乙型肝炎病毒感染相關肝纖維化程度與脂聯素及Th17/Treg平衡的關系

董璐 薛煥利 何瑾瑜△ 曹雅靜 楊躍青

(陜西省中醫醫院，(1.肝病科；(2.檢驗科，陜西 西安 710003)

臨床研究[1-2]顯示，乙型肝炎病毒(HBV)感染患者其臨床結局與患者機體免疫機制密切相關，尤其對于T淋巴細胞，最為常見的為Th1/Th2細胞失衡學說。有研究[3]顯示，脂聯素具有著抑制肝纖維化的作用，但是目前仍缺乏脂聯素與HBV感染肝纖維化相關性。本文主要探討分析乙型肝炎病毒感染相關肝纖維化程度與脂聯素及Th17/Treg平衡的關系。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選擇2018年1月至12月我院收治的HBV感染患者127例，根據患者肝彈性值(LSM)將患者分為輕度組(LSM<9.7 kPa)55例、中度組(9.7 kPa≤LSM<17.5 kPa)41例、重度組(LSM≥17.5 kPa)31例。輕度組中，男30例、女25例，年齡(33.18±7.32)歲，病程(2.31±0.45)年，體重指數(20.83±3.15)kg/m2，有乙肝家族史者23例；中度組中，男24例、女17例，年齡(35.02±8.21)歲，病程(2.19±0.52)年，體重指數(21.25±2.37)kg/m2，有乙肝家族史者17例；重度組中，男17例、女14例，年齡(34.63±6.30)，病程(2.40±0.36)，體重指數(20.79±1.92)kg/m2，有乙肝家族史者13例。納入患者均符合2015年《慢性乙型肝炎診治指南》中乙肝診斷標準[4]；體重指數<28kg/m2；患者入組前未接受保肝治療及免疫調節治療且臨床資料完整。已排除合并自身免疫性疾病；合并其他類型肝炎患者；合并肝癌、脂肪肝、酒精肝患者；有吸毒史患者；合并心、腎等重大器官疾病患者。各組患者臨床資料比較差異無統計學意義(P>0.05)。患者均知情同意。

1.2方法 采用美國貝克曼AU5800全自動生化分析儀檢測患者肝功能指標，包括天冬氨酸氨基轉移酶(AST)以及丙氨酸氨基轉移酶(ALT)。采用羅氏CobasTaqMan分析儀檢測患者血清HBV-DNA載量，檢測嚴格按照操作說明書進行，并將HBV-DNA載量換成對數后進行計算。患者入院后清晨抽取清晨空腹靜脈血，分離血清置于-30℃冰箱內待測，采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清脂聯素水平，具體操作步驟按照試劑盒使用說明書進行。采用流式細胞儀技術檢測患者外周血Th17、Treg表達率，并計算Th17/Treg比值。

1.3統計學方法 采用SPSS25.0統計學軟件進行數據分析。正態計量數據用(Mean±SD)表示，計數資料采用例數或百分比表示，兩組獨立，正態，方差齊資料組間比較采用t檢驗；樣本率的比較采用卡方檢驗或Fisher確切概率法；采用Pearson相關分析對相關性進行分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1HBV-DNA載量、肝功能指標及血清脂聯素水平的比較 隨著患者肝纖維化程度的增加，肝功能指標AST、ALT以及血清脂聯素水平顯著升高(F=33.128、26.394、17.323，P均<0.05)，各組患者HBV-DNA載量比較無顯著差異(F=1.564，P>0.05)。見表1。

表1 各組HBV-DNA載量、肝功能指標及血清脂聯素水平的比較

2.2Th17表達率、Treg表達率及Th17/Treg比值的比較 隨著患者肝纖維化程度的增加，Th17表達率、Th17/Treg比值顯著升高(F=7.382、13.420，P均<0.05)，而Treg表達率顯著降低(F=10.294，P<0.05)。見表2。

表2 各組Th17表達率、Treg表達率及Th17/Treg比值的比較

2.3相關性分析 患者AST、ALT、脂聯素、Th17以及Th17/Treg互為正相關關系(P<0.05)，Treg與AST、ALT、脂聯素、Th17以及Th17/Treg水平均成顯著負相關關系(P<0.05)，患者HBV-DNA載量與各指標均無顯著相關性(P>0.05)。見表3。

表3 各指標相關性分析

3 討 論

肝纖維化是由多種不同病因，包括各種病毒感染、乙醇以及寄生蟲等造成肝臟慢性損傷，最終出現細胞外基質(ECM)合成增多而降解減少，從而造成肝內ECM過度沉積而引起肝纖維化病理改變[6-7]。肝纖維化進一步發展到第4期即為早期肝硬化，此時期增生的結締組織包繞再生結節并分割殘存肝小葉形成假小葉，但在此階段病理過程仍是可逆的，因此對于HBV肝纖維化患者早期臨床診治具有著重要臨床意義[8]。

脂聯素是近些年來新發現的一種由體內脂肪細胞產生分泌的脂源性細胞因子，脂聯素在血液循環中大量存在，并具有調節脂質代謝、增強胰島素敏感性、抗動脈粥樣硬化以及抑制炎癥反應等多種效應，因此學者認為脂聯素在肝纖維化進程中具有著重要作用[9]。本研究結果顯示，隨著肝纖維化程度的增加，患者脂聯素水平顯著升高(P<0.05)。與研究[10]結果相似。

Th17作為CD4+淋巴細胞亞群之一，可上調多種炎癥細胞水平介導的炎癥反應，在多種自身免疫性疾病發生發展進程中均發揮著重要作用[11]。而Treg作為T淋巴細胞的另一個亞群，當機體處于正常狀態時，Treg可提高免疫耐受而改善機體免疫失衡[12]。本研究結果顯示，隨著患者肝纖維化程度的增加，Th17表達率、Th17/Treg比值顯著升高(P<0.05)，而Treg表達率顯著降低(P<0.05)。與報道[13]結果相似，提示免疫機制在HBV感染相關肝纖維化進程中發揮著重要作用。Th17主要通過IL-17發揮作用，進而激活HSC，加速肝纖維化進程并提高炎癥程度，此外，Th17可使巨噬細胞在肝炎病灶處的聚集，從而加速了乙肝疾病進程的發展；而Treg可識別、抑制腫瘤細胞活化，同時調節免疫應激反應，有助于自身肝組織的保護。

本研究結果顯示，患者AST、ALT、脂聯素、Th17以及Th17/Treg互為正相關關系(P<0.05)，Treg與AST、ALT、脂聯素、Th17以及Th17/Treg水平均成顯著負相關關系(P<0.05)，患者HBV-DNA載量與各指標均無顯著相關性(P>0.05)。提示脂聯素以及Th17/Treg與患者肝纖維化進程以及肝功能變化密切相關，而與HBV病毒載量無關，且脂聯素與Th17/Treg免疫平衡之間具有著一定的影響，其具體尚未明確，還有待進一步研究分析。

綜上所述，HBV感染相關肝纖維化患者存在脂聯素水平及Th17/Treg平衡異常現象，且隨著患者肝纖維化程度的加重，脂聯素水平明顯升高且Th17/Treg失衡更為嚴重，且與其他肝功能指標存在一定相關性，可作為HBV感染相關肝纖維化疾病發生發展的潛在生物指標。