丁竟成，黃磊，李婷，趙玉杰

信陽市中心醫院婦產科，河南 信陽 464000

卵巢癌是常見的婦科惡性腫瘤，在女性生殖系統腫瘤中，患病率居于第3位，致死率居于首位；其中，上皮性卵巢癌占卵巢癌的90%以上，嚴重威脅女性的生殖健康及生命安全。卵巢癌患者的早期癥狀并不典型，多數患者確診時已處于中晚期階段，錯過了最佳診療時機。研究證實，Ⅰ期確診患者數量不足25%，Ⅲ、Ⅳ期患者具有較高的復發率，5年生存率不足25%，因此，早期檢測至關重要。血清腫瘤標志物水平的動態監測有助于卵巢癌患者臨床療效及預后情況的判斷。腫瘤標志物檢測是診斷惡性腫瘤的重要手段及腫瘤臨床研究領域的熱點。人附睪蛋白4（human epididymis protein 4，HE4）屬于卵巢癌的新型標志物，多表達于卵巢癌組織中，對卵巢癌具有較高的診斷靈敏度和特異度。轉錄因子Sp1能夠上調HE4的基本轉錄活性，在卵巢癌發生、發展中具有重要作用。白細胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）能夠參與卵巢細胞的發育、成熟、排卵和妊娠等生殖過程，但是否參與卵巢癌的發生尚有待證實。鑒于此，本研究對IL-1β、HE4和Sp1對卵巢癌的診斷效能及預后預測價值進行分析，以期為卵巢癌的臨床早期診療提供理論參考依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2013年1月至2016年1月信陽市中心醫院收治的上皮性卵巢癌患者的臨床資料。納入標準：①經組織病理學或細胞學確診為上皮性卵巢癌；②首發病例；③接受手術+術后輔助化療；④術前均未接受放化療及其他抗腫瘤治療；⑤病歷資料及隨訪資料完整，且均完成隨訪。排除標準：①生存期不超過半年；②合并其他部位惡性腫瘤；③合并結締組織疾病及心臟病、糖尿病、冠心病等其他慢性疾病；④病灶發生轉移；⑤合并免疫功能缺陷及全身性疾病；⑥合并嚴重的心、肝、腎功能不全；⑦伴有精神類疾病；⑧并發全身急性、慢性感染；⑨存在嚴重自殺傾向；⑩妊娠期或哺乳期婦女。根據納入和排除標準，本研究共納入90例上皮性卵巢癌患者作為惡性組，年齡28～66歲，平均（49.75±8.69）歲。另選取同期收治的30例良性卵巢腫瘤患者作為良性組，年齡26～65歲，平均（48.76±9.01）歲；選取30例良性婦科疾病（組織病理學證實為健康卵巢組織）患者作為對照組，年齡28～65歲，平均（49.33±8.54）歲。3組患者的年齡比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。分別收集惡性組、良性組和對照組患者的上皮性卵巢癌組織、良性卵巢腫瘤組織和健康卵巢組織。

1.2 檢測方法

3組患者均于清晨抽取空腹靜脈采血3～5 ml，以3000 r/min的速度離心10 min，離心半徑為10 cm，收集上層血清于干燥試管中，并置于-80℃低溫保存，于1周內進行檢測。采用酶聯免疫吸附法檢測血清IL-1β、HE4水平。所有操作步驟均嚴格按照試劑盒說明書步驟進行，所有試劑盒均有正式批文，符合要求。3組患者的組織標本均經固定、染色、切片、脫水、滅活、顯色等操作后，采用免疫組織化學染色法檢測Sp1的表達情況，根據染色強度和高倍鏡下陽性細胞所占百分比進行分析。Sp1陽性細胞主要定位于細胞核，陽性顆粒呈棕黃色或棕褐色，且粗細均勻。陽性細胞染色強度評分：無著色計0分，淺黃色計1分，棕黃色計2分，棕褐色計3分。陽性細胞所占百分比評分：未見陽性細胞計0分，0%＜占比＜10%計1分，10%≤占比＜50%計2分，50%≤占比＜75%計3分，≥75%計4分。Sp1陽性判定標準：陽性細胞占比和染色強度評分相乘，0分為陰性，≥1分為陽性。上述兩項得分的乘積為免疫組化最終得分，其中，≤2分為陰性，＞2分為陽性。

1.3 觀察指標

比較3組患者的血清IL-1β、HE4水平及組織中Sp1的陽性表達情況，分析IL-1β、HE4、Sp1水平對上皮性卵巢癌的診斷效能。術后，采用門診、電話或走訪等形式對患者均進行了為期4年的隨訪，每3個月隨訪1次，隨訪內容包括常規體格檢查、實驗室生化指標檢測、影像學檢查等，隨訪截止時間為2020年1月。記錄所有上皮性卵巢癌患者的生存情況，并依據生存情況將其分為生存組和死亡組，分析臨床特征與上皮性卵巢癌患者生存情況的關系及其預后的影響因素。

1.4 統計學方法

采用SPSS 21.0軟件對數據進行統計學分析。計數資料以例數和率（%）表示，組間比較采用χ檢驗。計量資料以均數±標準差（x-±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用兩獨立樣本t檢驗，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗。繪制受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線，獲取曲線下面積（area under curve，AUC），并通過計算靈敏度、特異度等指標分析IL-1β、HE4及Sp1對卵巢癌的診斷價值，確定臨界值。采用多因素Logistic回歸模型分析卵巢癌患者預后的影響因素。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清IL-1β、HE4水平及組織中Sp1表達情況的比較

3組患者血清中的IL-1β、HE4水平及組織中Sp1的陽性表達率比較，差異均有統計學意義（P＜0.01）。惡性組患者血清中的IL-1β、HE4水平均高于良性組和對照組患者，差異均有統計學意義（P＜0.05）；惡性組患者血清中Sp1的陽性表達率高于良性組和對照組患者，差異均有統計學意義（P＜0.05）。（表1）

表1 3組患者血清中IL-1β、HE4水平及組織中Sp1陽性表達情況的比較

2.2 血清IL-1β、HE4水平及組織中Sp1表達對上皮性卵巢癌的診斷效能

ROC曲線分析結果顯示，血清IL-1β、HE4水平及組織中Sp1的表達診斷上皮性卵巢癌的AUC分別為0.872、0.918、0.817。血清IL-1β診斷上皮性卵巢癌的靈敏度最高（88.9%），HE4診斷上皮性卵巢癌的特異度最高（93.3%）。（表2、圖1）

表2 IL-1β、HE4及Sp1對上皮性卵巢癌的診斷效能

圖1 血清IL-1β、HE4水平及組織中Sp1的表達診斷上皮性卵巢癌的ROC曲線

2.3 生存情況

截至隨訪結束，所有患者均全部完成隨訪。90例上皮性卵巢癌患者中，30例患者生存，60例患者死亡，4年生存率為33.33%（30/90）。

2.4 上皮性卵巢癌患者生存情況影響因素的單因素分析

兩組患者的年齡、病理類型比較，差異均無統計學意義（

P

＞0.05）；兩組患者的腫瘤直徑、臨床分期、分化程度、淋巴結轉移情況、血清IL-1β水平、血清HE4水平及卵巢組織中Sp1的陽性表達率比較，差異均有統計學意義（

P

＜0.05）。（表3）

表3 90例上皮性卵巢癌患者生存情況影響因素的單因素分析

2.5 卵巢癌預后影響因素的多因素Logistic回歸分析

將腫瘤直徑、臨床分期、分化程度、IL-1β水平、HE4水平、Sp1表達情況作為自變量，以患者預后情況作為因變量納入Logistic多因素回歸模型進行分析，結果顯示，腫瘤直徑、臨床分期、分化程度、淋巴結轉移情況、IL-1β水平、HE4水平及Sp1表達情況均是上皮性卵巢癌患者預后的獨立影響因素（

P

＜0.05）。（表4）

表4 卵巢癌患者預后影響的多因素Logistic回歸分析（n=90）

3 討論

卵巢癌是女性生殖系統常見的惡性腫瘤，在全世界范圍內，其患病率僅次于宮頸癌，而且，近年來，其發病率呈明顯上升趨勢。目前，關于上皮性卵巢癌的發病機制尚未完全明確，患者早期缺乏典型的臨床癥狀，難以進行鑒別診斷，導致患者錯過了最佳診療時機，因此，早期監測病情并及時診斷治療有利于改善上皮性卵巢癌患者的預后。

HE4是一種附著于人附睪上皮細胞中的核心表位蛋白，屬于抑蛋白酶家族。研究證實，HE4在卵巢癌組織中呈高表達，在健康卵巢組織或非卵巢腫瘤組織中不表達或呈低表達，是臨床診斷卵巢癌的新型腫瘤標志物。國外研究通過免疫組化法檢測卵巢癌患者卵巢癌組織中的HE4水平，發現患者的血清HE4水平普遍較高，認為HE4對于卵巢癌具有一定的診斷意義。IL-1β屬于IL-1，能夠介導機體內IL-1的活性，通過自分泌或旁分泌的方式刺激其他細胞因子和炎性遞質的產生，誘發抗原呈遞細胞表面免疫分子的表達，為T淋巴細胞的活化提供第二信號，促進B細胞的增生、分化，介導免疫球蛋白的分泌，由此激活補體，增強細胞免疫和體液免疫介導的組織損傷過程。研究表明，IL-1β參與了卵泡發育、卵子成熟及排卵等生殖過程，活性亦受到激素、促性腺激素等的調節，因此，推斷其在卵巢癌的發生、發展中具有一定作用。研究指出，卵巢癌的發生還受到多種活性分子的影響，Sp1則是其中一種重要的轉錄因子。有研究指出Sp1可以結合并激活FOXM1啟動子，促進致癌蛋白FOXM1在卵巢癌中高表達進而促進卵巢癌病情進展，干擾Sp1表達后可以下調FOXM1在卵巢癌的表達，提示Sp1可通過參與調控腫瘤細胞增殖相關轉錄因子FOXM1在卵巢癌中的表達促進卵巢癌病情進展。

本研究結果顯示，惡性組患者血清中的IL-1β、HE4水平均高于良性組和對照組患者，Sp1的陽性表達率均高于良性組和對照組患者（P＜0.05），與既往研究結果一致，說明血清高IL-1β、HE4水平及卵巢組織中Sp1陽性表達與卵巢癌的發生具有一定聯系，可作為診斷上皮性卵巢癌的重要腫瘤標志物。同時，通過血清IL-1β、HE4水平及卵巢組織Sp1表達診斷上皮性卵巢癌ROC曲線可知，三者診斷卵巢癌的曲線下面積AUC分別為0.872、0.918、0.817，提示血清IL-1β、HE4水平及卵巢組織Sp1表達情況對上皮性卵巢癌均具有較高的診斷價值，能夠作為對于上皮性卵巢癌臨床診斷的輔助指標。

血清IL-1β、HE4水平及卵巢組織Sp1表達與卵巢癌的進展具有一定的聯系，推測其表達情況能夠預測卵巢癌患者的預后。本研究通過為期4年的隨訪發現，90例上皮性卵巢癌患者的4年生存率為33.33%（30/90），與既往研究結果基本相符。單因素分析結果顯示，腫瘤直徑、臨床分期、病理分化程度、淋巴結轉移情況、血清IL-1β、血清HE4水平及卵巢組織Sp1表達均可能對上皮性卵巢癌患者的預后產生影響；多因素Logistic回歸分析發現，腫瘤直徑、臨床分期、病理分化程度、淋巴結轉移情況、IL-1β水平、HE4水平及卵巢組織Sp1陽性表達情況均是卵巢癌患者預后的獨立影響因素（P＜0.05），提示淋巴結轉移情況、臨床分期為Ⅲ～Ⅳ分期、中低分化、血清IL-1β、HE4高水平及卵巢組織Sp1陽性表達的患者，其預后往往更差，病死率更高，提示血清IL-1β、血清HE4水平及卵巢組織中Sp1表達能夠作為上皮性卵巢癌患者預后評估的重要輔助指標。

綜上所述，上皮性卵巢癌患者血清中的IL-1β、HE4水平較高，上皮性卵巢癌組織中Sp1的陽性表達率亦較高，均與患者的預后密切相關。臨床可將IL-1β、HE4及Sp1作為上皮性卵巢癌臨床診斷及預后預測的重要輔助指標。