新疆3種甘草根際土壤叢枝菌根真菌群落的多樣性分析

高甜甜，王仲科，賀亞玲，李桂芳，呂新華，莊 麗

(石河子大學 生命科學學院，新疆石河子 832003)

甘草為多年生草本，是荒漠地區優良的先鋒植物。甘草的根及根莖可入藥，是中國最大宗的常用中草藥之一，具有補脾益氣、祛痰止咳、清熱解毒、緩急止痛、調和諸藥之功效。中國甘草資源主要分布在西北干旱區域的溫帶荒漠區域和溫帶草原區域，隨著氣候帶的延伸，呈東西長，南北窄的帶狀分布。據《新疆植物檢索表》記載，中國甘草屬有 10 種，新疆有 6 種，其中被列入《中國藥典》的有烏拉爾甘草 (GlycyrrhizauralensisFisch.)、脹果甘草 (GlycyrrhizainflataBat.) 和光果甘草 (GlycyrrhizaglabraL.)。烏拉爾甘草在華北、東北、西北地區均有分布，脹果甘草在新疆主要分布于天山以南，光果甘草分布面較窄，蘊藏量也較小，集中分布于新疆天山南北坡水源較充足的地方。甘草是新疆荒漠區最主要的植被物種之一，分布面積廣，貯量大，在干旱脆弱的生態環境中起著防風固沙、保持水土、調節氣候等重要生態作用。近年來隨著國際市場對甘草的需求量劇增，但栽培甘草產量、品質不佳，供需矛盾日益激烈。

目前關于甘草根際 AM 真菌的研究不夠充分，因 AM 真菌不能被離體純培養，而且具有高變異性等。隨著高通量測序技術的發展，高通量測序可以分析相應環境條件下微生物群落的多樣性和分布規律。本研究以新疆北部地區的烏拉爾甘草、脹果甘草和光果甘草的土壤樣本基因組DNA 為模板進行 PCR 擴增，并采用高通量測序方法初步分析3種甘草根際 AM 真菌群落結構及其多樣性。以探討甘草根際AM真菌群落在種間的變化，根際土壤 AM 真菌與土壤因子之間的關系，為提高人工種植甘草的產量與質量提供理論基礎。使甘草能更好地服務于農牧業與環境保護。

1 研究方法

1.1 研究區概況

研究區域位于新疆維吾爾自治區哈密市，地處91°06′33″～96°23′00″E，40°52′47″～45°05′33″N之間，海拔53～4 886 m。哈密屬典型的溫帶大陸性干旱氣候，干燥少雨，晴天多，年平均氣溫 9.8 ℃，極端最高氣溫 43 ℃，極端最低氣溫 -32 ℃，年最大日較差 26.7 ℃，年降水量 33.8 mm，年蒸發量 3 300 mm，年均日照 3 358 h，無霜期 182 d。

1.2 樣本采集

于 2019 年 5 月進行實地調查，隨機選擇3個5 m×5 m 且甘草生長狀況良好的取樣區，樣地均沿河流分布，間隔 10 km以上，土壤質地不一。2019年 8 月，每個樣方隨機選擇3株健康甘草進行采挖。烏拉爾甘草根際土壤采集于荒漠公路旁的沙質土中，伴生種為蒿類、狗尾草、檉柳等。脹果甘草根際土壤采集于田埂旁的水渠邊，伴生種為沙棗、駱駝蓬等。光果甘草根際土壤采集于林場公路旁礫石質土中，伴生有蘆葦等。將采集甘草主根附近 0.5 cm 范圍內、0～20 cm、20～40 cm、40～60 cm 土層的根際土壤裝入 5 mL 離心管，保存于液氮罐中，用于提取甘草根際 AM 真菌。收集根系周圍 5 cm 左右，0～20 cm、20～40 cm、40～60 cm 土層的土壤，采用對角線四方法取約 500 g，部分用于測定土壤理化性質，其余的保存在實驗室中。

1.3 土壤理化性質的測定

取自然干燥的土壤，通過 100 目篩進行篩選，測定土壤的理化性質。測定方法參考鮑士丹主編的《土壤農用化學分析》。采用自然空氣干燥法測定土壤含水量(SWC)；土壤 pH 值采用 pH-25 計測定，土水比為 2.5∶1；用重鉻酸鉀外加熱法測定土壤有機質含量(OSC)；采用酸鉬銻比色法、安捷倫 CARY60 紫外分光光度法測定總磷(TP)；用 Thermo Scientific S 系列原子吸收光譜儀進行酸-原子吸收法測定總鉀(TK)；速效磷(AP)用碳酸氫鈉萃取-鉬銻比色法測定，速效鉀(AK)用醋酸銨萃取-原子吸收法和 Thermo Scientific S 系列原子吸收光譜儀測定；采用干渣法測定總鹽(TS)。

1.4 土壤 DNA 提取和檢測

使用 E.Z.N.A.土壤 DNA 試劑盒 (Omega Bio-tek,Norcross,GA,USA) 提取土壤總 DNA。用 1% 瓊脂糖凝膠電泳檢測提取的基因組 DNA，用 NanoDrop 2000 UV-vis 分光光度計測定 DNA 濃度和純度。

1.5 PCR 擴增

用引物 AMV4-5NF (5′-AAGCTCGTAGTTGAATTTCG-3′) 和 AMDGR(5′-CCCAACTATCCCTATTAATCAT-3′) 對 AM 真菌功能基因的高變區 V4-V5 進行擴增。擴增步驟為:95 ℃ 預變性 3 min，95 ℃ 變性 30 s，55 ℃ 退火 30 s，72 ℃ 延伸 45 s，進行 32 個循環，最后 72 ℃ 延伸 10 min。擴增體系20 μL，4 μL 5×FastPfu 緩沖液，2 μL 2.5 mmol/L dNTPs，正、反向引物0.8 μL (5 μmol/L)，0.4 μL FastPfu聚合酶，2 μL BSA，10 ng DNA模板，PCR 儀使用 ABI Geneamp9700 型。將同一樣本的 PCR 產物混合后用 2% 瓊脂糖凝膠電泳檢測，使用 AxyPrep DNA 凝膠回收試劑盒 (AXYGEN公司) 進行切膠回收，Tris-HCl 洗脫。將 PCR 產物進行純化，并用 Promega 公司的 QuantiFluorTM-ST 藍色熒光定量系統進行定量，之后按照每個樣本的測序量要求，進行相應比例的混合。每個樣本 3 個重復。

1.6 Miseq 文庫的構建和測序

將同一樣本的 PCR 產物混合后使用2%瓊脂糖凝膠回收 PCR 產物，利用AxyPrep DNA Gel Extraction Kit (Axygen Biosciences,Union City,CA,USA) 進行回收產物純化，2%瓊脂糖凝膠電泳檢測，并用QuantusTMFluorometer (Promega,USA)對回收產物進行檢測定量。使用NEXT-

FLEX?Rapid DNA-Seq Kit進行建庫:(1)接頭鏈接；(2)使用磁珠篩選去除接頭自連片段；(3)利用PCR擴增進行文庫模板的富集；(4)磁珠回收PCR產物得到最終的文庫。利用Illumina公司的Miseq PE300平臺進行測序(Illumina MiSeq 測序委托上海美吉生物醫藥科技有限公司完成)。

1.7 生物學信息分析

將獲得的所有 AM 真菌活性基因序列按照其特有的條形碼序列分配到每個樣品中，使用 FLASH、Trimmomatic 軟件過濾掉無兩種通用引物序列且平均質量值<30的序列，進行數據去雜和質控過濾，得到優化數據。使用UPARSE (version 7.1,http://drive5.com/uparse/)在相似度為97%的水平上進行OTU聚類，使用UCHIME對嵌合序列進行識別和去除。使用RDP分類器(http://rdp.cme.msu.edu/)在 MaarjAM (https://www.maarjam.botany.ut.ee/) 18S rRNA數據庫上對每個OTU代表序列進行物種注釋分析，在各分類水平上統計 AM 真菌群落組成，置信閾值為70%。

1.8 統計學分析

土壤理化性質使用 SPSS進行分析。Circos 樣本與物種關系圖是描述樣本與物種之間對應關系的可視化圈圖，使用Circos-0.67-7 (http://circos.ca/)繪制。3種甘草根際土壤AM 真菌 LEfSe (linear discriminant analysis effect size) 分析圖使用LEfSe 在線分析平臺繪制(http://huttenhower.sph.harvard.edu/galaxy/root?tool_id=lefse_upload)，根據分類學組成對樣本按照不同的分組條件進行線性判別分析(LDA)，找出對樣本劃分產生顯著性差異影響的群落或物種。單因素相關性網絡在95%置信度水平下通過計算物種之間的相關性，構建出物種相關性網絡，使用Networkx網絡分析工具包。選擇97%相似度的OTU，利用mothur計算不同隨機抽樣下的Alpha多樣性指數，計算ACE指數、Chao指數、Sobs指數、Shannon指數、Coverage 指數等多樣性指數，并使用Student’s 檢驗(Student’s t test) 進行組間差異檢驗，分析環境中微生物群落的豐富度和多樣性。利用R語言制作稀釋曲線圖。PCoA分析(Principal co-ordinates analysis)，是一種非約束性的數據降維分析方法，可用來研究樣本群落組成的相似性或差異性，使用R語言PCoA統計分析和作圖。冗余分析(Redundancy analysis,RDA)是根據每個樣品中檢測到的OTUs的相對豐度，識別環境因素對群落的影響，利用R語言vegan包中的RDA 分析和作圖。相關性熱圖分析使用Spearman等級相關系數計算環境因子與物種之間的相關性系數并通過Heat map圖直觀展示，使用R語言的pheatmap包。除特別說明外，所有微生物群落相關分析均以每個樣品OTUs的相對豐度為基礎。

2 結果與分析

2.1 3種甘草根際土壤理化性質

由圖1可知，土壤參數在不同甘草和不同土層下存在差異。3種甘草根際土壤pH 值均在8.3(8.31～8.84)以上，為堿性土。TS含量在1.0～12.4 g/kg之間，光果甘草TS含量均值顯著高于其他甘草(P<0.05)。脹果甘草的土壤OSC、TP、TK顯著高于光果甘草與烏拉爾甘草(P<0.05)。AK在3種甘草間存在顯著差異(P<0.05)。除pH值外，OSC、TK等在3種甘草間均存在顯著性差異，多數土壤理化性質在同種甘草的不同土壤深度中無顯著差異，或可理解為土壤理化性質受植物種類的影響比土層深度更大。不同甘草的40～60 cm處存在顯著差異的土壤理化性質指數較多，在0～20和40～60 cm處存在顯著差異的主要是OSC、AK、SWC。

gla.光果甘草；ura.烏拉爾甘草;inf.脹果甘草;1.0～20 cm;2.20～40 cm;3.40～60 cm;下同。*、** 和***分別表是0.05、0.01和0.001水平差異顯著。A-C.種間差異;D-E.土層間差異圖1 3種甘草根際土壤理化性質分析gla.Glycyrrhiza glabra；ura.Glycyrrhiza uralensis;inf.Glycyrrhiza inflata;1.0-20 cm;2.20-40 cm;3.40-60 cm;The same as below.*,** and *** showed significant differences at 0.05,0.01 and 0.001 levels,respectively.A-C.The difference between three licorice;D-E.The difference between different soil layersFig.1 Analysis of physical and chemical properties of soil in rhizosphere of three glycyrrhizae

2.2 3種甘草根際土壤AM真菌群落結構

基于分子水平上，本實驗共分離到1 門1 綱5 目5 科5 屬34種AM真菌，甘草種間的AM 真菌群落結構不同，但種內不同土壤深度的群落結構較為一致。根據物種注釋結果進行門、屬水平的豐度統計，結果(圖2)表明：球囊菌門(Glomeromycota)為絕對優勢門，優勢屬為球囊霉屬(Glomus)和類球囊霉屬(Paraglomus)。球囊霉屬在烏拉爾甘草和光果甘草中的豐度較高，在脹果甘草中相對豐度較少，而類球囊霉屬在脹果甘草中的豐度較高，在烏拉爾甘草和光果甘草中相對豐度較少。

對3種甘草根際土壤AM真菌群落在屬水平上進行LEfSe分析(圖3)和進化分支分析(圖4)。以揭示3種甘草根際AM真菌群落結構差異物種的空間分布特征以及不同差異物種的進化分枝情況。

A.基于門水平的種間;B.基于屬水平的種間;C.基于門水平的層間;D.基于屬水平的層間圖2 3種甘草根際土壤AM 真菌群落組成結構A.Different species based on phylum level;B.Different species based on genus level;C.Different layers based on phylum level;D.Different layers based on genus levelFig.2 Community structure of AM fungi in the rhizosphere of three Licorice

A.基于屬水平;B.基于種水平圖3 3種甘草根際土壤AM 真菌 LEfSe 分析A.Based on genus level;B.Based on species levelFig.3 Histogram based on LEfSe analysis of three Licorice rhizosphere soil AM fungi

LEFSe分析結果顯示，脹果甘草的顯著性差異物種有6個，且均為球囊菌綱，烏拉爾甘草有3個(g_Paraglomus、o_Paraglomerales等)，但不同土壤深度間未分析出差異物種。在種水平上的LEfSe分析顯示(圖3，B)，脹果甘草的顯著性差異物種有10個(s_unclassified_g_Paraglomus、s_Glomus_viscosum_VTX00063等)，烏拉爾甘草有8個(s_unclassified_c_Glomeromycetes、g_unclassified_c_Glomeromycetes等)，光果甘草有2個(S_Glomus_Mo_G7_VIX00199、s_unclassified_g_Glomus_f_Glomeraceae)，不同土壤深度間未分析出差異物種。結果表明3種甘草根際AM真菌群落種間差異顯著。通過 Networkx 軟件在種水平對3種甘草根際AM真菌的物種豐度信息進行相關性分析，結果(圖5)顯示，種間3 個樣本共有的種群數目為 10 個(圖5,A)，s__unclassified_g__Glomus_f__Glomeraceae (10306.22222)種為 3 個樣本共有且占絕對優勢，權重值為 30 931。不同種間和不同土壤深度間9個樣本共有的種群數目為 5 個(圖5,B)s__unclassified_g__Glomus_f__Glomeraceae 種為 9 個樣本共有且占絕對優勢，權重值為 30931。烏拉爾甘草擁有最多的網絡節點，光果甘草與脹果甘草共同節點最多，光果甘草與烏拉爾甘草的共同節點最少。

A.基于屬水平;B.基于種水平圖4 3種甘草根際土壤AM 真菌 LEfSe 分析進化分支圖A.Based on the genus level;B.Based on the species levelFig.4 Cladogram based on LEfSe analysis of three Licorice rhizosphere soil AM fungi

A.種間;B.層間圖5 3種甘草根際土壤AM 真菌樣本與物種共線性網絡分析圖A.Based on species level;B.Different soil layers based on genus levelFig.5 Co-occurrence network of AM fungi in three licorice rhizosphere soils

基于OTU 的稀釋曲線圖6 3種甘草根際土壤 AM真菌的稀釋曲線The dilution curve of the three licorice rhizosphere soil based on OTUFig.6 The dilution curves of the three licorice rhizosphere soil samples

2.3 甘草根際AM真菌多樣性

微生物群落的Alpha多樣性主要與豐富度和多樣性兩個因素有關，群落豐富度的指數主要包括Chao1指數和ACE指數，兩指數值越高，表明微生物群落的物種豐富度越高。群落多樣性的指數主要包括Shannon指數和Simpson指數，Shannon指數越高表明群落的多樣性越高,Simpson指數與之相反。Coverage是指各樣品文庫的覆蓋率。

本研究共獲得1 258 294條原始序列，篩選后共獲得629 147個有效序列，215個OTU。稀釋性曲線圖(圖6)顯示，3種甘草根際土壤樣品的稀釋性曲線均趨于平坦，表明各組土壤AM真菌的測序數據量合理。由表1可以看出所有樣品的Coverage指數均在99%以上,說明土樣中基因序列被檢出的概率很高，能夠較為全面地反映3種甘草根際土壤AM真菌群落的種類和結構。Chao1、ACE豐富度指數以及Shannon和Simpson多樣性指數分析結果表明，烏拉爾甘草根際土壤AM真菌多樣性顯著高于光果甘草(P<0.05)；脹果甘草和脹果甘草根際土壤AM真菌ACE指數顯著高于光果甘草(P<0.05)，脹果甘草根際土壤AM真菌CHAO指數顯著高于光果甘草(P<0.05)。但3種甘草根際AM真菌多樣性指數和豐富度指數在土壤深度間沒有顯著差異。

表1 3種甘草根際土壤AM 真菌多樣性差異分析Table 1 Mean values of soil parameters under three host plants in the different soil depth

主坐標 PCOA 分析(圖7)顯示，第 1 軸和第 2 軸解釋了AM真菌群落組成差異的32.41%，第 1 軸解釋了18.3%，第 2 軸解釋了14.11%。3種甘草之間的AM真菌群落完全分開，同種甘草在不同土壤深度之間有部分重疊，烏拉爾甘草在軸2上與光果甘草、脹果甘草完全分開，這表明植物種類對根際AM真菌群落的影響程度高于土壤深度，光果甘草和脹果甘草根際AM土壤的真菌群落相似度高于烏拉爾甘草與脹果甘草和光果甘草。

圖7 3種甘草根際土壤AM 真菌主坐標PCOA分析Fig.7 The principal coordinate analysis of AM fungi under three licorice rhizosphere soil

2.4 甘草根際土壤理化性質與根際AM真菌之間的相關性

利用土壤理化性質與AM真菌群落進行冗余分析(RDA,圖8)，表明AM真菌群落受土壤理化性質影響的程度不同，其中，RDA分析第1、2軸總共解釋了80.09%的群落變化，RDA1解釋了66.55%，RDA2解釋了13.54%。土壤總磷(r=0.536 6)、有機質(r=0.483 3)、速效磷(r=0.472 5) 是對各甘草土壤AM 真菌屬水平群落的分布起主要影響的土壤理化因子，土壤含水量(r=0.021) 對AM 真菌屬水平群落分布影響最弱。土壤理化性質之間也存在相關性，其中土壤pH 值與多數土壤理化性質的值均呈負相關關系，這個符合先前的研究，土壤pH 值的增加會限制養分的有效性[14]。

不同顏色的點代表不同的甘草品種，每個點代表一個樣品，共27個樣品。8個紅色箭頭代表的是OSC、TK、AP、TS、AK、TP、SWC、pH等環境因子圖8 甘草根際AM真菌與土壤理化性質的RDA分析The different colored dots represent different licorice varieties,each dot represents a sample,a total of 27 samples.The 8 red arrows represent environmental factors such as OSC,TK,AP,TS,AK,TP,SWC,pHFig.8 Redundancy analysis of physical and chemical properties of AM fungi in rhizosphere of Licorice root and soil

*.P<0.05，**.P<0.01，***.P<0.001紅色表示正相關，藍色表示負相關圖9 3種甘草根際土壤AM 真菌優勢屬與土壤理化性質相關性分析*.P<0.05,**.P<0.01,***.P<0.001.Red is a positive correlation,blue is a negative correlationFig.9 Correlation analysis between dominant genus of AM fungi and soil physical and chemical properties

土壤理化性質對土壤微生物群落結構有直接或間接的影響，95%顯著性水平下對樣本屬分類水平的優勢物種構建環境因子與物種間的Heat map圖。分析結果(圖9)顯示：球囊霉屬與總磷(TP)極顯著正相關(P<0.01)，與總鉀(TK) (P<0.001)、有機質含量(OSC)(P<0.01)極顯著負相關。類球囊霉屬TP(P<0.05)顯著負相關，與TK(P<0.001)、總鹽(TS)(P<0.01)極顯著正相關，與OSC(P<0.01)極顯著正相關。Diversispora與TP(P<0.05)顯著正相關，與速效磷(AP)(P<0.01)、TS(P<0.05)極顯著負相關。

3 討 論

本研究使用測序技術首次探討了新疆地區藥用甘草根際AM真菌的群落結構及多樣性，共獲得1 258 294條原始序列，篩選后共獲得629 147個有效序列，215個OTU，表明甘草根際土壤中蘊含著豐富的 AM真菌資源。研究顯示球囊霉屬在荒漠和草原等土壤生態系統中是優勢屬[15]；球囊霉屬和無梗囊霉屬在紫背天葵根系土壤中是優勢屬[16]；贛州柑橘根系內生AMF群落的優勢菌屬是球囊霉屬，占總AMF數的78.75%[17]；內蒙古中部地區馬鈴薯根際和根系中球囊霉屬是馬鈴薯不同發育階段根際土中的優勢類群[18]。在本實驗中Glomeromycota為絕對優勢門，優勢屬為球囊霉屬、類球囊霉屬，與前人的研究結果較為一致。近年來，關于植物根際環境微生物的網絡分析尚未廣泛應用于探索微生物類群之間的共生模式，本研究物種相關性網絡顯示:AM真菌連接節點最多的是s__Glomus-MO-G23-VTX00222、s__Glomus-MO-G22-VTX00125等5個種，可以認為是關鍵種。研究表明，通過網絡中微生物間的相互作用可以推測[19-21]，處于互利共生關系的微生物呈正相關關系，而處于競爭關系的微生物呈負相關關系。Paraglomus與Glomus的屬內處于互利共生關系[22]，而屬間處于競爭關系[23]，AM真菌核心種除s__Paraglomus-Glom-1B.13-VTX00308 與s__Glomus-MO-G13-VTX00115、s__Glomus-MO-G3-VTX00113 處于競爭關系外，其余均處于互利共生關系。

AM 真菌的多樣性和豐富度在三種甘草中存在顯著差異，脹果甘草的豐富度和多樣性均處在最低，可能是由于光果甘草根際土壤中的有機質含量較少，而有機質有助于AM 真菌的生長[24]。PCOA分析顯示三種甘草之間的AM真菌群落完全分開，同種甘草在不同土壤深度之間有部分重疊，烏拉爾甘草在軸2上與光果甘草、脹果甘草完全分開，這表明脹果甘草和光果甘草的相似性更高，且寄主植物對根際AM真菌群落結構有顯著影響。AM 真菌與植物的共生關系有一定的選擇性[25]，所以不同宿主植物根圍 AM 真菌群落不同[26-27]。如張美慶等[28-29]等發現 AM 真菌的物種多樣性在野生植物上高于栽培植物。賀學禮等[26]發現AM真菌空間分布與植物種類密切相關。AM真菌的多樣性和豐富度在不同土壤深度間也存在差異，總體而言，20～40 cm處的豐富度和多樣性指數較高，40～60 cm處的偏低，這可能是由于AM真菌為好氧性真菌，其生長發育均需要一定的氧氣，而深層土中氧的可獲得性較低。

研究表明，植物根際AM真菌群落組成及物種多樣性與土壤磷含量[30]、土壤有機質含量[31]等多種環境因子有關，其中土壤磷濃度認為是影響群落結構的主要因素[30,32]。Tawaraya 等[33]認為是因為土壤中磷濃度較高時宿主植物根系分泌物的成分發生了變化，土壤中磷濃度較高可能會導致AM 真菌物種多樣性降低[34]。本研究中，土壤有機質OSC與AM真菌并未表現出明顯的相關性，但有研究指出，在一定范圍內隨著土壤有機質含量的增加,AM真菌數量就越多；當超過一定范圍時，不利于AM真菌的生長發育，AM真菌的數量就會減少[35]。土壤有機質對AM真菌表現出的促生可能是因為AM真菌在土壤中有一定的腐生性，土壤中的有機質可以作為保存菌絲的基質，所以有機質豐富的土壤可以促進AM真菌的生長[36]。

有研究指出，植物根際的AM真菌的侵染率與土壤含鹽量呈顯著負相關[37]，但也有人認為AM真菌孢子密度與土壤鹽度無關[38]，一般認為鹽分對AM真菌的影響主要是間接作用，如Na+可以影響速效鉀進而間接地降低AM真菌的孢子密度，或通過影響其他的土壤因子來間接地增加AM真菌的孢子密度[39-40]。本研究中，類球囊霉屬與總鹽極顯著正相關表明其對鹽的耐受性較強，而類球囊霉多發現于脹果甘草中，這或許與脹果甘草耐鹽堿能力強有關。

本研究中土壤含水量對AM真菌的影響較小，土壤含水量可以影響植物根系和 AM真菌的生長發育，有研究認為，AM真菌與土壤含水量呈負相關，原因可能是隨著土壤含水量的下降，植物需要依賴更多的AM真菌來增強自身對于干旱環境的適應性[41]，而在合適的范圍內，AM真菌隨土壤含水量升高而遞增[42]，AM真菌是好氧性真菌，在土壤含水量較高時，土壤通氣性降低，影響AM真菌的生長[43]。

4 結 論

本實驗共分離到1 門1 綱5 目5 科5 屬34種AM真菌，球囊菌門為絕對優勢門，優勢屬為球囊霉屬和類球囊霉屬，該2個優勢屬屬內處于互利共生關系，而屬間處于競爭關系。s__Glomus-MO-G23-VTX00222、s__Glomus-MO-G22-VTX00125等5個種，可以認為是關鍵種。3種甘草根際AM真菌群落結構多樣性及土壤理化性質在種間的差異較為顯著，但是在不同土壤深度間差異不顯著，脹果甘草和光果甘草的相似性更高，烏拉爾甘草與光果甘草的相似性較低。土壤理化性質均對甘草根際AM 真菌產生一定的影響，其中總磷、總鉀與球囊霉屬和類球囊霉屬均有極顯著的相關性，有機質與2個優勢屬有顯著的相關性。不同AM真菌屬與土壤理化性質之間的相關性各有不同。