梅毒螺旋體酶聯免疫吸附試驗和梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗及梅毒螺旋體明膠顆粒凝集確證試驗在梅毒血清學檢測中的應用價值分析

何小霞 馮月平

近些年來隨著人們生活方式和理念的改變,梅毒感染患者越來越多,嚴重威脅患者的健康,影響患者的生活質量［1］。梅毒的檢驗主要通過血清學檢測,臨床上比較常用的方法包括TP-ELISA、TRUST、TP-PA等,其中TP-PA作為診斷金標準,但由于操作繁瑣,耗時較長,檢驗試劑成本較高,在基層難以普及［2］。為探索梅毒血清學檢測更好的方法,本院選取部分疑似梅毒血清樣本進行研究,具體內容報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月～2020年6月本院116份疑似梅毒血清樣本作為研究對象,其中男69份,女47份；年齡1～90歲,平均年齡(48.5±16.6)歲。

1.2 方法

1.2.1 檢驗設備與試劑 檢驗設備：深圳華科瑞HR801自動酶標儀,PW960洗板機,振蕩器,恒溫箱。檢驗試劑：ELISA試劑盒和TP-PA試劑盒均購自珠海麗珠試劑有限公司,TRUST試劑購自上海榮盛生物技術有限公司。

1.2.2 檢驗方法 對116例患者空腹抽血5 ml,4000 r/min離心5 min分離血清,送檢,若不能及時檢測,可將其置于4℃冰箱保存,以備后用。分別采用ELISA、TRUST以及TP-PA對血清樣本進行檢測,所有操作步驟均嚴格按照試驗規范與試劑說明書進行。TP-ELISA應用雙抗原夾心酶聯免疫吸附試驗原理,檢測人血清或血漿中的梅毒螺旋體抗體。TRUST檢測血清中的抗類脂質抗體也就是梅毒非特異度抗體。TP-PA目前作為梅毒血清學檢測的金標準。

1.3 觀察指標 統計并記錄TP-ELISA、TRUST、TP-PA的檢測結果,以TP-PA作為金標準計算TPELISA和TRUST檢測的敏感度、特異度及準確率等,并作對比。

1.4 統計學方法 采用SPSS22.0統計學軟件進行數據統計分析。計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 TP-ELISA與TP-PA檢測結果 116份血清樣本,TP-PA檢測結果顯示陽性101份,陰性15份；TPELISA檢測結果顯示陽性100份,陰性16份。見表1。

2.2 TRUST與TP-PA檢測結果 116份血清樣本,TP-PA檢測結果顯示陽性101份,陰性15份；TRUST檢測結果顯示陽性76份,陰性40份。見表2。

2.3 ELISA與TRUST檢測的敏感度、特異度、準確率比較 TP-ELISA檢測的敏感度、特異度及準確率均高于TRUST,差異具有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表1 TP-ELISA與TP-PA檢測結果(份)

表2 TRUST與TP-PA檢測結果的統計結果(份)

表3 ELISA與TRUST檢測的敏感度、特異度、準確率比較(%)

3 討論

梅毒是由蒼白螺旋體所引起的一種性傳播疾病,隨著患病率的增加,已成為社會廣泛關注的公共衛生問題［3］。梅毒的主要傳播途徑是性接觸傳播,也可通過血液和胎盤傳播,一旦患病會累及到全身的組織和器官,嚴重的并發癥會危及患者的生命安全。由于梅毒傳染快速,傳播力強,且發病率有顯著上升趨勢,臨床提倡早發現、早治療,有效、快速、準確的檢查在梅毒的診斷與治療中具有重要意義［4］。

梅毒的診斷主要依靠血清學檢測,TP-PA是目前臨床中公認的準確率較高的檢測方法,但其使用的試劑盒價格較為昂貴,且操作相對復雜,檢測過程耗時較長,臨床上難以將其作為常規的梅毒篩查項目廣泛開展［5］。根據對梅毒病理特點的分析發現,感染梅毒螺旋體后可產生較多抗體,主要是非特異性反應素和抗梅毒螺旋體特異性抗體。TRUST用于檢測非特異性抗體,但非特異性抗體出現較晚,一般在硬下疳出現4周后才能檢出,對早期梅毒檢出率低,對神經梅毒也不敏感,敏感性較低,常出現假陰性而漏檢。TP-ELISA是利用基因重組工程合成抗原,檢測血清中的梅毒特異性抗體,在梅毒的潛伏期即產生,約在感染后2周,對梅毒的早期輔助診斷較好；同時TP-ELISA試劑成本低,操作方便,可使用全自動或半自動酶標儀,原始數據易于保存,是大批量標本梅毒篩查的理想方法［6］。根據林盛紅等［7］研究發表的《三種梅毒血清學檢驗方法在梅毒檢測中的應用》中報道,為了提高梅毒的檢出率和正確率,TP-ELISA是門診及住院人群篩查梅毒的首選方法,但梅毒患者可同時采用TRUST 方法監測治療效果。郭姝君等［8］研究發表的《酶聯免疫吸附法與甲苯胺紅不加熱血清試驗在梅毒檢驗中應用價值比較》中報道,TP-PA和ELISA檢測方法結果基本一致,檢出率均優于TRUST,對于TRUST檢測為陰性的血清標本建議做TP-PA確認實驗,以排除假陰性。本院為探索梅毒血清學檢測更好的方法,選取部分疑似梅毒血清樣本進行對照研究,研究結果顯示,116份血清樣本,TP-PA檢測結果顯示陽性101份,陰性15份；TPELISA檢測結果顯示陽性100份,陰性16份。116份血清樣本,TP-PA檢測結果顯示陽性101份,陰性15份；TRUST檢測結果顯示陽性76份,陰性40份。TP-ELISA檢測的敏感度98.02%、特異度93.33%及準確率97.41%均明顯高于TRUST的69.31%、60.00%、68.10%,差異具有統計學意義(P<0.05)。

綜上所述,TP-ELISA與TP-PA對梅毒血清樣本檢測結果基本一致,檢出率明顯高于TRUST,值得臨床推薦。