過(guò)降低IL-18 水平有利于患者康復(fù)。本課題組在前期研究發(fā)現(xiàn)，食管癌患者IL-6、IL-10 及IL-18 異常表達(dá)，本研究進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行研究，也證實(shí)了食管癌與IL-6、IL-10 及IL-18 有關(guān)，同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)食管癌與IgA 有關(guān)。本研究不足之處在于只針對(duì)食管鱗狀細(xì)胞癌進(jìn)行研究，其他類型的食管癌是否也與IL-6、IL-10、IL-18 及IgA 水平有關(guān)，下一步將進(jìn)行這方面的研究。

綜上所述，食管癌患者、Ⅲ～Ⅳ期及有轉(zhuǎn)移的患者IL-6、IL-18、IgA 水平明顯升高，IL-10 水平明顯降低。這些指標(biāo)可能為食管癌的診斷、治療及預(yù)后提供依據(jù)。