簡述微生物實驗無菌操作的基本要求

孫葳

微生物污染是導致食品腐敗變質的重要因素，食品中微生物的種類、數量和性質可直接影響人體健康，因此對于食品中微生物指標的檢驗要求越來越高，無菌操作技術是食品微生物檢驗結果準確、可靠的重要保障。

食品中微生物種類繁雜，不同食品中的微生物種類也有所不同，對于食品中微生物的檢驗，熟練掌握無菌操作技術是保證檢驗結果準確的基本要求【1】。無菌的概念是指在環境中有一切生命活動的微生物的營養細胞及其芽孢或孢子都不存在的狀態，無菌操作技術是指在微生物的分離、接種、培養等過程中防止培養物被其他微生物污染的操作技術，主要目的是為了創造無菌的培養環境并防止在操作過程中其他微生物的侵入【2-3】。本文結合食品微生物檢驗日常經驗簡要闡述食品微生物檢驗中無菌操作的基本要求。

無菌操作技術無菌的環境

日常微生物檢驗工作的的無菌環境可包括無菌室、超凈工作臺、生物安全柜和火焰周圍。標準的無菌室要求設有緩沖室、空氣過濾、墻面、墻角、相關操作設備、紫外燈等。超凈工作臺是一種提供局部無塵無菌工作環境的垂直單向流行空氣凈化設備，生物安全柜也可提供局部無塵無菌工作環境，但它設置了風槽，氣流不會吹向使用者，因此在進行致病菌相關操作時需要在生物安全柜中進行。

無菌的器具、培養基

常用的無菌器具一般包括玻璃、金屬等器具，培養基一般包括液體活水溶性的物質，通常采用干熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法、火焰滅菌法和過濾除菌法。（表1）

無菌操作技術主要包括手部清潔消毒，用接種環、接種針、涂布棒等工具進行的操作等等。

操作前，一定要明確物品的無菌區和非無菌區，工作人員操作前應先佩戴帽子、口罩，同時注意空氣和環境的清潔。

操作過程中，夾取無菌物品，必須使用無菌持物鉗貨鑷子。未經消毒的手、臂均不可直接接觸無菌物品或者超過無菌區取物。

關于無菌物品的管理，必須保存在無菌包貨滅菌容器內，不可暴露在空氣中過久。無菌物品和非無菌物品應分開放置。無菌包一經打開即不能視為絕對無菌，應盡快使用。已取出的無菌物品雖然未使用也不可再放回無菌容器內。

微生物實驗室要求

微生物實驗室內要保持清潔衛生，應有良好的照明設備，室內不得存放與試驗無關的個人物品。測試用過的廢棄物要倒在固定的容器內并進行及時處理。工作臺面應保持水平無滲漏，墻壁和地面應光滑易清洗。實驗室布局要合理，一般應有準備間和無菌室。

微生物實驗的安全要求

一般要求

進入實驗室工作時，衣、帽、鞋必須穿戴整齊。在進行高壓滅菌等工作時，不可擅自離開現場，要認真做好觀察和記錄，對于易揮發、易燃液體不可直接加熱，應置于水浴鍋中進行。嚴禁用口直接吸取藥品和菌液，若發生菌液濺出容器外，應立即用有效消毒劑進行消毒處理，安全處理后方可離開現場。工作完畢后，應用肥皂洗凈雙手，工作服要經常清洗，必要時可進行高壓消毒。實驗完畢應及時清理現場和實驗用具，對染菌物品進行消毒滅菌處理。實驗結束后應認真檢查水、電，關好門窗方可離去。

消防安全要求

要注意預防供電線路老化造成的漏電著火。應注意由于設備原因導致的失火，如設備超出正常使用周期、使用恒溫干燥鼓風箱溫度設置過高、儀器操作不當等。應防止未關電源引起失火。在使用高壓滅菌鍋要注意避免出現爆炸事故。

藥品使用安全

實驗中可能會使用一些對人體可能產生危害的化學藥品，如擦拭顯微鏡鏡頭的二甲苯易揮發，吸入過多影響健康;進行芽孢染色時使用的孔雀石綠有致癌作用;常用于顯微鏡鏡頭的香柏油有劇毒;濃硫酸、甲苯等可能腐蝕實驗儀器，傷害皮膚眼睛等。

細菌感染和污染

細菌易發生變異，在某些特定條件下可能由非致病菌轉變為致病菌，應注意防范。

輻射損傷

無菌操作前用紫外燈照射消毒，強紫外線對人體有害，應注意避免接觸。

結語

綜上所述，本文對食品微生物檢驗中無菌操作技術要求進行了簡要闡述，只有嚴格按照無菌操作技術和流程的要求，才能準確分析出食品樣品中所含的微生物種類和數量【4】。隨著人們食品安全意識的不斷提高，對微生物檢驗人員技術能力要求也在不斷提高，通過本文的闡述希望對食品微生物檢驗提供參考。

參考文獻：

[1]李巖，食品微生物檢驗樣品采集和保存的注意事項及其檢驗技術[J].中國衛生產業.2017，14（6）：39—40.

[2]張穎.試論食品微生物檢驗中無菌操作技術[J].自然科學：文摘版 ，2015（9）：34.

[3]毛轉輝.食品微生物檢驗中無菌操作技術研究[J].延邊醫學 ，2015（7）：281-282.

[4]李二紅.無菌操作技術在食品微生物檢驗中的應用[J]新商務周刊.2017.6（12）：260