葛葉粉對肉雞生長性能及血清生化、抗氧化和免疫指標的影響

龔建平，龍 偉，呂亞寧，吳 東，黃玉林，陳小連

（1. 江西中醫藥大學藥學院，江西 南昌 330004；2. 江西中醫藥大學中藥固體制劑制造技術國家工程研究中心，江西 南昌 330006；3. 江西省農業科學院畜牧獸醫研究所，江西 南昌 330200）

野葛(Pueraria lobata)是豆科葛屬多年生纏繞性藤本植物，具有較高的藥用和食用價值，我國衛生部已將葛根列入“既是食品又是藥品的物品名單”中。隨著人們對野葛研究的不斷深入和葛根深加工產品的進一步開發利用，野葛種植面積越來越大。葛的根、莖、葉和花均可入藥或開發為保健食品，然而人們對葛資源的利用仍然以其傳統藥用部位根部入藥或制作葛粉，生產和收獲時野葛的莖和葉多作廢棄物丟掉，造成資源的極大浪費和生態環境的污染[1]。已有研究表明，葛葉中含有17.6%～21.2%的粗蛋白質、2.36%～2.74%的粗脂肪、1.12%～1.38%的鈣、0.15%～0.29%的磷、粗纖維含量較低(8.85%～12.3%)，含有16 種氨基酸、多種礦物元素和維生素且含量較高[2-4]。另外，葛葉中還含有豐富的異黃酮類物質[5]，主要有葛根素、大豆苷、大豆苷元等多種生物活性物質[6-7]。《本草圖經》中記載葛“葉主金刃瘡，山行傷刺血出，卒不可得藥，但葉敷之，甚效”，葛葉具有收斂止血、消腫止痛的功效[8]。葛葉的飼用價值較高，已在豬、兔、羊等動物飼糧中應用，可一定程度提高動物生長性能和養殖效益[9-12]，然而有關葛葉在肉雞飼糧中的應用還未見報道。為此，在肉雞飼糧中添加葛葉粉，研究葛葉粉對其生長性能、血清生化、抗氧化和免疫指標的影響，可為葛葉在肉雞生產中的應用提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

葛葉粉由新鮮野葛葉片經日光曬干、粉碎制成，由德興市宋氏葛業有限公司提供，經試驗和檢測，干物質含量92.29%，總能16.31 MJ·kg?1，禽代謝能4.60 MJ·kg?1，粗 蛋 白 含 量17.06%，粗 纖 維 含 量15%，粗脂肪含量4.2%，粗灰分含量14.6%，鈣含量0.79%，總磷含量0.17%，蛋氨酸含量0.097%，賴氨酸含量0.129%，胱氨酸含量0.146%。

1.2 試驗動物與分組

選擇在同一條件下飼養的體重相近[(325.59 ±1.84) g]的21 日齡新廣麻雞母雞384 只，隨機分為4 組，每組6 個重復，每個重復16 只，各組試驗雞初始體重無顯著差異(P ＞ 0.05)，分別飼喂含0 (對照組)、1%、2%和3%葛葉粉的試驗飼糧，試驗期共49 d。試驗在江西省農業科學院畜牧獸醫研究所試驗雞場開展，采用三層立體網養，試驗雞自由采食和飲水，按常規程序接種免疫。試驗飼糧組成和營養水平如表1 所列。

1.3 測定指標與方法

1.3.1 生長性能

試驗期間以重復為單位記錄試驗雞的采食量、稱量試驗雞21 日齡、42 日齡和70 日齡空腹體重，計算各階段試驗雞的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料肉比(F/G)。

表1 試驗飼糧組成及營養水平(風干基礎)Table 1 Composition and nutrient levels of the experimental diets (air-dry basis)

1.3.2 血樣采集與血清制備

試驗期末于試驗雞禁食12 h 后，每重復選取2 只接近平均體重的雞，翅靜脈采血5 mL，分離出血清，于?20 ℃保存待測。

1.3.3 血清指標測定

采用試劑盒法測定血清生化指標，包括總蛋白(total protein, TP)、白 蛋 白(albumin, ALB)、尿 素 氮(blood urea nitrogen, BUN)、甘油三酯(triglyceride, TG)、總膽固醇(total cholesterol, TC)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)、堿 性 磷 酸 酶(alkaline phosphatase,ALP)、谷草轉氨酶(aspartate transaminase, AST)、谷丙轉氨酶(alanine aminotransferase, ALT)和抗氧化指標，包括總抗氧化能力(total antioxidant capacity, TAOC)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)活力及丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量，所用試劑盒購于南京建成生物工程研究所；免疫指標包括免疫球蛋白A (IgA)、IgG、IgM、腫瘤壞死因子-α (TNF-α)、白細胞介素-1β (IL-1β)、白細胞介素-2(IL-2)、白細胞介素-6 (IL-6)等，所用試驗盒購于美國R & D Systems 公司。

1.4 數據處理和統計分析方法

采用Excel 對數據進行整理，SPSS 21.0 統計軟件進行單因素方差分析，對組間差異進行LSD 多重比較，P ＜ 0.05 表示差異顯著，P ＞ 0.05 表示差異不顯著，結果以平均值 ± 標準差表示。

2 結果與分析

2.1 飼糧中添加葛葉粉對肉雞生長性能的影響

試驗結果(表2)顯示，肉雞飼糧中添加1%～3%葛葉粉對肉雞前期、后期及全期的平均日增重 、平均日采 食量和料肉比均無顯著影響(P ＞ 0.05)。

2.2 試驗飼糧中添加不同比例葛葉粉對肉雞血清生化指標的影響

試驗結果(表3)顯示，與對照組相比，肉雞飼糧中添加1%的葛葉粉對肉雞血清生化指標無顯著影響(P ＞ 0.05)；添加2%葛葉粉顯著提高肉雞血清ALB 和LDL 含量、降低TG 含量和AST 活性(P ＜ 0.05)；添加3%葛葉粉顯著提高肉雞血清TP、ALB 和LDL含量，顯著降低BUN、TG、TC 和HDL 含量、AST 和ALT 活性(P ＜ 0.05)。

表2 葛葉粉對肉雞生長性能的影響Table 2 Effects of kudzu leaf meal on the growth performance of broilers

表3 葛葉粉對肉雞血清生化指標的影響Table 3 Effects of kudzu leaf meal on the serum biochemical indexes for broilers

2.3 試驗飼糧中添加不同比例葛葉粉對肉雞血清抗氧化性能的影響

試驗結果(表4)顯示，與對照組相比，添加1%～3%葛葉粉對肉雞血清SOD 活性無顯著影響(P ＞ 0.05)，可顯著提高肉雞血清T-AOC 和GSHPx 活性(P ＜ 0.05)，添加3%葛葉粉可顯著降低血清MDA 含量。

表4 葛葉粉對肉雞血清抗氧化性能的影響Table 4 Effects of kudzu leaf meal on the serum antioxidant function of broilers

2.4 試驗飼糧中添加不同比例葛葉粉對肉雞血清免疫性能的影響

試驗結果(表5)顯示，與對照相比，添加1%葛葉粉顯著提高肉雞血清IgM 含量(P ＜ 0.05)；添加2%葛葉粉顯著提高肉雞血清IgM 含量、降低IL-1β 含量；添加3%葛葉粉顯著提高血清IgG、IgM 含量、顯著降低了IL-1β 和IL-2 含量。添加葛葉粉對肉 雞 血 清IgA、TNF-α、IL-6指 標 無 顯 著 差 異(P ＞0.05)。

表5 葛葉粉對肉雞血清免疫指標的影響Table 5 Effects of kudzu leaf meal on the serum immune function of broilers

3 討論與結論

已有研究表明，葛根中的主要活性成分葛根素、大豆苷、大豆苷元在葛葉中同樣存在，且含量較高[6]，部分葛葉中總黃酮含量還高于葛根。曾慧婷等[1]研究表明，野葛和贛葛2 號葛葉中總黃酮含量分別為1.83%和2.38%，分別比根中總黃酮含量高49.3%和13.3%。葛葉中還含有較高的粗蛋白、微量元素和維生素，由此可見，葛葉具有較大的開發利用價值。目前關于葛葉粉對肉雞生長性能的影響尚未見報道。在本研究中，肉雞飼糧中添加1%～3%葛葉粉對肉雞ADG、ADFI 和F/G 均無顯著影響，說明葛葉粉的添加不會影響肉雞飼料的適口性，添加量不超過3%對肉雞的生長無不良影響，從飼料資源的開發利用來看，在肉雞飼糧中適量的葛葉粉是可行的。本研究結果與野葛提取物對動物生長性能的影響結果類似。田青[13]和劉瑞玲[14]報道，葛根素可一定程度提高肉鴨的生長性能，但與對照組差異不顯著。劉博等[15]研究發現，在AA 肉雞基礎飼糧中添加10 mg?kg?1葛根總黃酮，對肉雞ADFI 無顯著影響，但提高了肉雞的ADG，降低了肉雞的F/G，而添加250 mg?kg?1和1 250 mg?kg?1葛根總黃酮，對AA肉雞的生長性能無顯著影響。高靖等[16]研究表明，葛根提取物對哺乳母豬的采食量、料乳比等生長性能無顯著影響。呂夢云[5]報道，葛藤黃酮提取物對肉雞的生產性能無顯著影響，也有其他黃酮類提取物對肉雞生長性能無顯著影響的報道[17-19]。

血清生化指標是反映機體物質代謝變化和組織功能正常的重要指標之一[20]。本研究發現，添加3%的葛葉粉顯著提高了肉雞血清總蛋白和白蛋白含量、降低了血清尿素氮含量，說明葛葉粉促進了肉雞體內蛋白質的合成代謝，蛋白質利用率提高，有利于機體生長，這與王芳芳等[21]對葛根異黃酮的研究結果一致。血清中甘油三酯、總膽固醇和脂蛋白含量是體內脂肪代謝的重要指標[22]。本研究中，添加3%的葛葉粉顯著提高了肉雞低密度脂蛋白含量，顯著降低了甘油三酯、總膽固醇和高密度脂蛋白含量，表明葛葉粉促進了肉雞脂類代謝，且對肉雞無毒副作用，這可能與葛根提取物中黃酮類物質具有調節血清和肝臟脂質代謝的作用有關[23]。谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶是機體內重要的轉氨酶，當血清中兩種酶含量升高，說明肝細胞受到一定程度的損傷[24]，因此也是反映肝臟和心臟健康狀況的重要指標[25]。本研究添加葛葉粉顯著降低了肉雞血清谷草轉氨酶和谷草轉氨酶活性，提示葛葉粉具有一定保護肉雞肝臟的作用，已有研究表明，葛根素對急性肝損傷具有保護作用[26]。

正常情況下，動物代謝過程產生的活性氧自由基會被體內固有抗氧化系統清除，自由基的生成和清除處于動態平衡中，一旦平衡被破壞，過量的自由基攻擊細胞膜、蛋白質、DNA 等生物大分子，引起細胞損傷和凋亡[27]。機體內T-AOC、SOD、GSH-Px活力和MDA 含量反映了機體抗氧化能力及脂質過氧化程度。有研究表明，葛根素具有較強的抗氧化、抗腫瘤和抗凋亡效果，保護血管和神經活性[28]。徐曉虹[29]報道，葛根素能顯著降低血清MDA 含量，使衰老小鼠體內血清SOD 的活性顯著升高。李德生等[30]報道，在母豬飼糧中添加葛根素類異黃酮物質能夠顯著降低母豬血清中MDA 含量。本研究結果發現，添加1%～3%葛葉粉可顯著提高肉雞血清T-AOC 和GSH-Px 活性，且添加3%葛葉粉顯著降低了血清MDA 含量，此結果與上述結論基本一致，其原因可能與葛葉中含有豐富的異黃酮類物質有關，其能夠顯著改善機體抗氧化水平。

血清免疫球蛋白和細胞因子是反映機體免疫功能的指標。已有研究表明，野葛提取物具有提高機體免疫力作用。徐洋等[31]研究表明，基礎日糧中添加0.1%葛根素提取物，肉牛血清中IgG、IgM 含量相比對照組顯著提高了9.45%、8.33%。葛根素對T 淋巴細胞免疫功能同樣有促進作用[32]。徐松琪[33]發現，葛根提取物可提高哺乳母豬血清IgA 和IgG含量，呂夢云[5]研究表明，葛藤黃酮提取物顯著提高了肉雞免疫性能。在本研究中，添加葛葉粉顯著提高了肉雞血清IgG 和IgM 含量，顯著降低了IL-1β和IL-2 含量，這提示飼糧中添加一定水平的葛葉粉具有改善肉雞免疫功能的作用。

綜上，飼糧中添加1%～3%葛葉粉對肉雞生長性能無負面影響，能在一定程度上提高肉雞抗氧化性能和免疫功能，有利于機體健康。葛葉粉可應用到肉雞飼料中，添加3%效果更好。