姜 順
(長安大學,陜西西安 710064)
釀酒酵母培養物中含有大量營養物質,其中豐富的菌體蛋白、維生素和大量的營養因子能作為微生態制劑應用到動物生產中,以提高機體抗氧化和免疫力,產生經濟效益(楊東吉等,2020)。其作為一種新型的日糧添加劑被廣泛應用(柴鴻勛等,2018;邵廣等,2011)。
賽馬運動作為一種精神文化活動在世界范圍內廣受推行。在賽馬運動中,馬匹的體況、體能與飼養管理體現了重要的經濟價值。相關研究表明,不同品種的賽馬在比賽前后的體能狀態、血液學狀態及耐受力不盡相同(楊煜林等,2020)。因此,如何通過飼養管理和添加功能性添加劑來提高賽馬體能成為當前的研究熱點。釀酒酵母對反芻動物生長發育可起到較好的促進作用,因此,本文研究不同水平的釀酒酵母探究對賽馬體能的影響,為賽馬能量補充劑的開發奠定基礎。
1.1 試驗設計 試驗馬匹由內蒙古賽馬協會提供。釀酒酵母由內蒙古農業大學提供(含量≥98%)。將18匹健康且體況相近的蒙古馬隨機分為試驗1、2組和對照組。其中試驗組在基礎日糧中分別添加釀酒酵母培養物50和100 g/d),試驗共持續20 d。1.2 飼養管理 試驗階段所有馬匹均按照日常飼養管理方式進行,訓練時在圈舍外進行活動。基礎日糧參考雷耿華的配方配制,所有試驗馬匹均為自由飲水,采食方式按照馬場進行,飼料配方如表1所示。

表1 補充料組成及營養水平(風干水平)
1.3 指標測定
1.3.1 抗氧化指標 試驗結束后,使用一次性采血針對賽馬進行靜脈采血10 mL,在室溫下靜置1 h后,3000 r/min離心10 min取上清。使用SOD、CAT、GSH-Px、MDA、GSH試劑盒檢測血清抗氧化水平,試劑盒購于碧云天生物科技有限公司。
1.3.2 血液生化指標 使用試劑盒檢測乳酸脫氫酶、肌酸激酶、肌紅蛋白水平,試劑盒購于索萊寶、上海酶免;使用高效液相色譜檢測血液中氨基酸含量水平。
1.4 數據統計 試驗數據使用Excel記錄,通過SPSS 22.0軟件進行單因素方差分析,采用Duncan’s法進行多重比較。組間比較方差齊性時采用LSD模塊進行檢驗,若方差不齊時采用T3模塊進行檢驗,P<0.05表示差異顯著。
2.1 釀酒酵母對賽馬抗氧化水平的影響 由表2可知,與對照組相比,試驗1、2組中的MDA水平明顯下降,SOD、CAT、GSH-Px水平抗氧化酶活性明顯升高(P<0.05或P<0.01),且呈現劑量依賴性。結果表明,釀酒酵母可以降低賽馬血清MDA含量,提高其抗氧化能力。

表2 釀酒酵母對賽馬抗氧化水平的影響(n=6)
2.2 釀酒酵母對賽馬血液生化指標的影響 由表3可知,通過對賽馬日糧中添加釀酒酵母20 d后發現,與對照組相比,試驗組1、2組血清乳酸脫氫酶LDH、肌酸激酶CK和肌紅蛋白水平均有所升高;但僅有肌酸激酶和肌紅蛋白水平呈顯著差異(P<0.05)。除此之外,在肌酸激酶水平變化中表現為釀酒酵母劑量依性。

表3 釀酒酵母對賽馬血液生化指標的影響(n=6)
由表4可知,試驗1、2組賽馬血液中甘氨酸、絲氨酸、瓜氨酸的含量顯著高于對照組(P<0.05);且亮氨酸與組氨酸均高于對照組,但差異不顯著(P>0.05),可能是由于釀酒酵母飼喂時間過短造成。

表4 釀酒酵母對賽馬血液氨基酸含量的影響(n=6,單位:μmoL/L)
3.1 不同水平釀酒酵母對賽馬抗氧化水平的影響 賽馬比賽后體內的抗氧化平衡被打破,劇烈的運動增加了機體耗氧量,使得機體短時間內產生大量的活性氧自由基,造成氧化損傷(Hood等,2018)。在氧化應激條件下,細胞內將存在較高濃度的自由基,這些自由基會損傷細胞內(包括核酸、蛋白質)的生物大分子物質。除此之外,細胞內線粒體的氧化反應也會導致胞內遺傳物質突變及DNA損傷,形成大量的DNA單鏈(Sheweita等,2020)。當DNA斷裂后會形成8-羥基脫氧鳥苷,且該物質的含量可以直接反映出機體氧化應激對DNA的損傷程度(Lee等,2018;高玉楠等,2012)。同時,細胞內的脂質被氧化后將會改變細胞膜的流動性及磷脂結構,使細胞功能減弱或喪失,無法及時進行物質交換,又會使細胞內的ROS濃度進一步增加,形成惡性循環。蛋白質極易受到自由基和ROS的作用,從而產生各種不同的氧化產物。因此,要想提高賽馬體能,增強其運動能力,就要在日糧基礎上提高其抗氧化能力,減少賽馬劇烈運動時自由基對機體造成的氧化損傷。商健等(2020)研究發現,維生素E與硫酸鋅能明顯提高賽馬的運動能力,減少劇烈運動后對馬匹的氧化損傷。除此之外,馬騰等(2020)發現,甜菜粕能明顯改善賽馬運動后30min內的心率水平,且能通過增強血清超氧化物歧化酶水平,降低丙二醛含量,減少氧化應激,提高賽馬的運動性能。
在本研究中,與對照組相比,添加不同劑量的釀酒酵母可顯著降低賽后血清的丙二醛含量,并使血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶和過氧化氫酶水平顯著提升,增強了機體抗氧化能力,減少氧化損傷。
3.2 不同水平釀酒酵母對賽馬血液生化指標的影響 賽馬在劇烈運動前后其血液學指標會發生明顯變化。血清乳酸脫氫酶、肌酸激酶水平均能反應出在劇烈運動后,動物機體運動能力狀況和恢復能力。其中肌酸激酶與能量代謝密切相關,能調控糖酵解途徑、線粒體呼吸鏈功能,為機體提供能量(劉振玉,1999)。因此,在正常狀態下,血清肌酸激酶水平能反應肌細胞對運動能力的耐受度。有相關研究表明,肌細胞與血清中的肌酸激酶水平差異較大,血清肌酸激酶含量可以較為敏感的反應出肌肉對外界刺激的承受能力(袁青,2007)。在本研究中,通過對賽馬飼喂釀酒酵母后發現,試驗組中賽馬血清肌酸激酶、肌紅蛋白水平明顯升高,證明釀酒酵母可以增強賽馬體內血清肌酸激酶含量,提高其能量利用率,從而增強賽馬的運動能力。
除此之外,賽馬運動前后血液氨基酸水平也能反應出其體能恢復和運動能力。在高強度訓練中,馬匹體能恢復速度與能量物質的轉化效率也是反映出賽馬體能的重要指標。有研究指出,在耐力賽馬運動中,高強度運動下,賽馬的能量來源主要從糖類消化轉變為脂肪消耗,因此,在日糧補充中應添加較高濃度的脂肪物質來提高能量利用,緩解賽馬在劇烈運動后的血糖不足情況(Laurence等,2019)。但Dunstan等(2019)研究發現,血液氨基酸水平也是影響賽馬體能恢復的重要因素,通過對賽馬長期跟蹤8個月以上的結果顯示,甘氨酸是賽馬休息期水平含量最高的氨基酸。且也有研究結果表明,瓜氨酸、胱氨酸、絲氨酸和亮氨酸也可能是賽馬休息階段恢復體能的重要氨基酸。在本研究中發現,對蒙古馬添加釀酒酵母后,賽馬運動后試驗組血液中甘氨酸、絲氨酸、瓜氨酸、組氨酸含量高于對照組,但僅有甘氨酸、絲氨酸、瓜氨酸具有顯著差異。結果證明,釀酒酵母能顯著增加賽馬休息期內對體能恢復有利的氨基酸含量,從而增強賽馬的運動能力。
在本試驗中,在日糧中添加釀酒酵母能顯著增強蒙古賽馬血清抗氧化能力,降低丙二醛含量,提高血清肌酸激酶、肌紅蛋白水平和休息期內必需氨基酸水平,從而提高賽馬體能,增強其運動能力。