葡萄渣粉對高溫期蛋雞生產性能、血清生化指標和抗氧化能力的影響

周業飛，周梅仙，王祥雷

（1.南京曉莊學院食品科學學院，江蘇南京 211171；2.南京市溧水區春神養雞專業合作社，江蘇南京 211299）

高溫是引起蛋雞機體應激的主要因素之一，可引起蛋雞直腸溫度升高、血漿肌酸激酶活性升高、血漿三碘甲狀腺素水平降低等一系列生理代謝變化，嚴重影響蛋雞采食量和飼料轉化效率，降低產蛋率、產蛋量、蛋品質和蛋殼強度[1]。此外，高溫還可導致蛋雞血漿中丙二醛（MDA）水平升高，引起氧化應激，進而引起脂質過氧化和細胞膜氧化損傷，從而導致雞蛋品質明顯受損[2]。因此，如何避免和改善高溫對蛋雞的有害影響成為動物營養工作者重要的任務。在實際生產中，除了改善蛋雞飼養管理環境，在蛋雞日糧中添加維生素、植物提取物和益生菌等功能性飼料添加劑來部分減輕高溫對蛋雞的損傷也是常用策略。

葡萄渣粉（Grape Pomace Flour，GPF）是葡萄皮、籽、莖等提取加工后的副產品，富含酚類、黃酮類、花青素和兒茶素等有益成分，還含有白藜蘆醇、木犀草素、槲皮素和山柰醇等高抗氧化物質，具有抗氧化、抑菌、抗腫瘤等作用[3-4]。研究發現，在肉雞日糧中添加適量的GPF 可顯著降低肉雞脂質氧化，提高回腸有益菌群數量[5]。在蛋雞日糧中添加白藜蘆醇可顯著提高蛋雞的產蛋性能和抗氧化防御系統相關的酶活性[6]。因此，本研究旨在評價高溫時蛋雞日糧中添加GPF 對蛋雞的產蛋性能、蛋品質和抗氧化能力產生的影響，為GPF 在蛋雞養殖中應用及研究提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗設計與飼養管理 選取576 只58 周齡、平均產蛋率（84.13±1.56）%、平均體重（1.96±0.74）kg 商品代海蘭褐蛋雞，由南京市溧水區春神養雞專業合作社提供。動物經過14 d 的適應期后，采用完全隨機設計，將動物分為4 個處理組，每個處理12 個重復，每個重復12 只。對照組飼喂產蛋期基礎日糧，試驗組分別在基礎日糧中添加1%、1.5% 和2% GPF（GPF 由南京澤朗生物科技有限公司加工制作，主要營養成分為干物質 35.49%，粗蛋白質 8.13%，粗灰分 9.61%，粗脂肪 7.29%，中性洗滌纖維 45.24%，酸性洗滌纖維 35.04%））。采用層疊籠飼養方式，每天日光燈照明16 h。每天08:00、17:00 各飼喂1 次，試驗蛋雞等量給食，自由采食、飲水。每天觀察各組試驗雞采食、排糞、發病及死亡情況。試驗期間溫度變化范圍為32～ 37℃，預試期2 周，正試試驗期8 周?；A日糧組成及營養成分見表1，試驗期日糧中不添加任何生長促進劑或抗生素。

表1 產蛋期蛋雞基礎日糧組成及營養成分

1.2 測定指標與方法

1.2.1 產蛋性能 在60～68 周試驗期間每天定時撿蛋，以重復為單位，記錄每天喂料量、產蛋數、蛋重、破軟蛋數和死亡數，計算每重復產蛋率、平均蛋重、破軟蛋率和死淘率，日產雞蛋重量是通過平均雞蛋重量乘以產蛋率計算。每隔7 d記錄一次飼料消耗量并計算飼料轉化率，飼料轉化率以每產1 g 雞蛋所消耗的飼料克數表示。

1.2.2 雞蛋品質 分別在第64 周和第68 周，從每個試驗處理隨機收集36 個雞蛋（每個重復3 個雞蛋）測定雞蛋質量指數來確定雞蛋品質參數。蛋形指數和蛋殼強度分別用蛋形測定儀和蛋殼強度測定儀測定；用游標卡尺分別測量蛋殼厚度以及蛋黃高度和蛋黃直徑，精確至0.02 mm，計算蛋黃系數，蛋黃系數=蛋黃高度/蛋黃直徑×100%。將蛋清和蛋黃完全分離，將蛋黃放到濾紙上吸去多余蛋清后收集蛋黃稱取重量，計算蛋黃相對重，蛋黃相對重=蛋黃重/全蛋重×100%；多功能蛋品質自動分析儀測定哈氏單位。

1.2.3 血清生化指標 分別在64 周和第68 周，每個處理隨機選擇24 只雞（每個重復2 只），用消毒過的針頭和注射器從翅靜脈抽取血液，室溫下4 000×g 離心10 min。收集血清-20℃保存，備用檢測。采用全自動生化分析儀測定總蛋白含量、白蛋白、球蛋白、尿酸、總膽固醇和甘油三酯。按試劑盒（南京建成生物工程研究所）操作步驟進行測定。

1.2.4 抗氧化水平和活性 抗氧化水平指標包括血清谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性、總抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽S-轉移酶（GST）、超氧化物歧化酶（SOD）活性、過氧化氫酶（CAT）和丙二醛（MDA）含量，并嚴格按照試劑盒（南京建成生物工程研究所）操作規程進行。

1.3 統計分析 數據處理和顯著性分析采用SPSS 17.0 軟件中ANOVA 模型進行單因素方差分析，采用LSD 法進行多重比較，數據以平均值±標準差表示。

2 結果與分析

2.1 日糧中添加GPF 對蛋雞生產性能的影響 由表2 可見，在試驗期的大部分時間里，蛋雞表現出兩喙張開，伸頸呼吸，飲水量增加，雞群不夠活躍等熱應激的行為。試驗處理組蛋雞生產性能各項指標雖呈一定的變化趨勢，但差異不顯著。在試驗1～4 周和5～8 周，1.5%和2% GPF 組的雞蛋破損率顯著低于對照組。

表2 日糧中添加GPF 對蛋雞生產性能的影響

2.2 日糧中添加GPF 對雞蛋品質的影響 從表3 中看出，在蛋雞第64 周和第68 周時，1.5% 和2% GPF 組蛋殼強度和蛋黃系數顯著高于對照組和1% GPF 組。在蛋雞日糧中添加GPF 后雖然蛋形指數、蛋殼厚度、蛋黃相對重和哈氏單位在數值上呈增加趨勢，但與對照組無顯著差異。

表3 日糧中添加GPF 對雞蛋品質的影響

2.3 葡萄渣粉對蛋雞血清生化指標的影響 從表4 可看出，在蛋雞第68 周時，與對照組和1% GPF 組相比，1.5%和2% GPF 組血清總蛋白、球蛋白、尿酸和總膽固醇顯著降低。但各處理組血清白蛋白和甘油三酯差異不顯著。

表4 日糧中添加GPF 對蛋雞血清生化指標的影響

2.4 葡萄渣粉對蛋雞血清抗氧化能力的影響 從表5 可看出，在蛋雞第68 周時，GPF 組血清GSH-Px 和T-AOC活性均顯著高于對照組；第64 周時，1.5%和2% GPF組血清T-AOC 顯著高于對照組；第68 周，1.5%和2% GPF 組血清SOD 和CAT 活性顯著高于對照組和1% GPF 組，血清MDA 水平顯著低于對照組和1% GPF 組。各處理組間血清GST 活性差異不顯著。

表5 日糧中添加葡萄渣粉對蛋雞血清抗氧化能力的影響

3 討 論

本研究中，高溫期內，雖然在蛋雞日糧中添加GPF 后蛋形指數、蛋殼厚度、蛋黃相對重和哈氏單位在數值無顯著差異，但顯著降低了雞蛋的破損率，推測飼喂了GPF 后能通過調節蛋雞體內代謝，提高血漿鈣水平，增強蛋殼強度[7]，具體機制有待于進一步研究。本研究中蛋黃系數增加也進一步證實了飼喂GPF 提高了蛋雞機體的營養物質代謝，有效促進了卵泡發育[8]。

本試驗中，在蛋雞日糧中添加GPF 可顯著降低血清總蛋白和球蛋白水平，這與Magbolah 等[9]用白葡萄籽飼喂大鼠的試驗結果相似。由于球蛋白含量降低，GPF 處理組蛋雞血清總蛋白水平均較低。這些結果可能與GPF 中含有的白藜蘆醇改善了免疫和抗炎反應有關，因為血清球蛋白水平的提高通常發生在對損害免疫系統的病原體和應激條件的反應中。從這個意義上說，Fu等[10]報道，使用白藜蘆醇14 d 能顯著提高仔豬的免疫和抗炎反應，白藜蘆醇不僅可以作為疫苗佐劑來增強疫苗抗原的免疫反應，還可以作為飼料添加劑增強動物體液和細胞免疫反應。

高溫期間，在蛋雞日糧中使用GPF 后可以顯著增強蛋雞的抗氧化反應和降低血清中的氧化劑MDA 水平，這與Kara 等[11]在蛋雞中試驗結果報道相一致。眾多學者研究表明，葡萄和葡萄產品（葡萄汁、葡萄酒和糖蜜等）及其副產品（葡萄果渣和種子等）的抗氧化特性可能與它們含有的酚類化合物有關，在體內可清除自由基，與金屬離子形成螯合物，從而防止或減少單態氧的產生[12-13]。在飼喂GPF 后，蛋雞血清中GSH-Px、T-AOC和SOD 活性顯著性提高，表明機體抗氧化防御機制體系得到顯著改善，這可能與存在多酚類物質（如白藜蘆醇）有很大聯系，其作用機理主要是清除體內自由基、過氧化氫等氧化劑，啟動過氧化反應，減少過量O2濃度和抑制過氧化形成[14]。此外，增加血清抗氧化物水平有助于降低蛋黃脂質過氧化，因為大量過氧化反應會使抗氧化劑大量積累到蛋黃中，從而導致雞蛋的味道發臭，降低雞蛋的感官和營養質量。

4 結 論

本研究結果表明，在高溫期間，在蛋雞日糧中使用GPF 具有實際應用價值，不僅可以生產出品質更好的雞蛋，而且可以刺激蛋雞提高抗氧化防御體系，對動物健康具有保護作用；GPF 還可以降低雞蛋的脂質過氧化，提高抗氧化水平，有助于改善雞蛋質量。