豬Calsarcin-2基因遺傳多態性與胴體及肉質性狀相關性研究

吳 眩

(西安市奶牛育種中心，陜西 西安 710000)

Calsarcin-2又名FATZ、MYOZ1，是Calsarcins(Calcineurin-associated sarcomeric protein)家族成員之一，Calsarcins家族通過去磷酸化，調控Ca2+信號途徑，進而影響肌肉相關基因的表達。Frey等人最早推斷Calsarcin-2為一種肌原節蛋白家族，并能影響肌肉收縮，Takada利用酵母雙雜交系統研究了calsarcin-2蛋白和骨骼肌Z線附近的r-細絲蛋白和a-輔肌動蛋白相互作用規律。骨骼肌的肌纖維的數量和組成對豬肉品質有很大影響，而Calsarcin-2作為Z-Disc中的結構蛋白存在，因此Calsarcin-2基因可能在肌纖維的分化和發育過程中發揮了重要的作用，從而對豬肉品質產生一定的影響。本研究以Calsarcin-2基因作為目標基因，采用測序，結合胴體及肉質性狀進行相關性分析，以期為豬從分子水平進行遺傳改良提供方法和思路。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

貴州白香豬(17頭)及雜交品種貴州白香豬×大約克(24頭)、貴州白香豬×長白(13頭)、貴州白香豬×杜洛克(11頭)、貴州白香豬×貴州白香豬×長白(23頭)，均來自貴州大學香豬育種場，靜脈采血，提取DNA備用。

1.2 試驗方法

1.2.1 引物設計 根據豬Calsarcin-2基因序列(NCBI登錄號：DQl43042)，設計了4對引物，由上海生工有限公司合成，具體見表1。

1.2.2 2)PCR擴增 PCR采用15 μL反應體系：PCR緩沖液1.5 μL；上游引物1 μL；下游引物1 μL；超純水9.1 μL；dNTPs 1.2 μL；聚合酶1 U；模板 1 μL。PCR程序：預變性94 ℃5 min；變性94 ℃30 s，退火X ℃30 s(詳見表1)，延伸72 ℃30 s，30個循環；最后延伸72 ℃10 min；4 ℃保存。

表1 豬Calsarcin-2基因引物信息

1.2.3 PCR擴增產物回收測序 PCR擴增產物用2 %瓊脂糖凝膠電泳檢測，將合格擴增結果送交上海生工進行測序。

1.3 統計分析

利用SPSS軟件對SNPs位點基因型與豬胴體及肉質進行關聯分析。

2 結果分析

2.1 PCR擴增

豬Calsarcin-2基因擴增結果如圖1，4對引物擴增片段整齊清晰、特異性好，長度都與預期大小一致。……