腦腸肽Ghrelin和ICAM-1表達與基底節(jié)腦出血患者神經功能缺損及預后的關系*

夏百里 董烜瑋 崔昌盛 柴士平

(1.濰坊醫(yī)學院臨床學院，山東 濰坊 261053；2.濰坊醫(yī)學院附屬醫(yī)院神經外科，山東 濰坊 261031；3.濱州市人民醫(yī)院超聲醫(yī)學科，山東 濱州 256610；4.日照市中醫(yī)醫(yī)院神經外科，山東 日照 276826)

腦出血是神經外科的一種危急重癥，該病具有發(fā)病急、病情發(fā)展迅速、發(fā)病率高、致殘率高等特點[1-2]。基底節(jié)區(qū)是腦出血常發(fā)部位，該疾病主要因顱內血管發(fā)生病變，破裂所致。患者若為基底節(jié)區(qū)腦出血，雖經及時有效的治療，預后也較容易引起偏癱等后遺癥，嚴重影響患者的生存及生活質量[3-4]。腦腸肽Ghrelin又稱胃饑餓素，是一種生長激素促分泌素的內源性配體，在人體內廣泛分布，其主要通過結合生長激素促分泌激素受體而發(fā)揮作用[5-6]。細胞間粘附分子-1(Intercellular Adhesion Molecule-1，ICAM-1)是粘附分子免疫球蛋白超家族成員之一，可在多種細胞表面表達[7-8]。腦腸肽Ghrelin和ICAM-1與基底節(jié)腦出血患者神經功能缺損及預后有關，但至今關于其作用機理及影響的研究甚少。基于此，本研究擬通過檢測基底節(jié)腦出血患者血清中腦腸肽Ghrelin和ICAM-1表達情況，探討其表達水平與基底節(jié)腦出血患者神經功能缺損及預后的關系，旨在為基底節(jié)腦出血的臨床治療提供有價值的參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年1月～2018年2月濰坊醫(yī)學院附屬醫(yī)院確診并住院治療的80例基底節(jié)區(qū)腦出血患者為基底節(jié)腦出血組(簡稱腦出血組)，并選取同期因頭痛等原因在該院神經內科建檔并進行常規(guī)檢查的人群75例為對照組。基底節(jié)腦出血組納入標準：①符合《中國腦血管疾病分類2015》中的基底節(jié)腦出血診斷標準[9]。②在該院經頭顱影像CT檢查確診為基底節(jié)腦出血者。③患者及家屬選擇在該院接受治療者。④臨床資料齊全者。排除標準：①患有凝血功能障礙等相關疾病者。②患有嚴重肝、腎等疾病及惡性腫瘤者。③依從性較差者。④臨床資料不全者。該研究經醫(yī)院道德倫理委員會批準通過，所有樣品采集均取得患者及家屬知情并簽署同意書，且符合《世界醫(yī)學協(xié)會赫爾辛基宣言》。

1.2 研究方法

1.2.1 樣品采集及保存 血清樣品：清晨采集受試對象空腹靜脈血5 mL，使用離心機(購自于北京若水合科技有限公司，貨號：wi82487)，以3000 r/min速率離心15 min后收集上層血清，置于-20℃冰箱中保存待測。

1.2.2 血清Ghrelin、ICAM-1表達水平的檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA)法檢測各組血清腦腸肽Ghrelin和ICAM-1的表達水平。在標準孔和空白孔中分別加入已配制好的100 uL標準樣品，于第1孔中加入標準樣品100 uL，混合均勻后吸取100 uL加入第2孔并進行稀釋，按照上述步驟重復稀釋至第5孔。在待測孔中加入80 uL樣品稀釋液和待測樣品10 uL，混合均勻后于37 ℃下孵育20 min。棄去酶標板內液體，然后用吸水紙拍干，再加入顯色劑混合均勻，進行顯色。最后加入終止液，并測定其吸光度。

1.3 神經功能損傷評定 采用腦卒中神經功能缺損評分表(Chinese Stroke Scale，CSS)進行CSS評分，主要包括語言、意識、面肌、手肌力、下肢肌力、上肢肌力、步行能力、水平凝視八項，總分為0～45分，分數(shù)越高表示患者神經功能缺損越嚴重。

1.4 隨訪及預后評估 對本研究中涉及到的所有患者治療出院后進行門診復查或電話隨訪，并根據(jù)相關標準對患者預后進行評估，隨訪時間為1年，末次隨訪時間截止2019年2月28日，死亡患者以死亡時間作為隨訪截止期，本次隨訪的中位隨訪時間為6.23個月，且本研究中未出現(xiàn)失訪情況。

預后評定：根據(jù)Rankin量表(Modified Rankin Scale，MRS)對患者進行MRS評分，總分≥3分為預后不良，總分<3分為預后良好。

2 結果

2.1 兩組一般資料的比較 腦出血組和對照組的性別、平均年齡、體質量指數(shù)(Body Mass Index，BMI)、吸煙、糖尿病及飲酒比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；兩組高血壓和高血脂比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組基本資料比較

2.2 兩組血清Ghrelin、ICAM-1表達水平比較 腦出血組血清腦腸肽Ghrelin表達水平顯著低于對照組，血清ICAM-1表達水平顯著高于對照組(均P<0.05)，見表2。

表2 兩組患者血清Ghrelin、ICAM-1表達水平比較

2.3 Ghrelin、ICAM-1高低表達者神經功能缺損的比較 分別以腦腸肽Ghrelin、ICAM-1表達平均值(26.87 μg/L、300.65 ng/mL)將腦出血患者進行分類，高于平均值的為高表達者，低于平均值的為低表達者。高Ghrelin者CSS評分顯著低于低Ghrelin者，高ICAM-1者CSS評分顯著高于低ICAM-1者(均P<0.05)，見表3。

表3 兩組患者神經功能缺損的比較分)

2.4 Ghrelin、ICAM-1高低表達者預后的比較 高Ghrelin者預后不良發(fā)生率明顯低于低Ghrelin者，高ICAM-1者預后不良發(fā)生率明顯高于低ICAM-1者(均P<0.05)，見表4。

表4 各組患者預后的比較[n(×10-2)]

2.5 影響腦出血患者死亡或殘疾的因素 以腦出血患者死亡或殘疾發(fā)生為因變量(0=否，1=是)，血清Ghrelin、ICAM-1表達水平、高血壓、高血脂為自變量，采用Logistic回歸分析。結果顯示，血清ICAM-1表達水平是影響腦出血患者發(fā)生死亡或殘疾的獨立危險因素，血清Ghrelin表達水平為腦出血患者發(fā)生死亡或殘疾的保護因素，見表5。

表5 腦出血患者死亡或殘疾的危險因素分析

3 討論

腦出血的常發(fā)部位為基底節(jié)區(qū)，基底節(jié)區(qū)供應動脈血管垂直于大腦中動脈，當人體血壓較高時易引起動脈管壁內膜發(fā)生玻璃樣變性或纖維壞死，從而形成動脈瘤并發(fā)生破裂導致腦出血[10-11]。腦出血治療后幸存者較易出現(xiàn)認知障礙、偏癱等癥狀，已成為臨床研究關注的重點之一。流行病學研究顯示，中國腦出血患病率呈逐年上升的趨勢，而目前臨床治療腦出血的方法仍不完全有效，基底節(jié)腦出血的早期診斷及治療仍是神經外科需要攻克的難題之一。

人腦腸肽Ghrelin是一種由28個氨基酸組成的多肽，分子量為3314 D，廣泛分布于人體內，且常與生長激素促分泌激素受體結合，具有較強的促生長激素分泌的作用[12-13]。有研究顯示，腦腸肽Ghrelin與多種疾病的發(fā)生、發(fā)展有關。陳陽[14]研究發(fā)現(xiàn)，腦腸肽Ghrelin表達水平在腸易激綜合征重疊胃食管反流病患者血漿中低表達，并與腸易激綜合征重疊胃食管反流病的發(fā)生密切相關。本研究結果顯示，基底節(jié)腦出血組血清腦腸肽Ghrelin表達水平顯著低于對照組，提示腦腸肽Ghrelin可能參與基底節(jié)腦出血的發(fā)展進程。

ICAM-1是一類分子量為76～114 kDa的膜表面單鏈糖蛋白，屬于免疫球蛋白超家族成員之一，具有調節(jié)細胞與細胞、細胞外基質與細胞間相互結合的作用[15-17]。有研究顯示，ICAM-1與多種疾病的發(fā)生及發(fā)展有關。范素鴻[18]研究發(fā)現(xiàn)，子宮內膜異位癥患者血清ICAM-1表達水平升高，且其表達水平在子宮內膜異位癥的發(fā)病機制中發(fā)揮重要作用。閆文明等[19]研究發(fā)現(xiàn)，ICAM-1在宮頸鱗癌組織中表達升高，且與宮頸鱗癌放療抵抗性密切相關。本研究結果顯示，基底節(jié)腦出血組血清ICAM-1表達水平顯著高于對照組，提示ICAM-1可能參與基底節(jié)腦出血的發(fā)展進程。本研究還發(fā)現(xiàn)，高Ghrelin者CSS評分顯著低于低Ghrelin者，高ICAM-1組患者CSS評分顯著高于低ICAM-1者，提示腦腸肽Ghrelin和ICAM-1表達水平與基底節(jié)腦出血患者神經功能缺損密切相關。此外，高Ghrelin者預后不良發(fā)生率明顯低于低Ghrelin組，高ICAM-1者預后不良發(fā)生率明顯高于低ICAM-1者，提示腦腸肽Ghrelin低表達和ICAM-1高表達表達水平與基底節(jié)腦出血患者預后不良情況發(fā)生率密切相關。此外，Logistic回歸分析結果顯示：血清ICAM-1表達水平是影響基底節(jié)腦出血患者發(fā)生死亡或殘疾的獨立危險因素，血清Ghrelin表達水平為基底節(jié)腦出血患者發(fā)生死亡或殘疾的保護因素，提示對兩者的監(jiān)測可為基底節(jié)腦出血患者死亡或殘疾預測提供更充分的臨床依據(jù)。

4 結論

腦腸肽Ghrelin在基底節(jié)腦出血患者中的表達水平明顯降低，ICAM-1表達水平明顯升高，兩者參與基底節(jié)腦出血的發(fā)生及發(fā)展，且其表達情況與患者神經功能缺損及預后密切相關，提示腦腸肽Ghrelin和ICAM-1可作為基底節(jié)腦出血患者預后評估的潛在生物學指標，但具體的作用機制還有待深入研究。