李亮亮, 楊文玲, 杜志敏, 甄 靜, 王繼雯
(河南省科學院生物研究所有限責任公司/河南省微生物工程重點實驗室,鄭州 450008)
花生白絹病是枯萎型真菌病害,發生范圍廣泛,曾對美國[1]、阿根廷[2]、印度[3]、日本[4]等國家的花生產業造成巨大的經濟損失,該病病原菌的無性世代是齊整小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc.),有性世代為羅氏阿太菌(Athelia rolfsii)[5]. 該病菌寄主范圍廣泛,能侵染花生、辣椒、油茶、白術等植物,是一種危害嚴重的土傳真菌[6-9]. 我國各大花生產區都有白絹病的發生,尤其以北方地區危害最為嚴重[10]. 2004年,山東省臨沂市白絹病發病面積達60 000 hm2,造成直接經濟損失9000萬元[11]. 2010年,河南中牟、登封、汝南等花生產區白絹病大爆發,有些地塊花生白絹病發病率高達80%,造成了嚴重的經濟損失[12]. 本研究從河南省汝南縣花生病株上分離白絹病的病原菌,對其進行了菌種鑒定,同時研究了病原菌的生物學特性和室內抗病高效藥篩選,以期為白絹病的防治研究提供理論依據.
2019年8月在河南省駐馬店市汝南縣花生產區采集具有白絹病典型癥狀的花生植株,小心收集莖稈基部的菌核帶回實驗室進行病原菌分離. 病原菌的分離采用菌核分離法和組織分離法.
菌核分離法:將收集到的菌核用75%乙醇處理30 s,30%次氯酸鈉處理2 min 進行表面消毒,無菌水沖洗. 將消毒后的菌核放在無菌環境中自然風干,置于PDA培養基(200 g新鮮馬鈴薯去皮煮汁,葡萄糖20 g、瓊脂粉20 g、蒸餾水1000 mL)在25 ℃培養箱內培養至……