4-氨基安替比林分光光度法測(cè)定土壤中的揮發(fā)酚

張雷，胡琳珊

(1.天津華北地質(zhì)勘查局核工業(yè)二四七大隊(duì),天津 301800；2.天津華北地質(zhì)勘查局,天津 301800)

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 原理:揮發(fā)酚為有毒物質(zhì)，因此在檢測(cè)過程中應(yīng)戴好相應(yīng)的保護(hù)工具，在堿性溶液中提取土壤中的揮發(fā)酚并在酸性的條件下進(jìn)行蒸餾處理，所得的蒸餾液在鐵氰化鉀的作用下，與4-氨基安替比林發(fā)生反應(yīng)，靜置10min后，用723分光光度計(jì)在波長(zhǎng)510nm的波長(zhǎng)處進(jìn)行測(cè)量。在一定的濃度中揮發(fā)酚的含量和吸光度成正比。

1.2 主要儀器：723分光光度計(jì)，蒸餾儀。

1.3 試樣的取樣和制備：加入10mL硫酸銅溶液于30mL的取樣瓶中稱量，取樣品于樣品瓶中，稱取土壤樣品20g，于500m廣口聚乙烯瓶中，用10mL氫氧化鈉溶液清洗樣品瓶，加入260mL氫氧化鈉溶液擰緊瓶蓋，水平振蕩10min，樣瓶振蕩后，靜置5min，取250mL上清液，待蒸餾。提取液中加入數(shù)滴甲基橙，用磷酸調(diào)節(jié)至試樣呈橙紅色，加入5g硫酸銅，加入25mL去離子水，收集250mL餾出液，取50.0mL試樣于比色管，加入0.5mL緩沖液，1.0mL 4-氨基安替比林溶液，混勻后，加入1.0mL鐵氰化鉀溶液，充分混勻，密塞，放置10min，用10mm比色皿于波長(zhǎng)510nm處測(cè)量吸光度。以水為參比。

1.4 空白試樣的制備：以石英砂代替樣品按照以上步驟制備空白樣品。

1.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：在一組6支50.00 mL玻璃比色管瓶中，分別移取0.00 mL、0.50 mL、2.00 mL、5.00 mL、10.0 mL和25.0ml揮發(fā)酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入水定容至刻度，搖勻。加入0.5mL緩沖液，1.0mL 4-氨基安替比林溶液，混勻后，加入1.0mL鐵氰化鉀溶液，充分混勻，密塞，放置10min，用10mm比色皿于波長(zhǎng)510nm處測(cè)量吸光度。以水為參比。以揮發(fā)酚的酚含量為橫座標(biāo)，吸光度為縱座標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.6 試樣的測(cè)定：按照標(biāo)準(zhǔn)曲線的相同步驟進(jìn)行試樣的測(cè)定。當(dāng)揮發(fā)酚含量大于250μg，可減少試樣的取樣量，按照以上步驟重新測(cè)定。

1.7 空白試樣的測(cè)定：按照試樣的測(cè)定相同步驟進(jìn)行空白試樣的測(cè)定。

1.8 結(jié)果計(jì)算：試樣中揮發(fā)酚的質(zhì)量分?jǐn)?shù)以w（以苯酚，mg/kg）計(jì)，按公式計(jì)算：

式中：w—樣品中的揮發(fā)酚的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，mg/kg；A0—實(shí)驗(yàn)室空白溶液的吸光度；A—樣品的吸光度；a—標(biāo)準(zhǔn)曲線的截距；V1—提取液體積，300mL；b—標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率；V2—用于比色的試樣體積，50mL；m—試樣質(zhì)量，g；wdm—樣品的干物質(zhì)，%。

2 數(shù)據(jù)測(cè)試結(jié)果

2.1 方法檢出限、測(cè)定下限測(cè)試數(shù)據(jù)

按照樣品分析的全部步驟，重復(fù)8次試驗(yàn)測(cè)定方法檢出限（見表1）。

表1 方法檢出限測(cè)試數(shù)據(jù)表

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性驗(yàn)證結(jié)果

標(biāo)準(zhǔn)曲線用揮發(fā)酚的標(biāo)準(zhǔn)使用液，配置0μg、5.00μg、20.0μg、50.0μg、100μg、250μg共6個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列，按照方法要求進(jìn)行曲線繪制，統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表2，圖1標(biāo)準(zhǔn)曲線統(tǒng)計(jì)結(jié)果。

表2 標(biāo)準(zhǔn)曲線統(tǒng)計(jì)結(jié)果

圖1

2.3 方法精密度和準(zhǔn)確度測(cè)試數(shù)據(jù)

按照樣品分析的全部步驟，對(duì)樣品加標(biāo)低中高不同濃度分別進(jìn)行8次平行測(cè)定，并分別計(jì)算每一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和加標(biāo)回收率，驗(yàn)證方法精密度和準(zhǔn)確度（見表3，4）。

表3 精密度測(cè)試數(shù)據(jù)匯總表

表4 準(zhǔn)確度測(cè)試數(shù)據(jù)匯總

3 結(jié)論

1）該研究方法分別進(jìn)行了檢出限、標(biāo)準(zhǔn)曲線、精密度、準(zhǔn)確度和加標(biāo)回收率5個(gè)指標(biāo)的驗(yàn)證，測(cè)定土壤和沉積物的揮發(fā)酚(以苯酚計(jì))的檢出限為0.2mg/kg，小于方法檢出限,測(cè)定回收率為99.8%～104%，，驗(yàn)證結(jié)果均符合土壤中揮發(fā)酚的測(cè)試要求。

2）實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：土壤中的揮發(fā)酚含量都相對(duì)較低，又不穩(wěn)定，所以要保證樣品的準(zhǔn)確性，要在前處理方面解決。改進(jìn)措施：必須要取新鮮土壤，且混勻土壤，然后再裝入棕色瓶，用封口膜封緊瓶口，貼好標(biāo)簽，應(yīng)放入低溫保鮮箱內(nèi)。且應(yīng)在24h以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。