探討精子DNA 損傷與精液常規檢查指標的關系

常桂林

（昆明醫科大學第一附屬醫院，云南 昆明）

0 引言

當前，男性中不育癥患者人數不斷升高，這不僅給患者造成很大的傷害，而且甚至會影響一個家庭的幸福指數。據相關研究結果顯示，若男性的精子DNA 受到損傷，那么就會嚴重影響男性的生育能力[1]，另外還會增加配偶的意外流產的概率，所以，一些業內人士認為精子DNA 損傷情況可以準確評價精子的質量，這樣就可以很好地對不孕不育癥患者提供可靠的治療依據，進而提升妊娠幾率，提高患者的幸福指數[2]。那么本次研究就來探討一下，現將相關的情況匯報如下。

1 基礎資料與方法

1.1 基本資料

納入本研究的研究資料均為本院在2020 年全年收治的男性不育癥患者120 例，這些患者均經過相關的檢測確診為不育癥患者，在將患者納入研究之前對全部患者均講解了此次研究的目的、方法、意義等情況，在患者明確了相關研究情況之后，全部患者均簽署同意書，其中包含DNA 損傷率＜25%的患者與DNA 損傷率≥25%的患者，分別為60 例與60 例，并以此分組。應用精子染色質擴散法（SCD 法）對男性精子DNA 的損傷率情況進行檢測。將兩組患者的資料做一比較分析，無顯著的統計學意義（P＞0.05），符合本次研究的研究標準，具有較好的可比較性。

1.2 排除標準

曾經患過腮腺炎的患者；曾經患有隱睪癥或無精子癥疾病的患者；患有精索靜脈曲張疾病的患者；存在性功能障礙的病人；患者不能積極配合研究工作等。若有上述情況者將予以排除在外。

1.3 干預方法

1.3.1 采集精液

在對患者進行精液采集之前，要向患者講明采集精液的主要方法，讓患者有一個心理準備。要嚴格依照WHO制定的精液采集標準對患者的精液進行采集，首先要囑患者禁欲2-8 天，然后囑其用手淫法采集精液，收集到合格的精液之后將其放在37℃恒溫水浴箱內進行液化，然后測定精子的計數及動態、靜態等參數情況[3]。

1.3.2 檢測患者的精子DNA 損傷情況

1.3.2.1 首先取患者的精液并進行充分的稀釋，稀釋后得到的濃度為：5-10×106/ml，之后將60μl 精子稀釋液加入到已融化的易熔膠管里并進行充分混合均勻，在37℃條件下實施孵育，待用。

1.3.2.2 DNA 的變性處理

在預冷的載玻片上放置上30μl 精子凝膠混合液包被，在2-8℃的環境下使其凝固[4]，之后移除蓋玻片。將反應液A 滴入其中，在室溫內反應7min，將載玻片加入反應液B 中予以充分浸泡，時間為25min，然后用清水反復沖洗載玻片1-3 次。

1.3.2.3 DNA 染色

應用濃度梯度不同的乙醇溶液將樣本進行脫水處理，然后用瑞氏染色液覆蓋，再加入瑞氏緩沖液，混合均勻后用清水沖洗1-3 次，然后進行干燥備用。

1.3.2.4 DNA 損傷統計

檢測男性患者的精子DNA 損傷率情況應用SCD 檢測法，依據光暈大小對男性精子損傷程度實施判別。

1.4 統計學處理方法

應用SPSS18.0 軟件對相關數據進行統計學分析處理，計量資料應用（均數±標準差）表示，采用t 檢驗，使用χ2檢驗。若P＜0.05 則表示差異具有統計學意義。若P＞0.05則表示結果沒有顯著的統計學意義。

2 結果

見表1。

表1 兩組精液指標情況對比

3 討論

近年來，隨著社會的不斷發展與進步，人們在飲食習慣、作息習慣等方面具有顯著變化，再加上人們的壓力普遍增大，有很多因素會導致人們的不孕不育發病率顯著升高，而且此病呈逐年升高的趨勢，其中一些不育癥是和精液質量不佳有緊密聯系的。精液質量與男性生育能力息息相關，是評價男性生殖能力方面的重要內容之一，但是這項指標對于評價精子受精能力方面并不全面，局限性較大[5]。男性精子DNA 受損的機制相對較為復雜，據相關研究資料結果顯示，導致精子DNA 發生損傷的主要因素主要包括：精子染色質包裝發生異常；精子在產生過程中細胞發生凋亡；精子在運輸過程中受到氧化自由基的不良影響。男性的生殖能力高低與精子的質量高低是有直接關系的，而DNA 受損會顯著降低患者的精子質量，也就是能夠直接損害患者的生殖能力[6]。

在本次研究，我們將收集到的不育癥患者并將患者分為DNA 損傷率＜25%組別與DNA 損傷率≥25%組別兩組，研究中我們對兩組患者的前向運動精子、精子活動率、精子正常形態率等指標進行對比分析，通過檢測分析并比較結果發現，DNA 損傷率＜25%組均顯著好于DNA 損傷率≥25%組，兩組結果比較具有顯著的統計學意義（P＜0.05），這個研究結果表明，男性精子DNA 的損傷程度是與精子活動率、精子正常形態呈負相關關系的，研究結果顯示，男性精子DNA 受損可能會導致男性患者的正常生殖能力顯著降低[7,8]，在臨床中，要改善患者的生殖解決，我們可以通過采用精子DNA 損傷小的精液精子和睪丸精子來受精，進而提升女方的懷孕率[9]。

總之，通過本次的深入研究與分析，我們認為精子DNA 損傷可能成為獨立的精子質量評價指標，對患上不育癥的男性患者及時進行精子DNA 損傷情況的檢測[10]，及時了解患者的精子受損情況，可幫助篩選出DNA 損傷程度較低的精子，以此來改善患者的生殖的治療結局，提高女方受孕率，是值得在臨床中加強研究[11,12]。