沙門菌臨床檢驗中的全面生化反應和血清學檢驗的應用價值及準確性分析＊

文/李惠芳，王紅梅

沙門菌又名沙門氏桿菌，是一種對外界環境有著較強適應性的細菌，其通常在人和動物的腸道中寄生，若是經食物進入人體，很快（一般在4~24分鐘左右）便會引起惡心嘔吐、腹痛腹瀉等癥狀，隨著病情的發展，患者還會出現發熱、脫水、休克等表現，臨床若不及時治療，甚至可能危及患者生命[1]。為了控制患者的病情，減輕沙門菌帶來的影響，臨床需要加強對沙門菌感染的診斷。常規檢驗過于簡單，對沙門菌的檢驗缺乏足夠的特異性、敏感性和準確性，相比之下，特異性、敏感性和準確性更高的全面生化反應及血清學檢驗在沙門菌感染的診治上具有更高的價值[2]。本文選擇2020年3月~2021年3月期間收治的70例腸熱癥患者，試觀察常規檢驗、全面生化反應及血清學檢驗在沙門菌臨床檢驗中的應用效果。

1 方法及資料

1.1 研究對象

選擇2020年3月~2021年3月期間收治的70例腸熱癥患者，以便利抽樣法分組，對照組35例，研究組35例。研究組：男24例，女11例；年齡29歲~69歲，平均（49.17±11.27）歲。對照組：男23例，女12例；年齡28歲~70歲，平均（49.21±11.19）歲。將平均年齡和男女性例數等納入組間對比，P＞0.05，兩組之間可采取統計學對比。

入選標準：（1）符合腸熱癥的診斷標準：①有惡心嘔吐、水樣腹瀉等癥狀表現，發作頻率為每日3~5次；②局灶性病變的白細胞計數可達（20~30）*109/L；③排泄物中可見黏液與血液，顯微鏡下可見白細胞計數明顯增加[3]。（2）臨床資料完整；（3）近期未接受過治療；（4）均為疑似沙門菌所致感染；（5）患者對研究內容知情，且簽署自愿協議。

1.2 方法

對照組給予常規檢驗，檢測試劑選擇超氧化物歧化酶、過氧化氫酶2種。研究組給予全面生化反應及血清學檢驗，具體操作流程為：第一步，準備好檢驗的設備（天平、滅菌平皿、溫箱、顯微鏡及均質器等）和材料（由HE瓊脂和亞硫酸鉍瓊脂等瓊脂制備成的培養基、由鎂C12孔雀綠增菌液和四硫酸鈉增菌液等增菌液制備成的試劑、接種棒、酒精燈、玻璃棒、鎳絡絲等）。第二步，根據患者的病情需要，為患者采集血液、骨髓液、尿液、嘔吐物、糞便等作為標本，其中血液的采集時間應為患者入院1周后，尿液和糞便的采集時間應為患者入院2周后，骨髓液的采集時間應為患者入院3周后，若患者出于急性發作期，為避免用藥影響檢驗結果的準確性，應在患者用藥前采集尿液和糞便，且尿液需經每分鐘3000轉的速率進行離心處理，待沉淀后作為標本接受檢驗。若患者疑似為沙門菌導致的食物中毒，則應采集其進食的食物來進行檢驗。第三步，進行鑒定，沙門氏菌大多屬于A~F群，可使用A~F多價O血清進行凝集，待凝集工作全部完畢后進行血清學檢驗。凝集的過程中，先以A~F多價O血清凝集，并定群血清因子（即定群6個O群因子血清），再給予H因子血清相凝集，使第一相和第二相凝集，并將凝集結果作為判定血清型的標準。在全面生化反應實驗中，應將可疑群落先挑出來，接種到三糖鐵瓊脂中，并觀察瓊脂中發生的反應。若瓊脂出現斜面產酸，且同時存在硫化氫陰性菌株，則將其排除。需要注意的是，接種到三糖鐵瓊脂中時，應選取蛋白陳水，并將其接種到尿素瓊脂上，輔以拉氨酸脫羧酶等物質進行細菌培養，使周圍溫度在35℃～37℃之間，給予至少24小時的培養。

1.3 觀察指標

對比研究組（全面生化反應及血清學檢驗）和對照組（常規檢驗）的陽性檢出率。全面生化反應的實驗結果判定標準為：（1）陽性：液面試劑呈紅色；（2）陰性：液面試劑呈黃色[4]。血清學檢驗的結果判定標準為：（1）陽性：副傷寒沙門菌H凝集效價和傷寒沙門菌O凝集效價均不低于1:80，而H凝集效價不低于1:160；（2）陰性：未達到陽性標準[5]。

1.4 數據分析方法

數據資料的處理均使用軟件SPSS-19.0，數據類型分為計數資料、計量資料兩類，表現形式分別為n(%)和（±s），檢驗分別使用卡方值（x2）和t值。若P值在統計學計算后為＜0.05，則組間對比有顯著性差異。

2 結果

研究組的陽性檢出率為97.14%，高于對照組71.43%的陽性檢出率，統計學對比有明顯差異（P＜0.05）。見表1。

表1 檢驗結果的組間對比（n，%）

3 討論

沙門菌是非常具有代表性的腸道致病菌，其在抗原的構造與生化反應上與革蘭氏陰性桿菌有著很高的相似度，是導致食物中毒的主要原因，人體在攝入存在沙門菌的食物后將會在短時間內出現一系列明顯的癥狀表現，患者輕則嘔吐、腹瀉，重則脫水、休克，面臨生命危險[6]。但是，以上癥狀并非是食物中毒所特有的表現，且導致食物中毒的原因并非只有沙門菌感染，不同病因意味著治療方案存在很大的差異，故臨床需要明確患者的發病原因，而要實現對沙門菌感染的準確診斷，則需要為其采取科學的檢驗方法。沙門菌有多種類型，其中與人體疾病關系最為密切的類型是傷寒沙門菌，其余類型的沙門菌多與動物經有關，原因是傷寒沙門菌的生存環境溫度在35~37℃左右，與人體溫度相近，因此在攝入含有傷寒沙門菌的食物后非常容易發嚴重食物中毒，故臨床檢驗的沙門菌主要指傷寒沙門菌[7]。傷寒沙門菌所引起的疾病主要是腸熱癥，本文以腸熱癥患者作為研究對象，為其進行了沙門菌檢驗。而從結果可知，采取全面生化反應及血清學檢驗的研究組其沙門菌陽性檢出率（97.14%）高于采取常規檢驗的對照組（71.43%），可見全面生化反應及血清學檢驗對沙門菌有非常高的診斷準確性。而全面生化反應及血清學檢驗之所以有如此顯著的應用效果，原因主要是：沙門菌雖然是兼性厭氧菌，但也可在有氧和缺氧的環境中生存，當其侵入到腸道后會在其中大量繁殖，于缺氧或有氧狀態下釋放出大量的毒素，誘導外膜蛋白、過氧化氫酶與超氧化物歧化酶等抗氧化酶過量表達（缺氧狀態下傷寒沙門菌的毒性要高于有氧狀態下），臨床可以通過常規檢驗來測定超氧化物歧化酶、過氧化氫酶含量，進而判斷患者是否發生沙門菌感染，但需要注意的是，常規檢驗雖能檢驗一定比例的沙門菌，但該方法易受到外界因素的影響，因此準確性較為一般[8]。而全面生化反應及血清學檢驗中的全面生化反應試驗主要是培養可疑的菌落再觀察液面顏色，血清學檢驗則是凝集可疑菌落和抗體并觀察是否有顆粒沉淀，二者聯合不僅可以減少外界因素帶來的干擾，還可以顯著提高對沙門菌感染的陽性檢出率，因此在沙門菌臨床檢驗中有比常規檢驗顯著得多的診斷準確性；并且，全面生化反應及血清學檢驗操作簡單、經濟性高，這一點也提高了該方法在沙門菌檢驗中的應用價值[9]。將本文中采取全面生化反應與血清學檢驗的研究組97.14%的陽性檢出率與姜少霞[10]研究報告《全面生化反應與血清學檢驗在沙門菌臨床檢驗中的作用分析》中同樣采取全面生化反應與血清學檢驗的研究組91.67%的陽性率進行對比，二者較為相近，可見本研究結果結論真實可靠。

最后，沙門菌檢驗需要注意如下幾點：（1）生化反應主要檢驗純培養物，若血清學檢驗結果呈陽性但生化試驗結果為陰性，則要純化接種物再進行檢驗；（2）無論采取哪種檢驗方法，沙門菌的分離菌與陽性對照菌均有可能對周圍環境造成一定污染，在進行菌株分離、增菌和血清凝集的過程中，必須要做好器具的清洗和消毒工作、對檢驗人員的保護工作，以免病菌擴散，引發感染。

4 結語

相較于常規檢驗，在沙門菌臨床檢驗中的全面生化反應及血清學檢驗具有更高的診斷準確性，其臨床應用價值更高，故應該被更積極地推廣開來。