TREM1 在膠質母細胞瘤中的表達及其預后意義

王 京，王遠傳，梁若飛

（1.川北醫學院臨床醫學系，四川 南充 637000；2.川北醫學院附屬醫院神經外科，四川 南充 637000）

膠質母細胞瘤（glioblastoma，GBM）是世界衛生組織（WHO）分類的Ⅳ級膠質瘤，是死亡率最高，且最難治愈的惡性腦腫瘤。原發性中樞神經系統惡性腫瘤中GBM 的最高發病率為3.20/10 萬[1]。根據美國中央腦腫瘤登記中心（CBTRUS）2011 年～2015 年統計報告，膠質母細胞瘤約占所有神經上皮腫瘤的年平均發病率的57%，約占所有惡性腦和中樞神經系統腫瘤的48%[2]。目前標準治療（手術結合放療和化療）在提高GBM 患者的總生存期方面并不滿意，同時新的治療方式并未使患者生存率得到實質性的改善[3]。因此，發現GBM 診斷和治療的新靶點，尋找評估預后的新指標已成為目前GBM 研究的熱點。髓樣細胞觸發受體1（triggering receptor expressed on myeloid cells-1，TREM1）是近年來發現的一種炎癥反應因子[4]。而炎癥反應在腫瘤的不同階段，包括發生、發展、惡性轉化、侵襲和轉移等過程中都發揮著重要的作用[5]。已有研究證實TREM1 基因在直腸癌、卵巢癌、肝細胞癌等[6-9]多種惡性腫瘤中顯著高表達，并與患者的預后關系密切。本研究主要分析TREM1 基因在GBM 中的表達狀況，并探討其預后意義，儀器為研究TREM1 基因在GBM 發生、發展中的作用提供參考。

1 材料與方法

1.1 數據來源 Oncomine 數據庫[10]（https://www.oncomine.org/）；GEPIA 數據庫[11]（http://gepia.cancerpku.cn/）；String 數據庫[12]（https://string-db.org）。

1.2 方法 運用Oncomine 數據庫分析GBM 組織與正常對照組織TREM1 基因在mRNA 上的差異性表達情況，檢索條件：①Analysis type：Cancer vs Normal Analysis；②Gene：TREM1；③Data type：mRNA；④Cancer type：Glioblastoma；⑤臨界值設定條件：P value＜1E－4；fold change＞2.0，gene rank=top 10%。應用GEPIA 數據庫檢索得到人體常見腫瘤及其相應正常對照組織中TREM1 基因的表達情況，檢索方式：Quick search：TREM1；進一步檢索TREM1 在GBM 組織與正常對照組織中的表達情況，檢索方式：①Expression on box plots；②Gene：TREM1；③Datasets：GBM；④Matched normal data：Match TCGA normal and GTEx data。利用GEPIA 數據庫分析獲得TREM1 基因表達對GBM 患者生存時間的影響，檢索條件：①Datasets election：GBM；②Methods：overall survival/disease free survival；③Gene：TREM1；④Group cutoff：Median。String 數據庫來分析TREM1中的蛋白相互作用網絡，檢索條件：①Protein name：TREM1；②Organism：Homosapiens。

2 結果

2.1 TREM1 在GBM 中的表達情況 按照上述檢索條件，從Oncomine 數據庫中得到了2 個數據集用于研究TREM1 基因在GBM 中與在正常對照組織中的表達情況。薈萃這2 個數據集，結果分析顯示TREM1 基因在GBM 中呈高表達（P=3.52E-6），見圖1。在mRNA 水平上，兩組數據均顯示TREM1 基因在GBM 組織中的表達高于正常對照組織，差異有統計學意義（P＜0.05），見圖2。

圖1 TREM1 基因在GBM 中的表達

圖2 TREM1 在不同GBM 研究芯片中的表達情況

2.2 GEPIA 數據庫驗證結果 GEPIA 數據庫分析307 個樣本，其中GBM 有163 例，正常對照組織有207 例，結果顯示TREM1 基因在GBM 組織中表達量高于正常對照組織（P＜0.05），見圖3。

圖3 TREM1 在正常腦組織與GBM 組織中的表達

2.3 人體常見腫瘤中TREM1 的表達情況 TREM1在人類常見腫瘤中的表達通過GEPIA 數據庫分析，結果顯示與正常的對照組織比較，TREM1 基因在大部分腫瘤組織中呈高表達，但在彌漫性大B 細胞淋巴瘤（lymphoid neoplasm diffuse large b-cell lymphoma，DLBC），肺腺癌（lung adenocarcinoma，LUAD），肺鱗狀細胞癌（lung squamous cell carcinoma，LUSA）及胸腺瘤（thymoma，THYM）中，TREM1 基因表達水平低于相應正常組織（P＜0.05），見圖4。

2.4 TREM1 表達水平與GBM 患者生存期的關系GEPIA 數據庫分析顯示，TREM1 基因的表達水平與GBM 患者無病生存期無關（HR=1.4，P=0.1），但TREM1 的基因高表達與GBM 患者總生存期呈負相關（HR=1.5，P=0.032），見圖5。

2.5 TREM1 的蛋白相互作用網絡 String 數據庫結果顯示，以TREM1 蛋白為中心，有多個相互作用的蛋 白，如 TYROBP、TREM2、TREML2、TREML1、FPR1、TLR4 和TLR2，見圖6。

圖4 TREM1 基因在不同人類腫瘤組織及其相應正常組織中的差異

圖5 TREM1 基因與GBM 患者生存期的關系

圖6 TREM1 基因表達蛋白相關蛋白網絡圖

3 討論

目前標準GBM 治療方式是多模式的，主要涉及外科手術、放射療法和化學療法[13]。但由于GBM的高度惡性且進展迅速（中位生存期約為15 個月），GBM 預后仍然很差[14]。因此發現GBM 診斷、治療和評估預后的新指標至關重要。近年來越來越多的證據表明TREM1 在腫瘤的發生、發展、惡性轉化和侵襲等過程中發揮著重要作用。Shen ZT 等[15]研究發現，TREM1 抑制劑可有效抑制胰腺癌的生長，延長荷瘤小鼠的生存期，表明高密度脂蛋白與TREM1抑制劑形成的脂肽復合物可穿越血腦屏障，其可能是治療GBM 的一種潛在方法。Saurer L 等[16]研究發現，TREM1 的遺傳缺失可以預防大腸癌，TREM-1的高表達具有促進腸道腫瘤發生的作用，進一步表明TREM1 表達的中性粒細胞是結直腸腫瘤發展的關鍵因素。Duan M 等[17]研究發現，TREM1 的高表達可顯著促進肝癌細胞的增殖、侵襲，并抑制其凋亡，進一步指出TREM1 的高表達與肝癌患者的復發率升高、生存率降低有顯著相關性，并提示其是肝癌復發的獨立預后因素。

本研究通過Oncomine 數據庫分析發現，TREM1 基因在GBM 組織中表達較正常對照組織升高（P＜0.05）；GEPIA 數據庫驗證結果顯示，TREM1基因在GBM 中表達量高于正常對照組織（P＜0.05），提示與Oncomine 芯片數據庫相符；然后在GEPIA數據庫進一步分析TREM1 在人體常見腫瘤中的表達情況，結果顯示與正常對照組織比較，TREM1 基因在大部分腫瘤組織中呈現出高表達（P＜0.05），但在彌漫性大B 細胞淋巴瘤、肺腺癌、肺鱗狀細胞癌及胸腺瘤中TREM1 基因的表達水平低于相應的正常組織（P＜0.05），且本研究通過GEPIA 數據庫進行生存分析，結果發現TREM1 基因表達水平與GBM患者無病生存期無顯著關系，但TREM1 基因的高表達與GBM 患者總生存期呈負相關（P＜0.05），提示在GBM 患者中TREM1 基因的高表達是一個不良的預后因素。本研究最后通過String 數據庫發現，以TREM1 蛋白為中心的多個相互作用的蛋白，包括TYROBP、TREM2、TREML2、TREML1、FPR1、TLR4和TLR2，可為此后的研究提供基礎。

綜上所述，TREM1 在GBM 組織中高表達，且關系到患者的預后，可作為診斷與治療GBM 的潛在靶點，為進一步分子機制研究和抗腫瘤靶向治療提供理論支持。