血清MALAT1、ENA-78、HE4表達情況與子宮內膜異位癥進展的關系研究

李鳳梅

（鄭州大學附屬鄭州中心醫院婦產科 河南鄭州 450007）

子宮內膜異位癥（Endometriosis,EMs）簡稱內異癥，在臨床上是一種發病率奇高的婦科疾病，其發病的病機并不明確。目前，EMs已成為婦女常見病和多發病，發病率逐年上升，所占比例超過普通婦科手術的30%[1]。發病原因有多種假說，如化生內膜、良性轉移及遺傳因素等。EMs常表現為痛經、下腹部疼痛等，對婦女健康及生活質量都產生了嚴重影響，是發生不育癥的一個主要因素[2～3]。目前，EMs的具體發病原因仍不明確，其發病多樣且廣泛，已成為當下的難治之癥[4～5]。在臨床上治療該病的方法較多，常見通過手術輔助藥物進行治療，但是效果并不理想，預后復發率較高，所以早期診斷及干預治療是提高患者生存率的有效手段。如何簡單有效地對該病進行診斷有著十分重要的臨床意義，但是一般通過單一標記物進行診斷時，其敏感性及特異性存在一定問題，本研究對血清中的ENA-78、HE4及MALAT1因子水平進行研究。現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取2017年4月～2019年10月來我院就診的EMs患者46例為觀察組，年齡25～35歲，平均（29.12±3.29）歲；平均體質量指數（23.92±1.33）kg/m2。根據美國生育學會的EMs的分期準則對觀察組患者進行劃分，輕度患者（Ⅰ～Ⅱ度）21例，重度患者（Ⅲ～Ⅳ度）25例，輕度患者與重度患者的年齡、體質量指數之間差異不存在統計學意義（P＞0.05）。另外選取同期來我院體檢的46例正常健康婦女為對照組，年齡25～36歲，平均（29.45±3.78）歲；平均體質量指數（23.55±1.69）kg/m2。觀察組與對照組的年齡、體質量指數之間差異不存在統計學意義（P＞0.05）。所有研究對象均簽署知情同意書，并經醫院醫學倫理委員會審核通過。

1.2 入組標準 （1）納入標準：經過超聲及臨床綜合檢查確診為EMs患者；依從性較好，能夠有效配合完成各項檢查的患者；患者或家屬已經簽署知情同意書者。（2）排除標準：合并有心、肝、腎等重要臟器嚴重衰竭者；各種其他對本次研究可能會產生負面作用的疾病者；自身存在免疫性或血液方面疾病者；3個月內存在激素類藥物使用史者。

1.3 觀察指標 取兩組患者清晨空腹靜脈血，離心后，取上清液，采用酶聯免疫法（ELLSA）對患者血清中ENA-78、HE4水平進行檢測。按照血清總核糖核酸（RNA）提取試劑盒的操作規范對血清中RNA進行提取，對其中轉錄因子MALAT1的含量進行測定。實驗過程包括包被、加樣、加酶標抗體、顯色劑終止反應過程，按廠家操作規范進行操作。結果判定標準[4～5]：（1）ENA-78＞1.0 ng/ml判定為陽性；（2）HE4＞42 pmol/L判定為陽性；（3）MALAT1＜0.65 U/ml判定為陽性；（4）平行聯合檢測判定，不同檢測方法中，任何一項出現陽性，即判定為陽性；（5）系列聯合檢測，幾項檢測方法均出現陽性結果時，判定為陽性。

1.4 統計學方法 數據處理采用SPSS19.0統計學軟件，計數資料以%表示，采用χ2檢驗，計量資料以（±s）表示，采用t檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組ENA-78、HE4與MALAT1水平差異 觀察組ENA-78（t=14.105，P=0.000）、HE4（t=13.355，P=0.000）顯 著 高 于 對 照 組，MALAT1因 子（t=59.321，P=0.000）水平顯著低于對照組。見表1。

表1 兩組ENA-78、HE4與MALAT1水平差異（±s）

表1 兩組ENA-78、HE4與MALAT1水平差異（±s）

組別 n MALAT1（U/ml）ENA-78（ng/ml） HE4（pmol/L）觀察組對照組tP 46 46 0.61±0.05 1.12±0.03 59.321 0.000 2.22±0.63 0.89±0.11 14.105 0.000 53.79±4.99 41.38±3.85 13.355 0.000

2.2 不同嚴重程度患者的NA-78、HE4與MALAT1水平差異 Ⅰ～Ⅱ度組患者ENA-78（t=9.930，P=0.000）、HE4（t=13.424，P=0.000）顯著低于Ⅲ～Ⅳ度組，MALAT1因子（t=40.540，P=0.000）水平顯著高于Ⅲ～Ⅳ度組。見表2。

表2 不同嚴重程度患者的NA-78、HE4與MALAT1水平差異（±s）

表2 不同嚴重程度患者的NA-78、HE4與MALAT1水平差異（±s）

組別 n MALAT1（U/ml）ENA-78（ng/ml） HE4（pmol/L）Ⅰ～Ⅱ度組Ⅲ～Ⅳ度組tP 21 25 0.74±0.02 0.50±0.02 40.540 0.000 1.10±0.36 3.16±0.96 9.930 0.000 50.67±1.33 56.41±1.57 13.424 0.000

2.3 相關性分析 采用Spearman相關性分析，對疾病的嚴重程度與NA-78、HE4與MALAT1水平進行相關性分析，患者的疾病嚴重程度與NA-78（r=0.445，P=0.000）、HE4（r=0.551，P=0.000）呈正相關，與MALAT1呈負相關（r=-0.578，P=0.000）。

2.4 聯合檢測診斷的ROC曲線分析 平行聯合檢測ROC曲線下面積分別為0.761、0.763和0.915，系列聯合檢測ROC曲線下面積為0.750、0.721和0.904，ENA-78+MALAT1診斷的ROC曲線下面積顯著高于MALAT1+HE4及ENA-78+HE4，差異具有統計學意義（P＜0.05）。見圖1。

圖1 ROC曲線分析（A為平行聯合檢測，B為系列聯合檢測）

2.4 EMs患病危險因素的多因素Logistic回歸分析多因素Logistic回歸分析顯示，ENA-78、HE4與MALAT1均是EMs發病的影響因素（P＜0.05）。見表3。

表3 子宮內膜異位癥發病危險因素的多因素Logistic回歸分析

3 討論

EMs是臨床上發病率較高的一種雌激素依賴系統疾病，發病人群多為育齡女性，患者通常會出現不規則出血、疼痛、不孕等臨床表現，比較嚴重時會對患者的生活質量造成負面影響[6]。最近幾年來，該病發病率持續走高，患者不孕概率高達50%，所以如何在患者發病時進行準確有效的診斷并開展治療，對改善患者的預后十分有必要[7～8]。目前臨床上一般通過腹腔鏡手術切除異位病灶，并在患者術后同時輔以藥物鞏固治療來減少復發。隨著醫療條件的改善和各種創新藥物的研發，該病的治療已經取得十分顯著的效果[9]。雖然臨床上認為腹腔鏡檢查診斷EMs是“金標準”，但這種檢查需要全身麻醉，在檢查期間要對患者的腹腔進行侵入性操作，對患者機體造成一定傷害，會引起副交感神經的應激反應，導致檢查后的并發癥也較多，而且檢查花費也較大，限制了推廣使用的范圍，所以應該尋找一種操作方便、特異性強、靈敏度較好的診斷方案。已有文獻報道了許多生物標志物可以用于該病的診斷，具有十分廣泛的參考價值[10～11]。

HE4是近年來發現的一種腫瘤標志物，在臨床上多用于卵巢癌的早期診斷，一般在健康人體的呼吸道、生殖系統及卵巢組織中的表達水平極低，但是在卵巢癌患者的組織和血清中均發現高度表達。隨著科學家的進一步研究發現，EMs患者血清中HE4也存在一定程度的升高[12]。ENA-78是一種炎癥介質，來源于人體的上皮細胞，作用是趨化及激活患者體內的中性粒細胞，能夠顯著促進患者體內新血管的形成，同時也能夠對異位病灶中的新生血管吻合靜脈微血管系統起到促進作用，導致患者局部出現缺血、缺氧，引發纖維化，進而加重盆腔粘連，最終出現異位作用[13～15]。研究表明，MALAT在多個腫瘤中均出現了過表達現象，如子宮內膜癌，乳腺癌及卵巢癌等多種雌激素依賴性腫瘤，MALAT7因子表達下調，能夠調節患者的上皮間質轉化，涉及惡性腫瘤的生長、遷移及侵襲過程[16～18]。由此可見，已經有文獻和臨床支持以上三個指標與卵巢癌存在密切關聯，但是與子宮異位癥的關系沒有得到進一步確定[19～20]。本研究結果發現，觀察組ENA-78、HE4水平顯著高于對照組，MALAT1水平低于對照組，P＜0.05。可以認為檢測患者血清中的ENA-78、HE4和MALAT1水平對于EMs診斷有一定參考價值。隨著分子生物學迅速發展及血管形成理論的進一步規律揭示，已經有越來越多研究顯示EMs病機與患者的血管生成過程存在密切關聯。而在本研究中，隨著疾病的嚴重程度加重，ENA-78、HE4顯著升高，MALAT1顯著降低，與以上研究相互印證。ENA-78、HE4和MALAT1與子宮內膜癥的相關關系已經十分明確，但三者聯合用于該病的診斷報道較少。平行聯合檢測ROC曲線下面積分別為0.761、0.763和0.915，系列聯合檢測ROC曲線下面積為0.750、0.721和0.904，ENA-78+MALAT1診斷的ROC曲線下面積顯著高于MALAT1+HE4及ENA-78+HE4，差異具有統計學意義（P＜0.05）。說明ENA-78、MALAT1的聯合檢測對于該病的陽性診斷有重要意義，對于該病的早期篩查有積極的作用。

綜上所述，ENA-78、HE4和MALAT1表達情況與EMs疾病進展存在相關性，而且ENA-78的診斷靈敏度最高，HE4診斷靈敏度最低，ENA-78、MALAT1的聯合檢測可以為該病臨床陽性診斷提供參考，診斷過程簡單且為非侵入式的，價值較高，值得在臨床中推廣運用。

（收稿日期：2020-12-18）