藺麗麗,邵盛男,李永利,于勝利,常 悅、郭 倩,陳玉珂
(1.吉林省水產技術推廣總站,吉林 長春 130012;2.中國水產科學研究院東海水產研究所,上海 200090;3.吉林農業大學動物科學技術學院,吉林 長春 130118)
輪蟲作為天然水體中主要浮游生物之一,因其繁殖迅速、營養豐富、體形大小適宜、能通過一定技術手段進行大量培養、容易被水產動物幼體攝食和消化吸收等優點,被廣泛用于魚、蝦等水產動物的開口餌料。氨氮是我國大部分水系中主要污染指標,水質中氨氮濃度嚴重超標將影響水生動物的生長,對水生動物的許多器官造成損傷,甚至導致其發病死亡。
在輪蟲培育過程中,輪蟲的種群生長與培養水體的水質、溫度等因素密切相關,尤其在輪蟲大規模培養過程中一些環境因子的改變會直接導致輪蟲的大批量死亡,其中氨氮濃度的增加是影響輪蟲培養的重要因素之一。在輪蟲工廠化大規模培養過程中常常會采用施肥培養微藻或潑灑豆漿等方法豐富輪蟲餌料以提高其密度,然而這些肥料和餌料增加常會伴隨著有機物的不斷積累和不斷分解,從而導致水體中氨氮的大量積累,進而嚴重制約輪蟲產量的增長,甚至導致輪蟲的大批死亡。也有許多研究表明培養水體中輪蟲種群密度的降低往往伴隨著氨氮濃度的升高。Schlüt er M等(1985)研究大量培養過程中培養水體中非離子氨對海水輪蟲種群增長的影響時發現,當水體中非離子氨濃度達到13.2毫克/升時輪蟲的種群增長率降低50%。Par k等(2001)研究氨氮對淡水萼花臂尾輪蟲急性毒性影響時得到氨氮在24、48和96小時的半致死濃度分別為12.3、6.7和2.3毫克/升。因此,工廠化輪蟲培養過程中嚴格控制水體中氨氮含量是提高輪蟲產量的重要技術手段。
本實驗通過研究圓形臂尾輪蟲在不同氨氮濃度、時間條件下對輪蟲的種群增長、懷卵率的影響,以探究氨氮對輪蟲的半致死濃度,進而得到在培養輪蟲過程中培養水體氨氮的安全濃度,為輪蟲的大批量培養等生產實踐及相關研究提供數據支持和理論指導。
試驗用圓形臂尾輪蟲來自吉林農業大學水產實驗室。輪蟲以鹽度為30的人工配制海水預培養,培養期間保持連續充氣,自然光照,溫度為(25±1)℃,pH為7.3~7.8。輪蟲餌料采用酵母溶液,每天投餌1次,投喂量為8×106個/毫升。

采用12孔細胞培養板做個體培養試驗。每孔加入鹽度為30的海水3毫升,輪蟲接種密度為1個/毫升。用氯化銨調節水體氨氮濃度分別為0、0.625、1.25、2.5、5、10、20毫克/升,分別在12、24、48、96小時計數培養板中輪蟲數量及懷卵率,每組8個重復。試驗溫度為(25±1)℃,光照為晝12∶夜12,輪蟲餌料為酵母溶液,投喂量為6.4×106個/毫升,每天投喂兩次。
懷卵率(%)=懷卵個數/輪蟲總數×100
試驗結果表明,當氨氮濃度小于2.5毫克/升時,隨著培養時間的延長,輪蟲種群密度均呈增加趨勢;當氨氮濃度大于5毫克/升時,隨著氨氮濃度的增加,輪蟲種群增殖時間不斷縮短,即當氨氮濃度5毫克/升時,在培養12~48小時種群數量基本維持穩定,至96小時呈下降趨勢;而當氨氮濃度為10毫克/升或20毫克/升時,在培養至24小時即出現種群數量下降,直至全部死亡。
輪蟲懷卵率試驗結果表明,隨著氨氮濃度的升高,輪蟲的懷卵數量不斷減少。當氨氮濃度低于5毫克/升時,輪蟲的懷卵率在培養24小時后呈下降趨勢;而當氨氮濃度為10毫克/升或20毫克/升時(高于5毫克/升),輪蟲的懷卵率在培養12小時后即呈下降趨勢;氨氮濃度為0.625、1.25、10、20毫克/升4組的懷卵率第48小時較第24小時均有所升高,且1.25毫克/升組>0.625毫克/升組>10毫克/升組>20毫克/升組,但在培養至96小時,高氨氮濃度的10毫克/升組和20毫克/升組懷卵數量均為0。
氨氮是富營養化水體重要的氮形態之一,高濃度的非離子態氨和銨根離子會對輪蟲產生應激作用,影響輪蟲的增殖,因此輪蟲不能耐受較高濃度的氨氮。從本試驗結果來看,氨氮濃度越高,輪蟲的種群密度下降點出現得越早,懷卵數量也越少??梢哉J為當水體里的氨氮濃度升高,對輪蟲產生了較強的應激,影響了輪蟲的正常生理活動,抑制了其繁殖。輪蟲在遇到較強的外界環境變化時,會以產生休眠卵的形式來抵抗這種應激,因此,本試驗中當氨氮濃度為0.625、1.25、10、20毫克/升時,輪蟲的懷卵率在第48小時較第24小時均有所升高,這應該是輪蟲抵抗高濃度氨氮產生休眠卵的結果。實際生產中,高密度培養輪蟲時,氨氮是影響其培養密度的重要因素之一。從本試驗結果來看,應盡量降低水體中的氨氮濃度,以提升輪蟲的繁殖速度,促進種群增殖。