市售消炎鎮痛膏皮膚刺激性和過敏性試驗評價

鄭洋濱，劉寧，艾力奇，劉波，洪燕，任琦

1.江西省藥品檢驗檢測研究院，國家藥品監督管理局中成藥質量評價重點實驗室，江西省藥品與醫療器械質量工程技術研究中心，江西 南昌 330029；2.南昌大學第一附屬醫院，江西 南昌 330029

消炎鎮痛膏是一種含有薄荷腦、冰片、樟腦、薄荷腦、顛茄流浸膏、麝香草腦、鹽酸苯海拉明等藥物的中藥貼膏劑［1］。主要用于神經痛，風濕痛，肩痛，扭傷，關節痛，肌肉疼痛等。輔料為橡膠、氧化鋅、松香、凡士林、溶劑油等。由于橡膠膏劑透氣性較差、載藥量小，易引發皮膚過敏和刺激反應［2］。《中國藥典》并未對中藥貼膏劑進行安全性監控，為了考察其安全性，故參照國家食品藥品監督管理總局頒發的《中藥、天然藥物局部刺激和溶血性研究的技術指導原則》《中藥天然藥物免疫毒性（過敏性、光過敏反應）研究技術指導原則》，對國抽品種消炎鎮痛膏進行安全性評價試驗。為了解消炎鎮痛膏的使用安全性現狀提供數據參考。

1 試驗材料

1.1 試驗動物

新西蘭兔108 只，普通級，體質量2～3 kg，雌雄兼用，動物合格證號：NO.0001375，購于贛州市畜牧業研究所，實驗動物生產許可證號：SCXK（贛）2018-0009；豚鼠560 只，普通級，體質量250～350 g，雌雄兼用，動物合格證號：NO.43006700018725，購于長沙市天勤生物技術有限公司，實驗動物生產許可證號：SCXK（湘）：2019-0014。上述動物均飼養于江西省藥品檢驗檢測研究院普通級環境中，實驗動物使用許可證號：SYXK（贛）：2019-0001。

1.2 試驗樣品

18 家不同廠家的消炎鎮痛膏各1 批，共18 批；7 批生產原料（水楊酸甲酯、麝香草酚、顛茄流浸膏、薄荷腦、樟腦、冰片、苯海拉明）；2 批輔料（溶劑油、松香）；2,4-二硝基氯苯

2 試驗方法

2.1 試驗分組

皮膚刺激試驗：采用同體左右側自身對比法，各試驗組4 只，陰性對照物為吸收性紗布；產品說明書明確寫明不可用于破損皮膚，故未進行破損皮膚的皮膚刺激性試驗。

皮膚過敏試驗:陽性對照物為2,4-二硝基氯苯（誘導濃度：1%，激發濃度：0.1%）；陰性對照物為吸收性紗布，動物數：試驗組20 只，對照組10 只。

2.2 皮膚刺激性試驗［3-6］

2.2.1單次皮膚刺激性試驗試驗前將試驗動物背部脊柱兩側被毛剪掉，去毛范圍各為3 cm×3 cm，成品：取成品2.5 cm×2.5 cm；原料和輔料:取受試物約0.5 g 加到 2.5 cm×2.5 cm 大小的吸收性紗布塊上。用繃帶固定敷貼片4 h，另一側用吸收性紗布作為對照。在去除藥物后的第1、24、48 和72 h 肉眼觀察，并記錄給藥部位有無紅斑和水腫等情況。

2.2.2多次皮膚刺激性試驗前期步驟同單次皮膚刺激性試驗。每次去除藥物后1 h 和再次貼敷前觀察并記錄紅斑及水腫、涂敷部位是否有出血點、色素沉著、皮膚菲薄或皮膚粗糙等情況及其發生與消退時間，并對紅斑及水腫按表1 進行評分。每天敷貼一次，連續敷貼14 d。末次貼敷后，在去除藥物后1、24、48 和72 h 肉眼觀察并記錄涂敷部位有無紅斑和水腫等情況。

2.2.3皮膚刺激結果評價（1）單次給藥皮膚刺激性試驗，按表1 計算每一觀察時間點的各組受試物及賦形劑皮膚反應積分的平均分值。將受試物的皮膚反應平均分值減去賦形劑皮膚反應積分的平均分值得到原發性刺激指數。（2）多次給藥皮膚刺激性試驗，按表1 計算每個觀察時間點中各組的原發性刺激積分均值，然后計算觀察期限內每天每只動物刺激積分均值，即累積刺激指數。

表1 皮膚刺激反應評分

刺激強度評價：評分≤0.5 分為無刺激性，評分＞0.5～3 分為輕度刺激性，評分＞3～6 分為中度刺激性，評分＞6～8 分為強刺激性。

2.3 皮膚過敏性試驗

2.3.1皮膚過敏方法試驗前24 h 將豚鼠背部左側去毛，去毛范圍約為4 cm2，用75%乙醇清潔豚鼠背部去毛區，將受試物約2.5 cm2貼在每只豚鼠去毛區，以二層紗布和一層玻璃紙覆蓋,再以膠布封閉固定6 h，記第0 d。在第7 d 和第14 d 同法再給藥一次進行誘導。第28 d 將約2.5 cm2受試物貼在豚鼠背部右側2 cm2去毛區，然后用二層紗布和一層玻璃紙覆蓋，再以膠布封閉固定6 h 進行激發，6 h 后除去受試藥物并用溫水清潔給藥部位。觀察激發接觸后24 h 和48 h 皮膚反應［7-9］。

2.3.2皮膚過敏結果評價按表3 評分，當受試物組動物出現皮膚反應積分≥2 時，判為該動物出現皮膚變態反應陽性。

判定受試物的過敏強度：過敏率≤8%為弱，過敏率＞8%～28%為輕度，過敏率＞28%～64%為中度，過敏率＞64%～80%為強度，過敏率＞80%～100%為極強度。

表2 過敏反應試驗皮膚反應評分

3 試驗結果

18 批成品、7 種原料、1 種輔料均未見過敏反應。（溶劑油）動物在第一次誘導后出現死亡，在第二次誘導后動物全部死亡；18 批成品、7 種原料、1種輔料在單次皮膚刺激試驗后，均未見皮膚刺激反應。在進行14 天的多次皮膚刺激反應試驗后，4 個廠家的樣品出現輕度皮膚刺激反應，其余廠家樣品未出現皮膚刺激反應；3 種原料出現輕度和中度皮膚刺激反應；1 種輔料出現中度皮膚刺激反應。見表5。

表3 各樣品皮膚刺激及過敏反應（分）

4 討論

中藥外用為傳統中醫藥治療疾病尤其是皮膚疾病的重要手段，但近年來隨著中草藥的廣泛應用，過敏事件時有發生。橡膠膏劑中存在過敏因素，其變態、刺激反應引起皮膚過敏問題，降低了橡膠膏劑的舒適型、安全性［10-11］。

在單次皮膚刺激反應試驗中，所有成品、原料和輔料均未出現皮膚刺激反應。在皮膚過敏性試驗中，成品與原料均未出現皮膚過敏反應。其中溶劑油組動物在完成誘導試驗后動物死亡，可能是由于溶劑油揮發性較強，在誘導給藥后，動物吸入引起的中毒反應。在多次皮膚刺激試驗中發現消炎鎮痛膏中有2 種原料存在輕度的皮膚刺激反應，1 種原料和1 種輔料存在中度皮膚刺激反應。而成品中僅4 個廠家生產的消炎鎮痛膏出現輕度皮膚刺激反應，說明市售消炎鎮痛膏具有較好的安全性。

綜上所述，本次試驗中，市售消炎鎮痛膏僅在多次皮膚刺激試驗中，顯示輕度的皮膚刺激反應，具有較好的安全性。